116例耐多药肺结核治疗转归情况影响因素分析

目的探讨现阶段广州市耐多药肺结核患者化疗效果及相关影响因素。方法采用logistic回归分析法对2003年1月至2007年12月在广州市胸科医院和广州市结核病防治所接受二线抗结核药物个体化治疗的116例耐多药肺结核患者化疗效果的诸多影响因素进行回顾性分析。结果116例耐多药肺结核患者中男性75例,占64.7%;女性41例,占35.3%。年龄在20～84岁之间,平均年龄(44.26±17.57)岁。116例耐多药肺结核患者治愈率55.2%(64/116);失败率25.0%(29/116);因结核病死亡8例,因其他疾病死亡5例,死亡率11.2%(13/116)。多因素logistic回归模型分析结果显示:未规则治疗(OR=13.745;95%CI:3.147～60.034)、化疗方案不合理(OR=9.897;95%CI:2.528～38.747)、肺部空洞性病灶(OR=10.295;95%CI:2.002～52.949)是现阶段广州市耐多药肺结核患者治疗失败和病死的危险因素。结论根据药敏结果和肺部空洞情况制定合理的治疗方案,强化对耐多药肺结核患者治疗督导管理,可以降低耐多药肺结核患者治疗失败率和病死率,控制耐多药肺结核的流行。

抗酸染色阳性痰涂片刮削物扩增分枝杆菌rpoB基因的初步探索

摘要目的：探讨直接从抗酸染色阳性痰涂片刮削物中扩增分枝杆菌rpoB基因的方法。方法：（1）使用引物Primerl：5’-CGTACGGTCGGCGAGCTGATC-3’，与Primer2：5’-AGGGGTITCGATCGGGCACATC-3’；Primer3：5’-TGqTCTICAAGGAGAAGCG-3’．与Primer4：5’-TCGTCGGCGGTCAGGTA-3’分别扩增18株临床分离结核分枝杆菌的rpoB基因，以检测引物设计的合理性。（2）分别采用普通PCR、TouchdownPCR、巢式PCR、二次PCR对直接从3＋～4＋抗酸染色痰涂片刮削物中提取的80例分枝杆菌基因组DNA进行rpoB基因扩增。（3）对80例抗酸染色痰涂片刮削物基因组DNA行实时荧光定量PCR以检测其拷贝数。（4）对18例临床分离菌株基因组DNA10^0、10^1、10^2、10^3、10^4、10^5、10^6、10^7倍稀释物行实时荧光定量PCR与普通PCR（Primerl与Primer2。Primer3与Primer4），以比较二者检出限。结果：（1）两对引物对18株临床分离结核杆菌rpoB基因扩增均有明亮目的条带，并经测序证实。（2）80例痰涂片刮削物基因组DNA扩增均未见目的奈带。（3）80例痰涂片刮削物基因组中．其中20例DNA的拷贝数为10z～10。copies／μL，60例DNA的拷贝数为10^4～10^5copies／μL。（4）两组引物能够扩增出rpoB基因的最高稀释倍数分别为10^4、10^5倍，其对应的荧光定量PCR检测拷贝数分别为10。copies／IxL、107copies／μL。结论：从抗酸染色阳性痰涂片刮削物中扩增分枝杆菌rpoB基因理论上可行，但在实际操作中尚存在-些问题有待进一步探索。抗酸染色涂片制作过程对基因提取及扩增的影响，痰涂片刮屑物基因组提取过程中多次离心造成的DNA量部分丢失均可能是本实验失败需要考虑的因素之-。