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小熊猫源犬瘟热病毒DNA疫苗构建及其在真核细胞的表达
1
作者
张晓明
陈武
彭仕明
《野生动物学报》
北大核心
2015年第3期279-283,共5页
根据Gen Bank中发表的犬瘟热病毒(CDV)的基因组序列设计了H和F基因的2对引物,通过RT-PCR扩增出从发病小熊猫分离的CDV的H和F基因,并将其克隆入到18T-simple载体上进行测序。使用Kpn I和Xho I限制性内切酶对重组载体进行双酶切并将目的...
根据Gen Bank中发表的犬瘟热病毒(CDV)的基因组序列设计了H和F基因的2对引物,通过RT-PCR扩增出从发病小熊猫分离的CDV的H和F基因,并将其克隆入到18T-simple载体上进行测序。使用Kpn I和Xho I限制性内切酶对重组载体进行双酶切并将目的基因克隆到pcDNA 3.1表达载体上,构建完成后转染293T细胞,转染48 h后,再利用RT-PCR和Western-blot检测目的基因的转录和目的蛋白的表达。结果表明,表达载体经转染后,在293T细胞中,目的基因均能得到转录而且正确表达。这为下一步基因疫苗的研究奠定了良好的基础。
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关键词
犬瘟热病毒
DNA疫苗
载体构建
真核表达
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职称材料
虎源传染性鼻气管炎病毒巢式PCR检测方法的建立
被引量:
3
2
作者
李林翔
韦增晖
+2 位作者
张晓明
彭仕明
陈武
《野生动物学报》
北大核心
2015年第4期369-372,共4页
为了建立虎源传染性鼻气管炎病毒巢式PCR(nested PCR)的快速鉴定方法,根据虎源传染性鼻气管炎病毒(FHV-1)的gD蛋白基因序列设计套式引物,进行特异性、敏感性和重复性实验,特异性试验表明,该方法可以特异扩增出FHV-1的gD基因片断,从猫泛...
为了建立虎源传染性鼻气管炎病毒巢式PCR(nested PCR)的快速鉴定方法,根据虎源传染性鼻气管炎病毒(FHV-1)的gD蛋白基因序列设计套式引物,进行特异性、敏感性和重复性实验,特异性试验表明,该方法可以特异扩增出FHV-1的gD基因片断,从猫泛白细胞减少症病毒、猫支原体和阴性对照的VERO细胞均未扩增出该条带,敏感性试验表明,nested PCR检测极限是1×10~2 copies/μl,而一步法PCR的有效扩增最低极限是1×10~5 copies/μl,前者的敏感性明显高于后者,重复性实验表明,不同情况下3次重复性试验,结果相同。用nested PCR对疑似感染FHV-1的样品进行检测,实验结果与病毒分离鉴定结果一致。本研究建立的nested PCR适用于野生猫科动物FHV-1感染的快速诊断与流行病学调查。
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关键词
虎源传染性鼻气管炎病毒
巢式PCR
一步法PCR
GD基因
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职称材料
南澳海水素在水族上的应用研究
3
作者
刘小青
周立文
+1 位作者
皱洪生
欧结灵
《北京水产》
1999年第6期32-33,共2页
有长期养殖淡水观赏鱼经验的广州动物园鱼馆,九十年代初期开始试养海水热带珊瑚礁鱼。人工海水的配制国外选用Backhaus,Lyman and Fleming,Kester等多个配方,国内选用朱树屏和一些改良配方。
关键词
海水素
水族馆
人工海水
珊湖礁鱼
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职称材料
保护海洋大使
4
作者
李大为
孙全辉(供图)
《生命世界》
2006年第11期84-85,共2页
它们在蔚蓝色的大海里已经徜徉了两亿多年,被誉为“海洋活化石”;它们身形庞大,却憨态可掬招人喜爱;它们行动缓慢,却又长年远涉重洋;它们就是与大海为伴的海洋爬行动物——海龟。
关键词
海洋爬行动物
保护
活化石
大海
海龟
原文传递
华南虎和东北虎β-干扰素基因的克隆与遗传进化分析
被引量:
2
5
作者
李林翔
程松
+2 位作者
张晓明
韦增晖
陈武
《畜牧与兽医》
北大核心
2015年第12期80-83,共4页
采集新鲜东北虎与华南虎的血液,提取基因组DNA,采用PCR技术扩增β-干扰素(IFN-β)基因,克隆到p MD19-T载体上,转化大肠杆菌DH5α,进行菌液PCR鉴定,筛选阳性重组克隆。核苷酸序列分析证实,所克隆到的老虎IFN-β基因全长561 bp,编码187...
采集新鲜东北虎与华南虎的血液,提取基因组DNA,采用PCR技术扩增β-干扰素(IFN-β)基因,克隆到p MD19-T载体上,转化大肠杆菌DH5α,进行菌液PCR鉴定,筛选阳性重组克隆。核苷酸序列分析证实,所克隆到的老虎IFN-β基因全长561 bp,编码187个氨基酸,核苷酸序列同源性为99.3%~99.5%。同时将核苷酸序列与其他几种哺乳动物进行遗传进化分析,其同源性在60.8%~98.4%。东北虎和华南虎及其他8种动物的IFN-β基因序列分析和系统进化分析表明,IFN-β基因存在种属的差异性,亲缘关系越近,同源性越高;老虎IFN-β基因的成功克隆,为进一步研究猫科动物IFN-β基因表达、生物学活性和应用奠定基础。
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关键词
华南虎
东北虎
β-IFN基因
克隆测序
进化分析
原文传递
衣服和鞋帽同样重要
6
作者
张桥
《全球商业经典》
2004年第14期48-49,共2页
鞋与帽的关系,是行动与思考的关系或行动模式与思考模式的关系。在现实的企业运行过程中,企业的管理行为、市场行为大多源于决策层的某种决策,这种决策的过程也可以理解为思考的过程。但许多企业的决策者都经常被一些问题所困扰,即...
鞋与帽的关系,是行动与思考的关系或行动模式与思考模式的关系。在现实的企业运行过程中,企业的管理行为、市场行为大多源于决策层的某种决策,这种决策的过程也可以理解为思考的过程。但许多企业的决策者都经常被一些问题所困扰,即在某一种决策的思考完成后,在将之转化为行动时所面临的两大问题:
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关键词
行动模式
思维模式
企业架构
员工
企业文化
决策者
原文传递
海龟漫谈
7
作者
李大为
孙全辉(供图)
《生命世界》
2006年第11期86-87,共2页
海龟是对生活在海洋里的各种龟类的总称,它们广泛地分布于全球各地温暖的海域里。全世界现存的海龟共有7种,我国有5种,分别是:海龟(也叫绿海龟),蠵(xi)龟、玳瑁、丽龟(也叫太平洋丽龟)和棱皮龟。
关键词
绿海龟
棱皮龟
太平洋
原文传递
题名
小熊猫源犬瘟热病毒DNA疫苗构建及其在真核细胞的表达
1
作者
张晓明
陈武
彭仕明
机构
广州
动物园
广州海洋馆
出处
《野生动物学报》
北大核心
2015年第3期279-283,共5页
文摘
根据Gen Bank中发表的犬瘟热病毒(CDV)的基因组序列设计了H和F基因的2对引物,通过RT-PCR扩增出从发病小熊猫分离的CDV的H和F基因,并将其克隆入到18T-simple载体上进行测序。使用Kpn I和Xho I限制性内切酶对重组载体进行双酶切并将目的基因克隆到pcDNA 3.1表达载体上,构建完成后转染293T细胞,转染48 h后,再利用RT-PCR和Western-blot检测目的基因的转录和目的蛋白的表达。结果表明,表达载体经转染后,在293T细胞中,目的基因均能得到转录而且正确表达。这为下一步基因疫苗的研究奠定了良好的基础。
关键词
犬瘟热病毒
DNA疫苗
载体构建
真核表达
Keywords
Canine distemper virus
Gene vaccine
RT-PCR
pcDNA
Expression eukaryotic
分类号
S858.93 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
虎源传染性鼻气管炎病毒巢式PCR检测方法的建立
被引量:
3
2
作者
李林翔
韦增晖
张晓明
彭仕明
陈武
机构
苏州市动物园
广东工业大学
广州
动物园
广州海洋馆
出处
《野生动物学报》
北大核心
2015年第4期369-372,共4页
基金
中国动物园协会2013年科研项目"虎源传染性鼻气管炎的快速诊断与新型疫苗的研究"
文摘
为了建立虎源传染性鼻气管炎病毒巢式PCR(nested PCR)的快速鉴定方法,根据虎源传染性鼻气管炎病毒(FHV-1)的gD蛋白基因序列设计套式引物,进行特异性、敏感性和重复性实验,特异性试验表明,该方法可以特异扩增出FHV-1的gD基因片断,从猫泛白细胞减少症病毒、猫支原体和阴性对照的VERO细胞均未扩增出该条带,敏感性试验表明,nested PCR检测极限是1×10~2 copies/μl,而一步法PCR的有效扩增最低极限是1×10~5 copies/μl,前者的敏感性明显高于后者,重复性实验表明,不同情况下3次重复性试验,结果相同。用nested PCR对疑似感染FHV-1的样品进行检测,实验结果与病毒分离鉴定结果一致。本研究建立的nested PCR适用于野生猫科动物FHV-1感染的快速诊断与流行病学调查。
关键词
虎源传染性鼻气管炎病毒
巢式PCR
一步法PCR
GD基因
Keywords
Feline Herpesvirus type 1 from tiger
Nested PCR
One step PCR
gD gene
Panthera tigris
分类号
S862.65 [农业科学—野生动物驯养]
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职称材料
题名
南澳海水素在水族上的应用研究
3
作者
刘小青
周立文
皱洪生
欧结灵
机构
广州海洋馆
出处
《北京水产》
1999年第6期32-33,共2页
文摘
有长期养殖淡水观赏鱼经验的广州动物园鱼馆,九十年代初期开始试养海水热带珊瑚礁鱼。人工海水的配制国外选用Backhaus,Lyman and Fleming,Kester等多个配方,国内选用朱树屏和一些改良配方。
关键词
海水素
水族馆
人工海水
珊湖礁鱼
分类号
S965.8 [农业科学—水产养殖]
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职称材料
题名
保护海洋大使
4
作者
李大为
孙全辉(供图)
机构
不详
广州海洋馆
助理总经理兼市场总监
出处
《生命世界》
2006年第11期84-85,共2页
文摘
它们在蔚蓝色的大海里已经徜徉了两亿多年,被誉为“海洋活化石”;它们身形庞大,却憨态可掬招人喜爱;它们行动缓慢,却又长年远涉重洋;它们就是与大海为伴的海洋爬行动物——海龟。
关键词
海洋爬行动物
保护
活化石
大海
海龟
分类号
Q915.864 [天文地球—古生物学与地层学]
原文传递
题名
华南虎和东北虎β-干扰素基因的克隆与遗传进化分析
被引量:
2
5
作者
李林翔
程松
张晓明
韦增晖
陈武
机构
苏州市动物园
广州
动物园
华南农业大学兽医学院
广州海洋馆
广东工业大学
出处
《畜牧与兽医》
北大核心
2015年第12期80-83,共4页
文摘
采集新鲜东北虎与华南虎的血液,提取基因组DNA,采用PCR技术扩增β-干扰素(IFN-β)基因,克隆到p MD19-T载体上,转化大肠杆菌DH5α,进行菌液PCR鉴定,筛选阳性重组克隆。核苷酸序列分析证实,所克隆到的老虎IFN-β基因全长561 bp,编码187个氨基酸,核苷酸序列同源性为99.3%~99.5%。同时将核苷酸序列与其他几种哺乳动物进行遗传进化分析,其同源性在60.8%~98.4%。东北虎和华南虎及其他8种动物的IFN-β基因序列分析和系统进化分析表明,IFN-β基因存在种属的差异性,亲缘关系越近,同源性越高;老虎IFN-β基因的成功克隆,为进一步研究猫科动物IFN-β基因表达、生物学活性和应用奠定基础。
关键词
华南虎
东北虎
β-IFN基因
克隆测序
进化分析
分类号
S859.1 [农业科学—临床兽医学]
原文传递
题名
衣服和鞋帽同样重要
6
作者
张桥
机构
广州海洋馆
董事长兼总经理
出处
《全球商业经典》
2004年第14期48-49,共2页
文摘
鞋与帽的关系,是行动与思考的关系或行动模式与思考模式的关系。在现实的企业运行过程中,企业的管理行为、市场行为大多源于决策层的某种决策,这种决策的过程也可以理解为思考的过程。但许多企业的决策者都经常被一些问题所困扰,即在某一种决策的思考完成后,在将之转化为行动时所面临的两大问题:
关键词
行动模式
思维模式
企业架构
员工
企业文化
决策者
分类号
F270 [经济管理—企业管理]
原文传递
题名
海龟漫谈
7
作者
李大为
孙全辉(供图)
机构
不详
广州海洋馆
助理总经理兼市场总监
出处
《生命世界》
2006年第11期86-87,共2页
文摘
海龟是对生活在海洋里的各种龟类的总称,它们广泛地分布于全球各地温暖的海域里。全世界现存的海龟共有7种,我国有5种,分别是:海龟(也叫绿海龟),蠵(xi)龟、玳瑁、丽龟(也叫太平洋丽龟)和棱皮龟。
关键词
绿海龟
棱皮龟
太平洋
分类号
Q959.63 [生物学—动物学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
小熊猫源犬瘟热病毒DNA疫苗构建及其在真核细胞的表达
张晓明
陈武
彭仕明
《野生动物学报》
北大核心
2015
0
下载PDF
职称材料
2
虎源传染性鼻气管炎病毒巢式PCR检测方法的建立
李林翔
韦增晖
张晓明
彭仕明
陈武
《野生动物学报》
北大核心
2015
3
下载PDF
职称材料
3
南澳海水素在水族上的应用研究
刘小青
周立文
皱洪生
欧结灵
《北京水产》
1999
0
下载PDF
职称材料
4
保护海洋大使
李大为
孙全辉(供图)
《生命世界》
2006
0
原文传递
5
华南虎和东北虎β-干扰素基因的克隆与遗传进化分析
李林翔
程松
张晓明
韦增晖
陈武
《畜牧与兽医》
北大核心
2015
2
原文传递
6
衣服和鞋帽同样重要
张桥
《全球商业经典》
2004
0
原文传递
7
海龟漫谈
李大为
孙全辉(供图)
《生命世界》
2006
0
原文传递
已选择
0
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