应用T/A策略克隆乙肝病毒pC/C及C基因

以克隆乙型肝炎病毒 pC/C及C基因为例 ,报道了在DNA重组中 ,当目的基因与载体末端不匹配时可采取的一新方法 .用内切酶切取的基因片段为平端时 ,可在含dATP的反应体系中 ,用Taq酶的末端转移酶活性在其 3′末端加上单个碱基 (dA)的突出尾 ;基因片段为 3′凹端时 ,可在含 4种dNTP的体系中 ,利用Taq酶的聚合酶活性先将其末端补平 ,再经末端转移酶活性在其 3′末端加dA尾 ;末端经此修饰的基因片段可亚克隆至T载体中 。