新生大鼠脑缺氧缺血后迟发性细胞死亡的研究

目的 探讨新生动物脑缺氧缺血 (HI)后迟发性细胞死亡是否存在细胞凋亡 ;分析不同检测手段的敏感性与特异性。方法 在建立新生大鼠脑HI损伤标准动物模型基础上 ,采用脑组织病理学HE染色光镜观察、透射电镜、原位末端标记 (ISEL)及DNA电泳等分别对HI后不同时间点的实验侧脑皮质、海马回中凋亡细胞的形态、特点等进行观察和比较。结果 光镜、电镜下显示实验侧脑皮质及海马神经元皱缩、染色质凝集并出现凋亡小体 ,ISEL及DNA电泳证实有裂解DNA存在。且发现脑皮质及海马回凋亡性细胞死亡通常自HI后 6～ 12h开始 ,2 4h达高峰。结论 缺氧缺血可引起新生动物脑细胞凋亡。在脑HI迟发性损伤中不仅存在坏死 ,而且存在着复杂的细胞凋亡过程。不同的检测手段均具有一定的局限性 ,只有结合多种方法进行检测 ,才能正确判定凋亡细胞的存在。

细菌DNA提取方法比较

目的 :比较细菌DNA4种提取方法的优缺点。方法 :采用水煮法、传统法、GenmictionDNAKit法、E .ZNA法分别制备 18种细菌DNA ,比较 4种方法提取DNA纯度及量的差异。结果 :4种方法制备的DNA均可成功应用于PCR扩增 ,水煮法与E .ZNA法提取DNA量都较大 ,但前者纯度低于后者 ;GenmictionDNAKit法提取DNA纯度高 ,但量较低 ;传统法提取的DNA量及纯度均较低 ,但经济、可靠。结论 :4种方法各具特点 ,应根据实验目的选用。

脑缺氧缺血后热休克蛋白基因的表达及地塞米松对其的调节

目的 探讨热休克蛋白 - 70 (HSP70 )基因在缺氧缺血新生大鼠脑内的表达及地塞米松 (DEX)对其影响。方法 通过建立新生大鼠缺氧缺血性脑病动物模型 ,应用快速竞争性RT PCR技术 ,分别对缺氧缺血(HI) ,DEX预处理后予缺氧缺血 (DH) ,缺氧结束后即刻予DEX (HD) ,DEX加假手术 (DS) ,正常对照 (NS)五组动物的实验侧大脑组织中HSP70mRNA的表达进行半定量分析。结果 缺氧缺血后新生大鼠脑内HSP70mRNA的表达明显增强 ,其表达高峰 (3.86 8± 1.42 1)位于HI后 12h左右 ,并在 12～ 48h内维持较高水平 (3.186±0 .80 3,2 .5 6 8± 0 .70 9)。DEX预处理可使HSP70mRNA的表达明显下降或几乎完全被抑制 ,其 12h ,2 4h ,48h分别为 0 .5 2 6± 0 .5 93,0 .492± 0 .45 0 ,0 .434± 0 .42 8。HI后给予DEX对HSP70mRNA的表达则无明显影响。其12h ,2 4h ,48h分别为 3.46 0± 1.30 9,3.0 2 0± 0 .5 6 5 ,2 .2 42± 0 .5 0 4。结论 DEX预处理可抑制HI对HSP70mRNA过表达的诱导。推测DEX预处理后使HSP70mRNA的表达下降 ,可能与DEX抑制了神经元的过度兴奋有关。

儿童造血干细胞移植程序

造血干细胞移植(HSCT)是治疗儿童恶性疾病(白血病、某些恶性实体瘤、淋巴瘤等)、再生障碍性贫血、重症免疫缺陷症、地中海贫血、急性放射病、造血及免疫系统功能障碍性疾病的行之有效的方法.特别是对常规化疗耐药或复发的难治性白血病以及某些遗传性疾病患儿,造血干细胞移植可能是唯一的手段.

McAbs接种孕鼠体内对HFRS病毒感染新生子代乳鼠的被动保护作用

选BALB/c纯系小白鼠孕鼠于产前5d和3d,皮下接种抗HFRS病毒血凝素McAbs和多克隆免疫鼠血清,待其子鼠产后第3天,腹腔接种100LD_(50)HFRS病毒陈株攻击感染子代乳鼠。结果表明,接种孕鼠体内的该McAbs,可经胎盘进入子鼠体内,能被动地保护新生子代乳氧免于HFRS病毒致死性感染。孕鼠产前5d和3d,皮下接种该McAbs可100％保护新生子代乳鼠,而孕鼠产前4d接种多克隆免疫鼠血清,保护率只有42.9％,但感染对照组新生子代乳鼠则全部死亡。

静脉留置针在NICU中的应用

新生儿重症监护室(NICU)是集中治疗危重新生儿的病室,是保证对患儿病情连续监护以及有效进行抢救而设立的。新生儿病情变化快,在救治中药物应用最好的途径是静脉用药,尤其对吸吮吞咽功能差的新生儿必须依靠静脉供给营养及液体来维持机体的正常代谢。为提高NICU救治的成功率,保证静脉通道通畅是救治成功的关键。

新生儿常见感染病原菌的16SrDNA寡核苷酸阵列快速诊断

目的 探讨PCR结合寡核苷酸阵列杂交快速诊断常见新生儿感染病原细菌方法。方法 通过对 4 0多种常见病原菌的 16SrDNA序列比较分析 ,在中间找到一段两端高度保守中间相对变异的序列。依据其保守序列设计一对通用引物 ,用于扩增细菌 16SrDNA目的基因。同时依据相对变异区域的序列设计常见的 8种病原细菌的探针 ,阵列于带正电的尼龙膜上 ,与通用引物的PCR产物杂交 ,在一个反应体系中 1次可检测出标本中可能存在的常见致病菌。结果 设计的通用引物能有效扩增出常见的细菌目的序列。实验结果表明寡核苷酸阵列均能特异地与其检测细菌的通用引物PCR产物杂交 ,而不与其它所试细菌通用引物PCR产物杂交 ,说明探针具有很强的特异性。进一步采用寡核苷酸阵列对临床分离的菌株进行鉴定 ,以细菌自动鉴定仪做对比 ,结果表明寡核苷酸阵列能检出常见的 8种病原菌。

长效确杜先联合拉莫三嗪及维生素B_6治疗婴儿痉挛

目的 探讨长效确杜先联合拉莫三嗪及维生素B6治疗婴儿痉挛的安全性。方法 在应用大剂量维生素B6[2 0～ 5 0mg/ (kg·d) ]基础上 ,加用小剂量人工合成的ACTH 长效确杜先 [0 0 10～ 0 0 15mg/ (kg·d) ]及拉莫三嗪治疗婴儿痉挛 2 5例。结果 长效确杜先疗程结束后 1个月 ,2 2例患儿 (88 0 % )的发作得到完全控制 ,长效确杜先用药至抽搐发作完全停止的平均时间为 (3 7± 2 0 )天 (1 5～ 6 0天 )。 2 5例患儿平均随访 (2 0 2± 14 1)个月 (6～ 30个月 ) ,9 1% (2 / 2 2 )患儿出现复发 ,无演变为其它类型发作者。 9例 (36 0 % )出现短暂的、不同程度的兴奋症状 ,7例(2 8 0 % )食量明显增加 ,无严重毒副作用发生。结论 长效确杜先联合拉莫三嗪及维生素B6治疗婴儿痉挛 ,能迅速有效地控制其痉挛发作 ,且复发率低 ,副作用小 ,是治疗婴儿痉挛更为安全有效的方法。