基质金属蛋白酶在肝细胞癌中表达的实验研究

目的 探讨基质金属蛋白酶 - 2 (MMP- 2 )、基质金属蛋白酶 - 9(MMP- 9)在肝细胞癌的表达及其与侵袭转移过程中的关系 ,进一步了解肝细胞癌侵袭转移的发生机理。方法 通过免疫组化 SABC法 ,检测 32只大鼠的肝细胞癌模型标本肝癌及癌旁肝组织 MMP- 2、MMP- 9的表达 ,应用图像分析法进行定量分析 MMP- 2、MMP- 9的变化。门静脉癌栓形成作为肝细胞癌侵袭转移标志。结果 免疫组化显示 :癌及其癌旁肝组织均有 MMP- 2、MMP- 9表达 ,MMP - 2、MMP- 9在肝癌组织的表达显著高于癌旁肝组织 (P<0 .0 1) ;MMP- 2、MMP- 9在有侵袭转移肝癌组织的表达显著高于无侵袭转移肝癌组织 (P<0 .0 1)。 MMP- 2、MMP- 9在无侵袭转移肝癌、癌旁肝组织及有侵袭转移癌旁肝组织的表达无显著差异 (P>0 .0 5 )。结论 肝细胞癌在有侵袭转移情况下 MMP- 2、MMP- 9在癌组织表达明显增高。预示可通过检测癌组织 MMP- 2、MMP- 9表达水平帮助判断肝癌复发、转移风险。因此 。

用流式细胞仪测定人肝细胞系DNA指数值作为其生物功能筛选指标的研究

目的 了解DNA指数 (DI)与人肝细胞系生物功能之间的关系。探讨DI值可否作为人工肝生物材料的初步筛选指标。方法 收集国内 9株人工肝细胞系 ,分别编号为细胞系 1- 9(CL1-9)。分别培养后获取细胞。取正常人全血分离淋巴细胞 ,作为正常二倍体对照。以流式细胞仪(FCM)测定 9株人肝细胞系DI值作为分化指标 ,判断人肝细胞系的分化情况。人肝细胞系分别接种1.2× 10 6个细胞 ,收集其培养生长旺盛、生物功能良好的第 5天时的培养上清液 ,测定上清液中的尿素、人白蛋白和安定含量 ,计算细胞系尿素合成、人白蛋白合成和安定转化量。进行DI值和肝功能指标间的相关性分析。CX7自动生化分析仪测定尿素浓度 ;用人白蛋白放免试剂盒经改良后采用放射免疫抗原竞争法测定人白蛋白浓度 (人白蛋白与牛血清白蛋白无交叉反应 ) ;培养上清中另加入 4 μg/ml安定作肝细胞药物代谢功能指标 ,提取后以 75 2型紫外分光光度计测定安定含量。采用双变量相关与回归分析方法进行统计学分析。结果 人肝细胞系DI值与人肝细胞系尿素合成量、人白蛋白合成量及安定转化量均呈线性相关 ,相关系数分别为 - 0 .94 37、- 0 .8795、- 0 .9386。结论 CL1分化程度最高 ,生物功能最好 ;

聚合酶链式反应检测胆囊结石患者胆汁细菌DNA及意义

目的研究胆囊结石患者胆汁细菌ＤＮＡ，探讨胆结石形成与细菌感染的关系。方法采用聚合酶链式反应（ＰＣＲ），对７０例胆囊结石患者胆汁中５种细菌ＤＮＡ进行研究。结果５种细菌中细菌ＤＮＡ存在５６例，其中单菌ＤＮＡ２９例，双菌ＤＮＡ１９例，多菌ＤＮＡ８例；首次在胆汁中检测出幽门螺杆菌。结论胆结石患者胆汁中存在多种细菌ＤＮＡ；胆结石核心形成可能与细菌感染有关。

腹腔镜肝脏切除术应用进展

随着腹腔镜外科技术的逐渐成熟,陆续形成了许多较专业的应用领域,其中包括肝脏外科治疗的腹腔镜技术应用.上世纪90年代初即有人开展腹腔镜肝脏切除术(Laparoscopic liver resection,LLR)[1,2],但由于肝脏的特殊解剖生理特点,以及目前缺乏有效的适于肝脏止血的腹腔镜止血设备,腹腔镜技术在肝脏外科治疗中的应用缓慢,LLR成为难度最大的腹腔镜治疗技术,尤其是多肝段腹腔镜切除术更被认为是"手术禁区".肝脏的外科治疗将成为腹腔镜技术应用的最后障碍[3].尽管如此,腹腔镜外科专家仍作了不懈努力,并且取得了较大进展.本文就此作一综述.

原代猪肝细胞培养体系及培养模式的初步探讨

目的 探索一高密度、高效率的原代猪肝细胞培养方法 ,为生物人工肝的生物材料提供一种有效的培养模式。方法 采用改良Seglen二步胶原酶灌注法分离肝细胞 ,分别将 5× 10 6 的肝细胞加入胎牛血清、猪门静脉血清的培养体系中进行方瓶静止培养及聚球培养。结果 肝细胞在接种后呈明显的Cytodex 3聚集趋势。门静脉血清培养体系中肝细胞的Albumin、Urea合成能力明显高于胎牛血清组。在培养后的前 3周门静脉血清培养体系中聚球细胞模式优于微载体静止培养模式。结论 与胎牛血清培养体系相比 ,猪门静脉血清培养体系更适合原代猪肝细胞高密度培养。聚球培养是一种较为理想的原代猪肝细胞培养模式。