香雪药业的技术创新之路

对于高新技术的评价一般遵循两个原则：一是前沿学科的技术发明，一是适用新技术的工业化应用，前者引导产业技术的发展，后者推动产业实现跨跃式发展。广州香雪药业是广东省医药工业的前卫企业，也是科技创新最为活跃的企业之一。本文综述了香雪药业在高技术和适用新技术工业化应用方面的工作进展，以供读者参考借鉴。

不同产地广藿香特征的观测和比较

利用田间性状和显微观察,以及扫描电镜等方法对4种不同产地的广藿香进行了比较。所得结果可为广藿香的品种鉴别和划分提供参考。

不同产地广藿香花的观察比较

通过光学显微镜、扫描电镜和显微图像分析系统等方法,对不同产地广藿香花的形态特征进行了系统观察和比较,显示各产地之间存在差异,为广藿香的种质鉴定增添了内容,也为品种的培育和繁殖提供依据。

广藿香裂解色谱指纹图谱及其聚类分析

目的 研究比较各地广藿香的指纹图谱 ,并考察了裂解温度、裂解时间对指纹图谱的影响。方法 采用裂解色谱法 (PGC)测定 ,模糊聚类法分析。结果 不同产地样品的指纹图谱既有相似性 ,也有特征性 ,谱图的重现性好 ,其 RSD均≤ 2 .75 %。结论 此方法具有快速、简便、准确等特点 ,裂解温度。

施肥水平对广藿香生长及挥发油积累的影响

一年生广藿香不同施肥水平试验的结果表明 :施肥水平对广藿香生长、挥发油含量、鲜重以及干物质积累有很大的影响。与对照相比较 ,高施肥量的单株鲜重平均增加 72 2 % ,中施肥区增加了 5 0 7% ,低施肥区增加19 4 % ,从而提高挥发油的总含量。

广藿香组培苗快繁与工厂化生产程序的研究

目的:筛选出适合于广藿香愈伤组织诱导、丛芽增殖和生根的培养基配方,建立广藿香组培苗工厂化生产操作体系。方法:以改良MS为基本培养基,配以不同含量的有机营养物和生长物质等组织培养技术。结果:基本培养基MS配以低浓度的6-BA能促进丛芽大量增殖,香蕉汁和蔗糖浓度有利于生根和壮苗。结论:利用组织培养技术是工厂化生产大批量广藿香种苗的有效途径。

GC法测定广藿香提取物中百秋李醇和广藿香酮的含量

目的 :建立广藿香中百秋李醇和广藿香酮的含量测定方法。方法 :采用气相色谱法对广藿香药材提取物进行分析 ,以内标法同时测定广藿香中百秋李醇和广藿香酮的含量。结果 :百秋李醇在 1 0 2～ 6 35mg/ml范围内 ,广藿香酮在 0 5 5～ 4 36mg/ml的范围内呈良好线性关系。结论 :所建立的方法稳定可靠 ,可用于该药材的质量控制。

抗病毒口服液中广藿香含量测定方法研究

目的:建立抗病毒口服液中挥发性成分百秋李醇的含量测定方法。方法:采用气相色谱法对抗病毒口服液进行分析,以内标法测定百秋李醇的含量。结果:百秋李醇在0.052 5～0.420 0 mg/ml范围内呈良好线性关系。结论:所建立的方法稳定可靠,可用于该制剂的质量控制。

沉香药材GC指纹图谱的研究

目的建立沉香药材的指纹图谱。方法用GC法对沉香药材进行分析,采用氢火焰离子检测器,HP-5毛细管柱(0.32 mm×32 m×0.25μm),分流比为50∶1,从60℃至300℃程序升温进行指纹图谱检测。结果不同产地沉香GC指纹图谱有明显差异。结论本法可为不同产地沉香的鉴别提供依据。

不同产地广藿香标准汤剂HPLC指纹图谱的聚类分析和判别分析

目的:建立广藿香药效物质基础标准汤剂的HPLC指纹图谱分析方法,结合多元数理统计方法对不同产地的广藿香进行聚类分析并建立判别模型。方法:基于所建立的广藿香标准汤剂HPLC指纹图谱方法,对海南及广东阳春、湛江、肇庆等4个产区的广藿香进行测定。在此基础上,采用主成分分析与聚类分析和判别分析相结合的方法,进行不同产地广藿香的分类研究,并同时建立判别模型。结果:广藿香标准汤剂HPLC指纹图谱共标定了19个共有峰,经主成分分析,前5个主成分累计贡献率81.7%,可解释大部分的样品信息。基于前5个主成分得分的聚类分析可将广藿香聚为4类,分别是海南、肇庆、湛江和阳春广藿香,最终广东产的又聚为一类,所建立的判别模型经交叉验证,100%已分组观察值已正确地分类,回代验证,分组正确率100%,可正确判别4个产地的样本。结论:所建立的广藿香标准汤剂指纹图谱方法准确可靠,重复性好,聚类分析分类准确,所建立的判别模型良好,可应用于实际应用中广藿香的产地区分。

不同产地广藿香的SCoT分子鉴定

通过提取广藿香[Pogostemon cablin (Blanco)Benth.]DNA,正交设计PCR反应体系,筛选获得广藿香PCR扩增的SCoT引物,应用NTsys 2.10e软件并采用UPGMA法进行聚类分析,对分布于广州、阳江、肇庆、湛江和海南等共16个居群的广藿香样品进行分子鉴定。结果表明,SCoT引物碱基序列共扩增出167条条带,其中多态性条带有108条,多态百分率占64.7%,各品种间的相似系数分布在0.69～0.91,不同产地广藿香分别聚为一类。表明不同产地广藿香有丰富的遗传多态性,且SCoT分子标记可以作为不同产地广藿香的鉴定依据。

DNA条形码及ISSR技术对广藿香种质资源的分析

目的采用DNA条形码技术和分子标记技术研究不同产地广藿香的遗传多样性,探讨从基因水平区分不同产地广藿香的方法。方法分别采用DNA条形码技术和ISSR分子标记技术对不同产地的广藿香进行分析。DNA条形码——PCR扩增ITS2和psbA-trnH条形码序列,产物纯化后测序,采用软件CLUSTALX 1.81和MEGA 6.06对序列进行对比分析。ISSR分子标记——采用60条ISSR引物进行试验,筛选出条带清晰、多态性好的ISSR引物进行PCR、电泳及聚类分析。结果 DNA条形码技术分析结果显示不同产地广藿香差异很小;ISSR分子标记技术分析结果显示肇庆和阳春的广藿香亲缘关系较近,湛江广藿香与其他两个产地亲缘关系均较远。结论 ISSR分子标记技术可作为鉴别不同产地广藿香的依据之一。

石牌广藿香与海南广藿香挥发油的指纹图谱分析

目的建立广藿香挥发油的GC指纹图谱,鉴别不同品种、产地的广藿香。方法采用气相色谱法建立石牌广藿香、海南广藿香挥发油的GC指纹图谱,并用质谱对其成分进行确认。结果经过对二者指纹图谱特征的对比以及相似度评价,确立了石牌广藿香与海南广藿香的7个共有峰。结论该指纹图谱具有较强的专属性,可作为广藿香内在质量评价和鉴定依据。

基于灰色关联分析法评价广藿香药材质量

[目的]建立灰色关联度模型,评价不同产地广藿香药材的质量。[方法]以20个不同产地广藿香药材为研究对象,测定百秋李醇、广藿香酮、挥发油、浸出物、总灰分含量,结合灰色关联度分析法构建广藿香药材质量的灰色关联度评价模型。[结果]20个产地广藿香样品的相对关联度为0.3188~0.6169,其中10个产地样品的相对关联度>0.50,其他产地样品的相对关联度<0.50。肇庆高要、雷州英利、阳春潭水产地广藿香样品的相对关联度排名靠前,药材质量优,海南万宁、琼海产地广藿香样品的相对关联度排名靠后,药材质量差。[结论]灰色关联度分析法及模型可用于广藿香药材的质量评价,该研究结果可为广藿香资源的开发与利用提供参考依据。

HPLC同步测定泽兰配方颗粒指纹图谱与咖啡酸、迷迭香酸含量

目的:建立泽兰配方颗粒的HPLC指纹图谱测定方法,并同时对咖啡酸、迷迭香酸的含量进行测定,为泽兰配方颗粒的质量评价提供依据。方法:采用HPLC法,色谱柱为C18,以乙腈-0.1%磷酸为流动相进行梯度洗脱,检测波长为325nm,流速为1.0mL/min,测定了10批泽兰配方颗粒。结果:指纹图谱检测结果中共呈现7个特征峰。含量测定结果表明,咖啡酸、迷迭香酸分别在0.001~0.2054μg、0.0052~1.0304μg范围内的线性关系良好,r=1,两种成分平均回收率分别为99.2%、104.23%,RSD分别为1.23%、1.45%。结论:建立了同步测定泽兰配方颗粒指纹图谱与咖啡酸、迷迭香酸含量的方法,方法操作简便,准确,重现性好,可用于泽兰配方颗粒的质量研究和评价。

GC-MS法测定广藿香油中塑化剂的含量

目的建立一种广藿香油中邻苯二甲酸酯类塑化剂的定性检查及含量测定方法。方法以不同广藿香油作为样品,经正己烷溶解、超声波辅助提取等预处理,以保留时间定性,外标法定量。结果15种邻苯二甲酸酯类塑化剂检测的线性范围在0.05~1.0 mg·L-1之间,检出限在0.5~5μg·L-1之间,回收率为92.53%~102.4%,相对标准偏差为0.2%~5.2%。10批次广藿香油的检测结果显示,6批次样品检出了1~2种邻苯二甲酸酯,共检出邻苯二甲酸酯3种,检出率最高的为邻苯二甲酸二甲酯(DMP),检出率为40%。结论该方法具有检测限低,灵敏度高等特点,可用于广藿香油中塑化剂的定性定量分析。

广藿香不同软化方法比较及炮制工艺优化

[目的]优选广藿香的最佳炮制工艺,并应用于实际生产中。[方法]采用汽相置换式润药机,分别考察广藿香茎和叶的炮制工艺。以炮制品的性状、醇溶性浸出物得率、百秋李醇含量为指标,采用单因素试验优选出茎的最佳软化方法,然后采用正交设计试验L_9(3~4),考察切段长度、干燥温度和干燥时间等因素对茎炮制工艺的影响。以水分、百秋李醇和挥发油含量为指标,优选叶的最佳炮制工艺。[结果]广藿香茎的最佳炮制工艺:茎抢水清洗1次,置真空汽相置换润药中50℃润制2.0 h,取出后,切制成段(4 mm左右),再于50℃干燥1.5 h。叶的最佳炮制工艺:叶抢水清洗1次,置50℃干燥135 min。[结论]经过工艺验证可知,该工艺稳定可靠,确定的广藿香炮制工艺可用于实际生产。

广藿香超微粉表面包覆技术工艺的优化

目的优化广藿香超微粉表面包覆技术工艺。方法以均匀度为指标,优选表面包覆剂(食用淀粉、药用二氧化硅、β-环糊精)的包覆比例。以水分、挥发油、醇溶性浸出物、百秋李醇、广藿香酮含有量为指标,长期稳定性试验考察超微粉在24个月内的质量变化情况。结果表面包覆剂最佳包覆比例为微粉∶药用二氧化硅4∶1、微粉∶食用淀粉3∶1、微粉∶β-环糊精3∶1。广藿香在储存过程中,各指标成分含有量均呈明显下降的趋势,而表面包覆能有效降低其速率,其中以β-环糊精效果较好,药用二氧化硅和食用淀粉无明显差异,最佳包覆条件为微粉∶β-环糊精3∶1。结论表面包覆技术对减缓广藿香微粉挥发性成分的损失具有明显效果,可为相关产品开发提供了一定技术支持。

正交试验法优选酒香附炮制工艺

目的:优选酒香附的炮制工艺。方法:采用L9(34)正交试验法,以α-香附酮、总黄酮、浸出物含量为考察指标,筛选香附的最佳酒制工艺。结果:香附粒度大小、烘烤温度对实验结果有显著性影响,酒香附的最佳炮制工艺为30%黄酒量,浸润1h,过65目筛,烘烤温度60℃。结论:优选的工艺稳定可靠,研究结果可为酒香附炮制工艺的改进和生产工艺技术参数的量化奠定基础。

13份化橘红种质的鉴定研究

为了有效地鉴定和区分化橘红种质,改善市场上橘红产品混乱的现状。本研究以13份化州当地不同产区的化橘红(大合黄绒、大合密叶、平定黄绒、平定密叶、平定红肉、山车正毛、带刺正毛、山车凤尾、山车副毛、山车假西洋、山车光青、平定金钱笃、平定实生梨)作为材料,通过植物学形态分析、干品化学成分分析和分子标记分析,并对所得结果进行相关性分析。结果表明:正毛和非正毛种质在叶长、叶形指数、L^(*)、a^(*)和b^(*)及果形指数上有显著差异:正毛种质的叶形较非正毛的更细长,色差值的绝对值更大,其果型指数偏小,形状上更偏向高扁圆形,而非正毛种质更偏向球形;正毛与非正毛化橘红种质醇溶性浸出物的含量有显著差异,且绝大多数正毛化橘红的野漆树苷含量高于5.00 mg/g,而二者的柚皮苷和水溶性浸出物均无显著差异;在遗传距离为15 cM时,ISSR和SRAP分子标记能够将13份种质分成正毛1组和非正毛3组;当P<0.05时,仅有果实形状、果型指数与野漆树苷和柚皮苷含量呈显著相关,水溶性浸出物与L^(*)值呈显著正相关。结合3种鉴定结果表明,分子标记区分化橘红种质是最为可靠的,其次利用植物形态(花瓣长度、果实形状与果型指数)或化学成分(野漆树苷和醇浸出物含量)也能在一定程度上区分正毛和非正毛种质。