大鼠局灶性脑缺血预处理后蛋白激酶样内质网激酶及葡萄糖调节蛋白78表达的变化

目的观察缺血预处理对大鼠脑缺血再灌注后蛋白激酶样内质网激酶（PERK）和葡萄糖调节蛋白（GRP78）mRNA及其蛋白表达和神经元凋亡的影响。方法sD大鼠120只，随机分为假手术组、脑缺血再灌注组（MCAO）、脑缺血预处理组（BIP），每组按照再缺血后12h，1、2、3d4个时间点分为4个亚组。采用二次线栓法制备大鼠局灶性脑缺血预处理模型，分别用原位杂交法和Western blot法观察再缺血后各个时间点PERK和GRP78mRNA及其蛋白的表达变化，用流式细胞术检测神经细胞凋亡率。结果①MCAO组12hPERKmRNA表达达高峰，随再灌注时间延长其表达逐渐下降；BIP组缺血各时间点其表达水平均明显下降。MCAO组PERK蛋白表达于缺血再灌注后12h开始明显上升，24h达高峰，2d后表达开始减弱；BIP组较MCAO组PERK表达明显降低。②MCAO组12hGRP78mRNA及其蛋白表达均达高峰，随再灌注时间延长其表达逐渐下降；BIP组较MCAO组GRP78mRNA及其蛋白各时间点表达均明显升高（mRNA：12h：136．70±9．53，F=32．265；24h：147．54±9．97，F=54．920；2d：158．16±9．44，F=45．374；3d：165．85±10．26，F=16．493，土句P〈0．05；蛋白：12h：1．319±0．116，F=5．619，P〈0．05；24h：1．226±0．108，F=33．742，P〈0．01；2d：1．183±0．112，F=46．556，P〈0．01；3d：1．115±0．098，F=11．730，P〈0．05）。⑧MCAO组12h细胞凋亡发生率明显增加，24h时达到高峰，以后逐渐下降；BIP组各个时间点神经元凋亡发生率较MCAO组明显降低。结论脑缺血预处理可能通过抑制内质网应激后PERK表达和诱导GRP78表达发挥其神经保护作用。