兔骨内高压型膝关节骨性关节炎模型的建立

背景:虽然实验中使用的膝关节骨性关节炎动物模型众多,但研究中医手法作用机制所采用的动物模型应能承受"动"的作用并发挥出正常"动"产生的效应。目的:确定建立骨内高压型膝关节骨性关节炎动物模型的效果。方法:无菌条件下显露新西兰兔右侧臀部的臀下静脉,右下腹部的股静脉和大隐静脉,结扎并切断;以同样手术显露相应血管但不结扎切断血管的动物及正常组动物作为对照。术后8周末处死所有动物,取动物右膝内侧胫骨平台软骨组织通过大体观察及苏木精-伊红染色、光镜观察软骨组织的结构变化,评估动物模型的造模效果。结果与结论:模型组关节面粗糙、灰黄色,可见明显缺损及骨赘形成,达到初中期变化。假模组关节面粗糙,灰白色无光泽,处于早期变化。正常组关节面光滑,边缘规整,软骨半透明有光泽,无变化。结果提示,通过结扎动物臀下静脉、股静脉及大隐静脉8周后,可形成早中期膝关节骨性关节炎动物模型。

揉髌手法对兔膝关节软骨细胞凋亡及Bcl-2、Bax和Fas表达的影响

背景:现代研究证实细胞的过度凋亡加速软骨组织的退变,而手法的力学刺激对关节软骨影响的分子层面研究至今少有报道。目的:观察揉髌手法对兔膝关节软骨细胞凋亡及Bcl-2、Bax、Fas表达的作用。方法:50只新西兰兔随机等分为正常组、假手术组、模型组、手法组和针剂组,后3组建立右下肢骨内高压型膝关节骨性关节炎模型。造模1周后,手法组使用揉髌手法隔天治疗1次,每次10min,共治疗5周共17次;针剂组关节内注射玻璃酸钠液0.6mL,每周1次,共5次。结果与结论:造模后8周末取兔右膝关节内侧胫骨平台软骨组织,苏木精-伊红染色提示模型组软骨组织退变明显,软骨细胞凋亡率明显增加(P<0.01),胫骨平台软骨组织中Bcl-2、Bax、Fas表达率明显升高(P<0.01),而手法组和针剂组软骨组织退变轻微,软骨细胞凋亡率及Bax、Fas表达率较模型组降低(P<0.01),但胫骨平台软骨组织中Bcl-2表达升高(P<0.01)。说明揉髌手法与关节内注射玻璃酸钠一样可以明显降低兔膝关节软骨细胞的凋亡率,其作用机制与上调Bcl-2表达,下调Bax、Fas表达有关。

揉髌手法对兔膝关节软骨细胞凋亡及增殖细胞核抗原表达的影响

背景:有研究表明手法的力学刺激作用和关节被动活动可促进促进关节周围组织的自我修复,但手法治疗对膝关节软骨细胞凋亡和增殖的影响目前未见报道。目的:用揉髌手法施术于骨内高压型动物的右下肢,探讨对兔膝关节软骨细胞凋亡和增殖细胞核抗原表达的影响。方法:将新西兰兔随机分为5组:揉髌手法组、玻璃酸钠组和模型组采用手术结扎股静脉,臀下静脉、大隐静脉方法建立右下肢骨内高压型模型;假手术组予以手术暴露但不结扎相应血管;正常对照组不作任何处理。造模1周后,揉髌手法组采用揉髌手法连续治疗5周共17次;玻璃酸钠组每周右膝关节内注射1次,连续5周。于造模后12周末分别取所有动物右膝胫骨平台软骨组织,采用原位末端标记法观察软骨细胞凋亡,免疫组化法观察增殖细胞核抗原的表达。结果与结论:揉髌手法组软骨细胞凋亡率低于模型组(P<0.01)。揉髌手法组增殖细胞核抗原表达率高于模型组(P<0.01)。结果表明揉髌手法治疗可以降低实验兔膝关节软骨细胞凋亡率及提高增殖细胞核抗原表达率。