BOPPPS结合对分课堂在中医专业生物化学实验中的探索

生物化学实验是中医专业重要的医学基础课程,而传统实验教学模式难以满足现代社会对创新性中医人才的需求,因此,迫切需要引入、探索新型的教育理念和教学模式,以激发学生的自主学习能力,培养学生的创新精神。文章介绍了BOPPPS与对分课堂的原理,并通过具体案例说明将两种教学模式相结合应用于中医专业生物化学实验中的流程和效果。

YTHDF基因DNA甲基化与乙肝疫苗低/无免疫应答水平关系研究

目的:从表观遗传角度探究N6-甲基腺苷(m 6 A)修饰相关的YTHDF基因DNA甲基化与乙肝疫苗接种者免疫低/无免疫应答水平的关系。方法:收集263例汉族儿童为研究对象。对儿童的外周血进行乙肝血清标志物检测,将乙型肝炎表面抗体(anti-HBs)浓度<100 mIU/ml者纳入病例组,将anti-HBs≥100 mIU/ml者纳入对照组。使用Methyl Target技术检测YTHDF基因位点的DNA甲基化水平,分析YTHDF基因81个位点CpG DNA甲基化水平与乙肝疫苗免疫应答水平的关系。结果:病例组纳入104例,对照组纳入159例,两组年龄和性别分布比较差异无统计学意义(均P>0.05)。病例组YTHDF1_1基因23位点、YTHDF1_2基因69位点与YTHDF1_2基因140位点甲基化水平均高于对照组(均P<0.05)。多因素非条件Logistic回归分析表明,YTHDF1_1基因23位点和YTHDF1_2基因140位点甲基化水平可能是乙肝疫苗低/无免疫应答的危险因素,而YTHDF1_2基因69位点和YTHDF2_1基因28位点甲基化水平可能是乙肝疫苗低/无免疫应答的保护因素(均P<0.05)。结论:YTHDF1_1基因23位点和YTHDF1_2基因140位点甲基化水平可能是乙肝疫苗低/无免疫应答的危险因素,YTHDF1_2基因69位点和YTHDF2_1基因28位点甲基化水平可能是乙肝疫苗低/无免疫应答的保护因素。

FTO基因DNA甲基化与乙肝疫苗免疫低/无应答水平的关系

目的通过探讨m6A去甲基化酶FTO基因DNA甲基化与乙肝疫苗免疫低/无应答水平的关联性,为预测个体乙肝疫苗的应答水平、研发新型HepB疫苗提供科学的依据。方法采用非匹配病例对照的研究方法,招募于2014-2016年间至广西南宁市三所三级甲等医院就诊的8~9月龄263例儿童(已完成乙肝免疫接种程序)作为研究对象,根据乙肝表面抗体(HBsAb)水平将抗-HBs浓度<100 mIU/mL作为观察组,抗-HBs浓度≥100 mIU/mL作为对照组。采用Methyl Target技术检测FTO基因位点的DNA甲基化水平,分析FTO基因28个位点CpG岛DNA甲基化水平与乙肝疫苗免疫应答水平的关系。结果FTO基因各基因位点的DNA甲基化水平都比较低;观察组和对照组的DNA甲基化水平在FTO_1基因222位点、FTO_2基因72位点的差异具有统计学意义;观察组FTO_1基因222位点的DNA甲基化水平高于对照组(Z=-2.38,P=0.009)。观察组FTO_2基因72位点的DNA甲基化水平高于对照组(Z=-1.71,P=0.044)。结论提示人体中FTO基因存在发生甲基化的可能,乙肝疫苗接种者低/无免疫应答水平可能受FTO_1基因222位点、FTO_2基因72位点的影响。

WTAP基因DNA甲基化与广西汉族儿童乙肝疫苗低/无应答水平的关联性

目的探讨WTAP基因DNA甲基化与广西汉族儿童乙肝疫苗(HepB)应答水平的关联性,以期了解其他可能影响乙肝疫苗应答水平的遗传因素,为新型HepB的研发提供新的科学依据。方法选取在2016年1月至12月间至广西3家医院就诊的8~9月龄且全程接种HepB的263名汉族儿童作为研究对象。对研究对象进行乙肝两对半检测,根据排除和纳入标准筛选符合要求的研究对象纳入本次研究。根据乙肝表面抗体浓度(抗-HBs)将研究对象分成无应答(<10 mIU/mL)、低应答(10 mIU/mL≤抗-HBs<100 mIU/mL)、正常应答(100 mIU/mL≤抗-HBs<1000 mIU/mL)和高应答(≥1000 mIU/mL)组,使用非匹配病例对照研究的方法,将抗-HBs<100 mIU/mL作为无/低应答组,≥100 mIU/mL作为正常/高应答组。采用Panel多重PCR技术、重亚硫酸盐转化技术和通过illumina平台进行高通量测序技术,分析研究WTAP基因38个CpG位点DNA甲基化与HepB免疫应答水平的关系。结果经Mann-Whitney U检验比较无/低应答组和正常/高应答组WTAP基因的DNA甲基化水平后发现,无/低应答组WTAP_2基因43位点DNA甲基化水平低于正常/高应答组DNA甲基化水平(P<0.05)。非条件Logistics回归分析结果显示,WTAP_2基因的43位点DNA甲基化水平和HepB应答水平存在关联性(OR=0.73,95%CI:0.538~0.995),43位点DNA低甲基化水平降低了HepB低/无应答的风险。结论WTAP_2基因的43位点的DNA低甲基化水平可能是广西汉族儿童HepB免疫低/无应答水平的保护因素,可为提高HepB低/无应答人群提高疫苗应答水平提供理论性参考依据。