miR-21靶向调控PDCD4在四逆汤减轻大鼠心肌细胞损伤中的意义

目的探讨四逆汤含药血清在减轻大鼠心肌细胞损伤中,微小RNA-21(miR-21)靶向调控程序性细胞死亡因子4(PDCD4)的意义。方法选择SD大鼠制备四逆汤含药血清,体外培养大鼠心肌细胞(H9C2),通过RNA干扰技术,转染miR-21 mimic及miR-21 inhibitor,建立稳定的miR-21 mimic和miR-21 inhibitor细胞系。细胞分别给予阿霉素(ADR)10μg/mL作用24 h损伤和无ADR处理,再各分为四个水平,分别为miR-21 mimic、miR-21 inhibitor、四逆汤+miR-21mimic、四逆汤+miR-21 inhibitor,另设正常对照组及四逆汤组,共10组。采用实时荧光定量PCR法检测各组细胞miR-21、PDCD4表达,采用流式细胞术检测各组心肌细胞凋亡百分率。结果与正常对照组相比,ADR+miR-21 mimic组、ADR+miR-21 inhibitor组、ADR+四逆汤+miR-21 mimic组、ADR+四逆汤+miR-21 inhibitor组细胞凋亡百分率、PDCD4表达量增加,而miR-21的表达量下降(P均<0.05或0.01);ADR+miR-21 mimic组相比,ADR+四逆汤+miR-21 mimic组miR-21表达上升,PDCD4下降,凋亡百分率降低(P均<0.05);与ADR+miR-21 inhibitor组相比,ADR+四逆汤+miR-21 inhibitor组细胞miR-21表达上升,PDCD4下降,凋亡百分率降低(P均<0.05)。结论四逆汤可抑制阿霉素损伤大鼠心肌细胞凋亡,减轻心肌细胞损伤,其机制可能与上调miR-21的表达靶向调控PDCD4有关。

补阳还五汤含药血清对急性心肌梗死大鼠内皮祖细胞增殖、迁移和黏附能力的影响

目的:探讨补阳还五汤对内皮祖细胞功能(EPCs)的干预作用,探索该方的治疗作用机制。方法:本研究取健康大鼠54只,共分为空白组、假手术组、急性心肌梗死大鼠模型组、中药干预组、西药对照组及中西医结合组。对大鼠进行分组干预,空白组给予等量生理盐水灌胃;假手术组假手术后给予等量生理盐水灌胃;模型组造模后给予等量生理盐水灌胃;中药干预组造模后给予补阳还五汤灌胃;西药对照组造模后给予阿托伐他汀灌胃;中西医结合组造模术后给予补阳还五汤和阿托伐他汀钙灌胃。运用密度梯度离心的方法,分离培养各组大鼠EPC,采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法、黏附能力测定实验以及改良的Boyden小室的方法,分析对比各组EPC的增殖、黏附以及迁移能力。结果:第7天、第14天及第4周,模型组大鼠外周血EPCs计数、增殖、迁移及黏附能力均较假手术组显著下降;中药干预组、西药对照组及中西医结合组外周血EPCs计数、增殖、迁移及黏附能力较模型组均显著增加,差异有统计学意义(P<0.05);中西医结合组较中药干预组及西药对照组对EPCs功能的改善作用更为显著,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:他汀类药物联合补阳还五汤较单纯的中药或西药治疗可更好地改善急性心肌梗死大鼠的内皮功能,为改善急性心肌梗死患者远期预后提供新的研究切入点。

黄芪甲苷对盐酸多柔比星损伤心肌细胞的保护作用及其机制研究

目的探讨黄芪甲苷对盐酸多柔比星(DOX)损伤心肌细胞的保护作用及其机制。方法体外培养大鼠心肌细胞(H9C2细胞),用慢病毒表达系统,在H9C2心肌细胞内过表达或干扰微小RNA-21(miR-21)。将细胞分为6组:正常组、模型组、miR-21过表达组、miR-21干扰组、miR-21过表达加黄芪甲苷组和miR-21干扰加黄芪甲苷组。除正常组外,其余各组用DOX 10μg·mL-1造模24 h。然后,miR-21过表达加黄芪甲苷组、miR-21干扰加黄芪甲苷组均加入160μg·mL-1黄芪甲苷作用于细胞72 h。用流式细胞技术检测心肌细胞凋亡率;以实时定量-聚合酶链反应检测miR-21和程序性细胞凋亡因子4(PDCD4)的表达。结果正常组、模型组、miR-21过表达组、miR-21干扰组、miR-21过表达加黄芪甲苷组和miR-21干扰加黄芪甲苷组的细胞凋亡率分别为(6. 01±0. 95)%,(24. 65±2. 28)%,(21. 49±1. 90)%,(29. 06±2. 13)%,(12. 52±1. 46)%和(20. 62±1. 89)%;上述这6组miR-21的表达(相对表达量)分别为1. 09±0. 10,0. 43±0. 10,0. 96±0. 30,0. 49±0. 20,1. 66±0. 30和1. 08±0. 38;上述这6组的PDCD4表达(相对表达量)分别为1. 02±0. 10,2. 19±0. 28,1. 57±0. 08,2. 45±0. 46,0. 95±0. 18和1. 61±0. 39。模型组与正常组相比,上述指标的差异均有统计学意义(P <0. 05,P <0. 01);miR-21过表达组和miR-21过表达加黄芪甲苷组与模型组比较,上述指标的差异均有统计学意义(均P <0. 05);miR-21干扰加黄芪甲苷组与模型组比较,上述指标的差异均有统计学意义(均P <0. 05)。结论黄芪甲苷可保护损伤心肌细胞,其机制可能是上调miR-21的表达、靶向调控PDCD4,从而抑制心肌细胞凋亡。