低氧诱导乳腺癌癌相关成纤维细胞能量代谢重塑细胞模型的构建

目的:构建低氧诱导的乳腺癌癌相关成纤维细胞(cancer-associated fibroblasts,CAF)能量代谢重塑(energy metabolism reprogramming,EMR)细胞模型,为其后续分子机制和生物学功能研究奠定基础。方法:以成对的永生化的乳腺癌癌旁组织来源正常成纤维细胞(normal fibroblasts,NF)和CAF为处理对象,根据[O2]不同,NF和CAF细胞各分为常氧处理组和低氧处理组。不同氧浓度分别处理NF和CAF细胞0、1、3、6、12 h和24 h。葡萄糖消耗实验和乳酸生成实验检测细胞糖酵解水平;线粒体活性检测实验评估细胞氧化磷酸化(oxidative phosphorylation,OP)活性;Western blot实验检测细胞能量代谢相关蛋白包括单羧酸转运子4(monocarboxylate transporters 4,MCT4)、细胞色素氧化酶Ⅳ亚基(cytochrome oxidaseⅣsubunit,COXⅣ)和低氧诱导因子1α亚基(hypoxia inducible factor 1αsubunit,HIF1α)的蛋白表达量。结果:低氧与CAF细胞EMR呈剂量效应和时间效应关系,1%[O2]作用24 h为最佳低氧处理条件。与NF常氧组相比,低氧处理(1%[O2]作用24 h)使CAF葡萄糖吸收和乳酸产生能力分别增强2倍和3.1倍,明显抑制其氧化磷酸化活性,使CAF细胞中MCT4和HIF1α蛋白表达量分别上升3.1倍和3.9倍及COXⅣ下调90%。结论:低氧(1%[O2]作用24 h)使CAF具有典型的EMR表型。本研究成功构建低氧诱导的乳腺癌CAF细胞EMR模型。

Visfatin与消化系统肿瘤的关系研究进展

内脏脂肪素,又称内脂素（Visfatin）,是一种由脂肪细胞分泌的细胞因子,也称前B细胞集落增强因子（PBEF）或烟酰胺磷酸核糖转移酶（NAMPT）,在脂肪组织中高度表达。Visfatin是催化烟酰胺生物合成烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）第一步反应的限速酶,对细胞生长、凋亡和血管生成具有调节作用,在NAD代谢,肿瘤发生、发展,炎症和衰老等方面扮演多种角色。

ATM蛋白激酶促细胞增殖作用研究进展

一直以来,共济失调毛细血管扩张突变基因(ATM)编码的蛋白激酶相关研究主要集中在DNA双链断裂损伤修复领域。近年来越来越多研究表明,氧化激活的ATM激酶具有重要的促细胞增殖作用,其潜在的机制与其氧化还原稳态维持功能、糖代谢调控功能和细胞增殖信号通路活性调节功能等密切相关。本文综述ATM激酶相关研究进展,尤其是其增殖调控功能相关研究,将有利于深入了解ATM蛋白激酶促细胞增殖的机制及其临床应用。

2011~2013年多重耐药鲍曼不动杆菌临床分布及其耐药性分析

目的：了解我院2011~2013年临床分离多重耐药鲍曼不动杆菌（Multidrug-resistant A.baumannii,MDRAB）临床分布及其耐药性特征,为临床合理使用抗生素提供可靠依据。方法采用 TDR-200B 系统进行细菌鉴定和药敏试验。运用 WHONET 5.4软件分析试验数据。结果在2011~2013年12月期间,我院共分离126株 MDRAB,该菌临床分离呈逐年快速递增趋势,主要来源于呼吸内科、重症医学科、神经外科、普外科等患有基础疾病并长期使用抗菌药物的老年患者、重大外科手术等危重症患者以及免疫能力低下的患者,以呼吸道感染最常见,对临床常用抗菌药呈高水平耐药。结论我院 MDRAB 检出频率逐年上升,临床分布不均,耐药性严重。

Hedgehog信号通路调控Twist高表达乳腺肿瘤干细胞样细胞的富集及迁移

目的 :探讨阻断Hedgehog信号通路对Twist高表达乳腺癌干细胞样细胞微球体富集及其迁移的影响。方法:分别采用蛋白质印迹法和微球体细胞形成实验检测正常乳腺上皮MCF-10A细胞、乳腺癌MCF-7和HS578T细胞中Twist蛋白的表达水平及微球体细胞形成能力。蛋白质印迹法检测MCF-10A、MCF-7和HS578T微球体细胞中Twist、GLI1家族锌指蛋白(GLI family zincnger1,GLI1)和音猬因子(Sonic Hedgehog,SHh)蛋白的表达情况。采用不同浓度的Hedgehog信号通路特异性抑制剂GDC-0449(10、20和30μmol/L)处理Twist蛋白表达水平最高的乳腺癌HS578T微球体细胞96 h,分别采用微球体细胞形成实验和Transwell小室法检测GDC-0449对HS578T微球体细胞再成球能力和迁移能力的影响,并进一步采用蛋白质印迹法检测HS578T微球体细胞中GLI1、性别决定区Y框蛋白2(sex determining region Y-box 2,SOX2)和八聚体绑定转录因子4(octamer-binding transcription factor 4,OCT4)蛋白的表达情况。结果:乳腺癌HS578T细胞中Twist蛋白的表达水平明显高于MCF-10A和MCF-7细胞(P值均<0.05),且具有最强的微球体形成能力(P值均<0.05)。HS578T微球体细胞中Twist、GLI1和SHh蛋白水平均明显高于MCF-10A和MCF-7微球体细胞(P值均<0.05);经抑制剂GDC-0449处理后,乳腺癌HS578T微球体细胞的成球能力及迁移能力均明显降低(P值均<0.05),GLI1、SOX2和OCT4蛋白的表达水平明显下调(P值均<0.05)。结论:阻断Hedgehog信号通路的活化可抑制Twist高表达乳腺癌细胞微球体的形成及迁移能力。

外泌体应用于肝细胞癌诊疗的研究进展

已知外泌体有多种生物学功能,包括参与免疫反应和抗原提呈,尤其是作为囊泡可以在细胞间运输蛋白、病毒、脂质和RNA。外泌体是一种重要的细胞间物质和信息交流的工具,它通过在细胞间传递基因和蛋白信号,调节肿瘤微环境,从而介导肝癌细胞的凋亡、分化、血管生成和转移。早期诊断对提高肝细胞癌患者的生存率极其重要。因此,有研究认为,外泌体可以作为一种新的分子标志物用于肝癌诊断,并且可以用作肝癌治疗的潜在靶标。本文即对外泌体在肝癌中的作用机制和临床应用做一综述。