活血消痛酒质量标准及制备工艺研究

目的:建立活血消痛酒质量标准并对其制备工艺进行优化。方法:采用薄层色谱法(TLC)对活血消痛酒的君药两面针、三七和臣药血竭鉴别;采用高效液相色谱法(HPLC)测定三七苷R_(1)、人参皂苷Rg_(1)、人参皂苷Rb_(1)的含量。色谱柱为Waters X Bridge Shield RPC18(4.6×250 mm,5μm),流动相:水(A)-乙腈(B),梯度洗脱(0~15 min,20%~23%B;15~25 min,23%B;25~35 min,23%~40%B;35~36 min,40%~90%B);流速为1 mL/min;柱温30℃;检测波长为203 nm;进样量为10μL;采用中心组合设计(CCD)响应面法对活血消痛酒工艺优化。结果:两面针、三七、血竭薄层色谱特征斑点清晰,分离度良好,阴性对照无干扰;三七皂苷R_(1)、人参皂苷Rg_(1)、人参皂苷Rb_(1)线性范围内良好(r^(2)>0.999),阴性对照无干扰、精密度、稳定性、重复性、加样回收率结果良好,10批活血消痛酒的三种皂苷含量范围为0.4225~0.5982 mg/mL;采用CCD法结合实际情况得出最优工艺:含醇量为42%、物料比为16.7 mg/mL、浸泡时间为7d。结论:该研究建立的方法操作简便、准确可靠,可用于活血消痛酒的质量标准研究;本研究通过中心组合设计法,科学、全面准确地找到了活血消痛酒的最优工艺。

中药复方壮肝逐瘀煎对肝纤维化模型大鼠微循环的影响

目的利用中药复方本身具有的多途径、多环节、多靶点的特点,探讨壮肝逐瘀煎及其不同拆方组合对肝纤维化模型大鼠微循环的调控。方法采用四氯化碳(CCl4)复合因素大鼠肝纤维化模型,观察各组大鼠肝纤维化情况;用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中血管活性物质[内皮素1(ET-1)、一氧化氮(NO)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的含量;用RT-PCR技术检测各组VEGF、PDGF的含量;应用超声微泡造影评估各组大鼠肝脏微循环、微血管血流状态和速度。结果①C组及不同组合分组和G组均能不同程度改善肝纤维化大鼠肝脏病理组织、减轻大鼠肝纤维化的程度,与G组相比,有统计学意义;②与正常对照组相比,病理模型组中各给药组对ET-1、NO、iNOS含量均有明显的影响(P<0.01或P<0.05),肝纤维化程度越高,ET-1、NO、iNOS的含量越高;VEGF、PDGF的含量也越高;各用药组HVAT、HA-HVTT均有不同程度的延长(P<0.01)。③与病理模型组比较,各用药组血清ET-1、NO、iNOS含量均有不同程度的降低(P<0.05),其中C组(壮肝逐瘀煎全方组)下降最为明显;各用药组VEGF、PDGF的表达量均下降(P<0.05),而C组与G组(大黄?虫丸组)比较(P>0.05),无明显差异;各用药组HVAT、HA-HVTT均有不同程度的延长(P<0.01),其中以C组明显。

《伤寒论》咳嗽病六经辨治规律与临床应用

《伤寒论》以六经辨证为纲,相关方证为目,构建咳嗽的六经辨证体系。太阳伤寒咳嗽麻黄汤主之,太阳中风咳嗽以桂枝汤治之,太阳伤寒咳嗽兼水饮以小青龙汤为代表剂。阳明热化咳嗽伴不恶寒、咽痛、脉浮数为主要临床症状,类似于肺热咳嗽,治之以桔梗汤或桑杏汤;阳明寒化咳嗽,以吴茱萸汤主之。少阳咳嗽为胆气宣发不利,郁而化热,治疗以小柴胡汤加减。太阴咳嗽选用附子理中汤、理中汤或香砂四君子汤加五味子、细辛、厚朴、前胡,紫菀、款冬花等降逆化痰。少阴热化证以猪苓汤治之,寒化证以吴茱萸汤主之;除了热化与寒化证,少阴阳郁咳嗽以四逆散主之。厥阴咳嗽以乌梅丸、吴茱萸汤主之。本文从六经阐述其证治规律,再结合临床典型医案,以期对中医临床辨治咳嗽具有指导作用。

27nt-miRNA对间充质干细胞向血管平滑肌细胞分化的影响

为探讨27nt-miRNA对间充质干细胞向血管平滑肌细胞分化影响,构建27nt-miRNA过表达、反义序列Anti-27nt-miRNA以及阴性对照的表达质粒,慢病毒包装后分别转染人脐带间充质干细胞(hUCMSC),加入Ⅳ型胶原诱导hUCMSC定向分化为血管平滑肌细胞。四唑盐(MTT)比色法检测分化后细胞活力,免疫细胞化学染色法检测分化后细胞SM22α(兔抗平滑肌22α,smooth muscle 22α)的表达,Western印迹法和RT-PCR检测分化后细胞内的SMA (兔抗平滑肌肌动蛋白,smooth muscle actin) mRNA、SM 22α mRNA及其蛋白质表达情况。经检测,27nt-miRNA过表达分化组与阴性对照组相比,细胞活力下降20.48%(P<0.05),SMA mRNA、SM22α mRNA及其蛋白质表达量明显升高(P<0.05);而Anti-27nt-miRNA分化组细胞活力上升了18.07%(P<0.05),SMA mRNA、SM22α mRNA及其蛋白质表达量下降(P<0.05)。综上所述,27nt-miRNA能够促进间充质干细胞向血管平滑肌细胞分化,并且抑制分化后的细胞活力。

赪桐根3种提物部位对炎症组织及血清中主要炎症因子表达的影响

目的:观察赪桐根3种提取部位对炎症组织及血清中主要炎症因子表达的影响。方法:建立去肾上腺小鼠、佐剂性关节炎大鼠模型,采用ELISA法测定小鼠致炎组织液中丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)及大鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、前列腺素E2(PGE2)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、白三烯B4(LTB4)的含量。结果:与模型组比较,正丁醇、95%乙醇部位对去双侧肾上腺小鼠足肿胀有明显抑制作用;正丁醇部位对双侧肾上腺小鼠耳肿胀有明显抑制作用;3个部位均能降低致炎足组织液中MDA、NO含量并提高SOD活性,可显著降低佐剂性关节炎大鼠血清中TNF-α、PGE2、IL-1β、IL-6、LTB4的含量。结论:赪桐根3个部位抗炎作用可能部分依赖于下丘脑-垂体-肾上腺(HPAA)系统,并且与调节MDA、NO、TNF-α、PGE2、IL-1β、IL-6、LTB4的合成与分泌,提高SOD活性有关。