UHPLC-Q-TOF-MS技术在中药及中药复方制剂研究中的应用

超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱串联(UPLC-Q-TOF-MS)技术特点是效率高、灵敏度高、分辨率高,也能获取一些信息,比如离子碎片、化合物的相对分子质量、元素组成等,能迅速确定出相关化合物结构。中药尤其复方制剂是极端复杂的体系,存在多靶点、多组分、多途径的协同效应,这些特征给科研工作者的研究带来了巨大挑战。这项技术使得中药复杂体系的深入研究成为可能。本文对近年UPLC-Q-TOF-MS技术在代谢组学、测定化学成分、血清药物化学、入血成分领域中的应用进行概述,并指出其在中药及中药复方制剂领域中的优势和未来的发展方向。

中药制剂对南美白对虾存活率、体质量的影响

南美白对虾（Penaeus vannamei Boone）是当今世界养殖产量最高的三大对虾种类之一,在我国各地区都有很大的养殖面积[1]。近年来随着养殖规模的不断扩大、养殖密度的不断增加,加上海边天气变化大,南美白对虾经常出现胃肠病、肝病等,导致南美白对虾对环境的适应性降低、存活率下降,使虾农遭受惨重损失[2]。目前市面上常用抗生素等西药治疗南美白对虾常见病,虽有一定的疗效,但是有一定的副作用,

基于GEO和分子对接的荔枝核黄酮类化合物治疗冠状病毒肺炎机理研究和3CLpro抑制剂虚拟筛选

挖掘冠状病毒感染肺炎的潜在靶基因,以及筛选荔枝核中抑制冠状病毒3CL蛋白酶(3CLpro)的黄酮类化合物.利用GEO数据库下载SARS-CoV感染的小鼠肺炎的基因集,利用R语言筛选差异表达基因.通过文献筛选荔枝核的黄酮类化合物,采用SWISS数据库、DRAR-CPI服务器预测化合物潜在作用靶点.使用String数据库构建成分靶点-疾病靶点互作网络,通过Cytoscape的cytoHubba插件筛选核心靶点.通过DAVID进行GO和KEGG分析,预测冠状病毒感染肺炎的发病机制及荔枝核黄酮类化合物的作用机制.借助分子对接虚拟筛选治疗冠状病毒感染肺炎的黄酮类化合物.筛选得到761个差异基因作为冠状病毒感染肺炎的潜在关键基因,其中上调757个,下调4个,它们主要富集在单纯疱疹感染、PI3K-Akt信号通路、甲型流感、炎症免疫等信号通路.荔枝核中19个黄酮类化合物可作用于380个靶点,在成分靶点-疾病靶点互作网络中挖掘得到100个核心靶点,它们参与调控PI3K-Akt、HIF-1等多条信号通路.分子对接结果显示,柚皮芸香苷、柚皮苷、原花青素A2、原花青素、芦丁5个黄酮类化合物与3CLpro抑制剂位点的亲和力均高于阳性对照药利托那韦、达鲁纳韦.冠状病毒感染肺炎可能与PI3K-Akt信号通路、甲型流感、炎症免疫等信号通路异常有关.荔枝核中黄酮类化合物可通过作用于PI3K-Akt、TNF、HIF-1等多条信号通路,发挥抗炎和抗纤维化作用,其中柚皮芸香苷、柚皮苷、原花青素A2、原花青素、芦丁5个黄酮类化合物还可能是3CLpro的抑制剂.荔枝核黄酮类化合物具有治疗冠状病毒感染肺炎及后期引起的肺纤维化的潜力.

壮药火索藤汤剂指纹图谱的建立及含量测定研究

目的 建立壮药火索藤汤剂的HPLC指纹图谱及含量测定方法。方法 通过HPLC法建立10批壮药火索藤汤剂HPLC指纹图谱,指认共有峰,并进行聚类分析(CA)、主成分分析(PCA)、正交偏最小乘法-判别分析(OPLS-DA)等分析,筛选出差异性物质并进行含量测定。结果 指纹图谱中共有峰12个、相似度均≥0.91,指认出9号峰为金丝桃苷、12号峰为槲皮苷;CA、PCA分析结果一致,10批药材样品共分为3组;OPLS-DA分析筛选出8个差异物质,金丝桃苷和槲皮苷的含量分别为0.15~0.66 mg·g^(-1)、1.71~6.52 mg·g^(-1),样品中S4、S5批次指标成分含量最高。结论 本研究建立的HPLC指纹图谱和含量测定方法稳定性好,可用来对该制剂质量控制和成分物质基础提供相关参考。

中药配方颗粒与标准汤剂等效性的研究概况

中药配方颗粒是将中药饮片根据标准汤剂的条件制备成颗粒形式,使用时直接用水冲服,是对中药饮片的传承与发展,在保留了饮片药性同时,推进中药饮片现代化的发展。对患者来说除了服用方便,其携带存储便携,对工作人员来说,工作效率得到有效提高,工作环境得到改善。但是在中药配方颗粒临床应用的推进过程中,其与标准汤剂的等效性如何。为了中药配方颗粒临床的使用及推广提供理论依据,本文就中药配方颗粒与标准汤剂的等效性进行了综述,希望可以为中药配方颗粒的临床使用提供新思路,真正体现及发挥其价值。

基于指纹图谱及多成分定量的千里光标准汤剂质量评价

目的:建立不同产地千里光标准汤剂指纹图谱及含量测定方法。方法:建立15批千里光标准汤剂HPLC指纹图谱,结合相似度评价、聚类分析、主成分分析及正交偏最小二乘判别分析进行评价;对15批样品中绿原酸、金丝桃苷、异槲皮苷的含量进行测定,计算其出膏率及转移率。结果:15批千里光标准汤剂样品共标定12个共有峰,指认出7个成分,样品与对照图谱的相似度>0.950;聚类分析可将15批样品聚为2类;主成分分析结果显示,云南、湖北、安徽产地样品的综合得分较高;OPLS-DA筛选出7个质量差异成分;15批样品出膏率为11.18%~18.98%,绿原酸、金丝桃苷、异槲皮苷的含量分别为3.509~22.673 mg/g、0.391~2.620 mg/g、0.277~1.247 mg/g,转移率分别为32.32%~47.58%、10.57%~26.90%、12.36%~33.45%。结论:该研究建立的指纹图谱及含量测定方法准确、稳定、简便,可用于千里光标准汤剂的质量控制和评价。

千里光药材功效关联物质预测研究

目的预测并分析千里光药材功效关联物质。方法采用高效液相色谱(HPLC)法,色谱柱为Shim-pack GIST C_(18)柱(250 mm×4.6 mm,5µm),流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液(梯度洗脱),流速为1.0 mL/min,检测波长为345 nm,柱温为25℃,进样量为10µL。建立15批药材样品的HPLC指纹图谱,采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)进行相似度评价,确定共有峰。通过聚类分析、主成分分析初步预测潜在功效成分;运用网络药理学技术挖掘成分潜在作用靶点,构建蛋白相互作用(PPI)网络,并进行基因本体论(GO)功能富集分析及京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析与成分-靶点-通路网络构建,进一步预测千里光药材潜在功效成分及核心靶点、通路等方面的作用机制。结果共有18个共有峰,指认出其中7个,分别为绿原酸、咖啡酸、金丝桃苷、异槲皮苷、芦丁、异绿原酸A、异绿原酸C,15批药材样品的相似度介于0.892~0.997(仅1批小于0.9);可聚为2类,归纳出4个主成分;7种(共有峰)成分共关联109个靶点,18个关键靶点(包括EGFR,JUN,ESR1,MMP-9等);共富集到GO条目233条,其中生物学过程197条,细胞组成17条,分子功能19条,分别主要涉及细胞对辐射的反应、膜筏、信号受体活性调节等;富集到KEGG通路59条,主要涉及肿瘤信号通路、内分泌耐药通路、松弛素信号通路等。结论千里光药材可能通过咖啡酸、异槲皮苷、金丝桃苷等功效成分作用于EGFR,ESR1,JUN,MMP-9等靶点发挥功效。

基于HPLC指纹图谱和多组分含量测定结合化学模式识别研究的龙眼核质量评价

目的 建立龙眼Dimocarpus longan Lour.核HPLC指纹图谱及含量测定方法。方法 建立13批龙眼核指纹图谱,结合指纹图谱相似度评价及化学模式识别研究对龙眼核质量进行分析,并测定其中没食子酸、柯里拉京、鞣花酸的含量。结果 13批龙眼核样品相似度在0.919~0.999,标定共有峰11个,并指认出3种成分;聚类分析(HCA)将13批龙眼核聚为3类,主成分分析(PCA)提取到3个主成分,正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)筛选出5个差异性成分;定量分析得到13批龙眼核中没食子酸、柯里拉京金、鞣花酸的含量范围依次为0.65~1.8 mg·g^(-1)、3.02~5.46 mg·g^(-1)、3.18~4.49 mg·g^(-1)。结论 建立的HPLC指纹图谱及含量测定方法重复性、稳定性良好,能够为龙眼核质量评价提供参考。

思政元素融入中药药剂学课程教学中的探讨

中药药剂学是中药学专业核心课程之一,课程内容丰富。在当下的教育背景中,学习中药药剂学知识,在普及中医药优秀传统文化的同时,将相对应的课程思政元素融入知识的学习中,增强学生的专业认同感及民族责任感,树立专业自信心,增强法律意识,遵守职业道德,培养创新意识。以硬胶囊剂知识点为例,通过挖掘与之相关的思政元素,完善教学设计及雨课堂推送相关视频,将思政元素融入知识点的学习中,在加深学生对知识点理解与记忆的同时,提升学生的认识,实现良好的教学效果,最终达到教书育人的目的。

中药复方透皮贴剂基质研究进展

近年来,由于国家对中医药事业的扶持,以及基质新材料和透皮新技术的涌现,中药复方透皮贴剂的研究得到了较快的发展。文章从中药复方透皮贴剂的不同基质研究入手,对中药复方透皮贴剂的基质组成,以及不同压敏胶基质的性质及其在中药复方透皮贴剂中的应用进行全面、系统地综述,分析当前压敏胶基质在中药复方透皮贴剂应用中存在的若干问题,并建议通过跨学科合作来解决中药复方透皮贴剂基质研究中存在的难题,以期为中药复方透皮贴剂的研究和开发提供参考。

广西地不容药材的HPLC指纹图谱研究

目的:建立广西地不容药材的高效液相色谱(HPLC)指纹图谱。方法:采用HPLC法。色谱柱为Hypersil ODS2,流动相为乙腈-0.5%磷酸溶液(梯度洗脱),流速为1.0 m L/min,检测波长为282 nm,柱温为30℃,进样量为10μL。以延胡索乙素为参照,测定10批药材样品的HPLC图谱,采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》(2012版)进行共有峰指认和相似度评价。结果:10批广西地不容的HPLC图谱有17个共有峰,10批药材样品中有8个产地药材指纹图谱与对照图谱比较相似度>0.900,2个产地药材相似度<0.900。结论:该研究所建HPLC指纹图谱可为广西地不容的鉴别和质量评价提供参考;广西区内多数产地的地不容药材所含生物碱类成分相似,少数存在差异。

广西地不容中生物碱类成分的含量测定

目的:建立广西地不容中延胡索乙素、巴马汀和青藤碱含量测定方法。方法:以HypersilODS2柱(4.6 mm×250 mm,5μm)为色谱柱,流动相:乙腈-0.5%磷酸水溶液,梯度洗脱,检测波长:282 nm,流速:1.0 mL·min-1,柱温:30℃,进样量:10μL。结果:延胡索乙素、巴马汀、青藤碱分别在0.135～1.35 mg·mL-1、0.032,98～0.329,8 mg·mL-1、0.031,24～0.312,4 mg·mL-1范围内线性关系良好,r=0.999,9。结论:该方法准确、可靠,可用于广西地不容药材及相关制剂中生物碱类成分的含量测定。

中药复方治疗慢性乙型肝炎的研究概况

乙型肝炎病毒(HBV)感染呈世界流行趋势,严重威胁人类的健康。通过检索近10年中国知网、万方数据库、Pub Med等中外文献数据库总结出常用的治疗慢性乙型肝炎(CHB)中药复方并对其可能作用机制进行归纳,为今后筛选中药治疗CHB有效成分及研发治疗CHB新药提供思路。

层次分析-熵权法结合星点设计-响应面法优选艾纳香配方颗粒成型工艺

目的优选艾纳香配方颗粒的成型工艺。方法以湿法制粒法制备艾纳香配方颗粒,在单因素试验基础上结合星点设计-响应面法,以清膏与稀释剂糊精配比、矫味剂甜菊素用量为考察因素,以成型率、休止角、吸湿率为评价指标,采用层次分析(AHP)-熵权法对评价指标赋予权重系数后进行综合评分。结果AHP-熵权法赋予成型率、休止角、吸湿率的权重系数分别为0.6420,0.3445,0.01345。优选的成型工艺为艾纳香配方颗粒清膏-糊精(1∶1.65,m/m),矫味剂甜菊素0.55%。验证试验结果显示,按优化工艺制备3批样品的综合评分的平均值为75.03。结论该成型工艺合理、可行,可为艾纳香配方颗粒的开发及应用提供实验依据。

白簕根皮乙酸乙酯部位镇痛抗炎及抗氧化活性研究

为研究白簕[Acanthopanax trifoliatus(L.)Merr]根皮乙酸乙酯部位(BLE)镇痛抗炎及抗氧化能力,以BLE为研究对象,采用热板致痛法、醋酸扭体法、二甲苯致小鼠耳肿胀法、角叉菜胶致小鼠足肿胀法及前列腺素E2(PGE2)炎症介质含量测定探讨其镇痛、抗炎作用,通过DPPH法和ABTS法评价BLE的抗氧化能力。结果表明,与空白组相比,BLE溶液各剂量组给药60 min时痛阈值均显著或极显著提高,与给药前相比,各剂量组在各时间点痛域值均显著或极显著提高,各剂量组与雷公藤多苷片组间无显著性差异。与空白组相比,各剂量组小鼠扭体次数极显著减少;各剂量组小鼠对二甲苯所致耳肿胀度均有显著或极显著减轻,且各剂量组与雷公藤多苷片组间无显著差异;高剂量组小鼠对角叉菜胶致足肿胀度有极显著减轻,各剂量组与雷公藤多苷片组相比无显著差异。与空白组相比,高、中剂量组小鼠PGE2含量极显著降低;与雷公藤多苷片组相比,高、中剂量组PGE2含量均无显著差异。BLE清除PDDH自由基的清除率随浓度增加呈正相关,IC50为0.029 mg/mL,低于阳性对照维生素C的IC50(0.04 mg/mL),ABTS自由基清除率随浓度增加呈正相关,IC50为0.033 mg/mL,低于阳性对照维生素C的IC50(0.042 mg/mL)。

壮药材火索藤的生药学研究

为建立火索藤(Bauhinia aurea)的鉴别方法及含量测定方法,解决其真伪辨别的问题,分析其药效不一的原因,该文采用基原鉴别、性状鉴别、显微鉴别、薄层色谱法及高效液相色谱法对火索藤开展生药学研究。结果表明:(1)火索藤为多年生粗壮木质藤本,其茎、叶、花、果实表面均被红棕色茸毛。(2)茎横切面皮层可见大量石细胞群及晶纤维,髓部常见草酸钙簇晶、方晶;叶横切面显示其叶为异面叶,皮层可见草酸钙簇晶、方晶,韧皮部可见分泌腔断续排列成环,韧皮部外侧常见晶纤维。粉末中可见草酸钙簇晶、晶纤维、石细胞、具缘纹孔导管、非腺毛、气孔。(3)各批次火索藤TLC斑点与对照品金丝桃苷、落新妇苷、槲皮苷在薄层色谱图的相同位置上显相同颜色荧光。(4)落新妇苷和槲皮苷进样量分别在0.005888~2.355μg(r=0.9996)、0.03955~1.582μg(r=0.9998)与峰面积呈现良好的线性关系,加样回收率分别为96.42%、104.20%,相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)值分别为2.55%、1.79%。该文建立了火索藤的生药学鉴别方法和一种同时测定其中落新妇苷、槲皮苷的含量测定方法,该方法简便、稳定、准确,可为该药材质量标准的制定提供依据。

菝葜标准汤剂的HPLC特征图谱建立、化学计量学分析及含量测定

目的:建立菝葜标准汤剂HPLC特征图谱及成分含量测定方法。方法:建立16批菝葜标准汤剂的HPLC特征图谱,并进行相似度评价、聚类分析及主成分分析,对其中3个成分含量进行测定,计算转移率和出膏率。结果:建立的16批菝葜标准汤剂HPLC特征图谱标定了14个共有峰,指认出7个成分,标准汤剂样品与对照图谱的相似度为0.939~0.997;聚类分析和主成分分析结果基本一致,均将样品分为3大类。16批菝葜标准汤剂的出膏率为9.14%~13.60%,绿原酸、落新妇苷及白藜芦醇的含量分别为9.98~21.91 mg/g、1.92~5.34 mg/g、0.10~0.93 mg/g;转移率分别为16.12%~59.19%、6.69%~33.70%、8.70%~63.96%。结论:该研究建立的特征图谱和含量测定方法稳定、可行,可用于菝葜标准汤剂的质量评价。

基于高效液相色谱指纹图谱及多模式化学计量学分析评价菝葜饮片的质量

目的建立不同来源的菝葜高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,结合多模式化学计量学分析菝葜饮片的质量。方法建立18批菝葜HPLC指纹图谱,结合相似度评价、聚类分析、主成分分析、正交偏最小二乘-判别分析对不同来源的菝葜进行评价。结果指纹图谱标定了13个共有峰,指认出5个成分,分别为绿原酸、落新妇苷、槲皮苷、黄杞苷及白藜芦醇;相似度评价结果,18批样品除YP3以外,其余相似度均大于0.9;结合多模式化学计量学分析可以将18批样品分为三类,并筛选出6个可能导致菝葜质量差异的标志物。结论本研究建立的指纹图谱方法简便、重复性好,结合多模式化学计量学分析可用于评价不同来源的菝葜质量。

基于AHP-CRITIC的D-最优混料设计优化蟹壳粉冻疮膏基质配方

目的:优化蟹壳粉冻疮膏的基质配方。方法:以蟹壳粉为原料,通过单因素试验,对影响乳膏成型的主要因素(药物加入方式、乳化温度、乳化时间、油水加入顺序及载药量)进行筛选,优选出最佳制备工艺;再以冻疮膏的外观性状、延展性、离心稳定性、耐寒稳定性和耐热稳定性作为评价指标,采用层次分析法(AHP)和基于指标相关性的指标权重确定方法(CRITIC)混合加权法(AHP-CRITIC)确定各评价指标的权重系数,结合D-最优混料设计优化冻疮膏的基质配方。结果:按混合加权法(AHP-CRITIC)得到外观性状、延展性、离心稳定性、耐寒稳定性和耐热稳定性的权重系数分别为0.083、0.302、0.181、0.211、0.222,D-最优混料设计得到冻疮膏最优基质配方为硬脂酸4.056 g、硬脂醇12.000 g、白凡士林14.000 g、液体石蜡6.637 g、吐温-807.948 g、甘油8.993 g、蒸馏水46.366 g,蟹壳粉加药量为10 g。结论:优选的冻疮膏配方细腻柔软、易涂展、稳定性好,制备工艺稳定可行。

星点设计-效应面法优选复方清肝无糖颗粒的提取工艺研究

目的:采用星点设计-效应面法优化复方清肝无糖颗粒提取工艺。方法:以加水倍数和提取时间为考察因素,以葛根素含量与干膏率作为评价指标,对两个因素的各水平进行多元线性和二项式拟合,建立相应的数学模型,按二项式描绘三维效应面,从而得到总OD值较佳的实验条件。结果:二项式是描述指标与因素之间的最佳模型,相关性较大(r=0.8955),最佳提取工艺为:加水倍数11倍,提取时间100min,提取2次。最佳条件得总评OD值为0.792,与理论预测值的偏差为-7.07%。结论:星点设计-效应面优化法对复方清肝无糖颗粒的试验指标具有较好的优选性和预测性。