广西猪流感病毒H1N2亚型的血清学调查

【目的】了解广西猪群中猪流感(SI)的流行情况,为科学防控广西SI提供参考依据。【方法】以猪流感病毒(SIV)H1N2亚型毒株为抗原,采用微量血凝抑制试验(HI)方法,对2009年7月～2011年3月在广西12个市采集的997份猪血清进行SIV的血清学调查。【结果】2009年的H1N2亚型抗体阳性率为33.4%,比2010年和2011年1～3月的高;广西各市的H1N2亚型抗体阳性率为0～83.1%,其中河池和百色两市的H1N2亚型抗体阳性率较高,分别为83.1%和51.1%,崇左市为零,其他市的H1N2亚型抗体阳性为4.0%～32.1%。【结论】广西地区猪群在2009～2011年均受到猪源H1N2亚型不同程度的感染。

广西猪瘟病毒E2基因克隆及序列分析

【目的】了解广西猪瘟病毒(CSFV)流行毒株的变异规律及其与疫苗株的基因差异,为正确选择猪瘟疫苗和防制广西猪瘟提供参考依据。【方法】以广西本地的阳性猪瘟病料为研究对象,应用RT-PCR扩增CSFV的E2基因,经克隆、测序后用DNASTAR软件对其序列进行比对分析,并绘制遗传进化树。【结果】从41份疑似猪瘟病料中共扩增出4个阳性样品的E2基因(1140bp),经序列比对分析发现,扩增获得的4株CSFV毒株(GXGG1、GXLC1、GXLC2和GXNN1)与兔化弱毒株(HCLV)、Shimen强毒株的核苷酸同源性为82.1%～82.3%和82.9%～83.4%、其推导氨基酸同源性为88.4%～89.2%和88.9%～90.0%,4株毒株间的E2基因核苷酸及其推导氨基酸同源性分别为90.8%～99.6%和94.2%～99.5%,且均属于基因群Ⅱ;E2基因推导的氨基酸表明,E2蛋白空间结构及抗原结构的氨基酸位点693Cys、737Cys、792Cys、818Cys、828Cys、856Cys、833Pro、834Thr、837Arg均未发生变异,但其单抗识别位点G713E、N729D、K734R发生变异。【结论】近年来广西CSFV流行毒株的变异未出现较大差异,与HCLV株、Shimen强毒株亲缘关系较远,但与Paderborn株、GXWZ02株亲缘关系较近。

鸡传染性法氏囊病疫苗及其应用的进展

传染性法氏囊病(IBD)仍然是世界养禽业影响最大的传染病之一。疫苗接种是目前控制IBD最有效的措施。本文主要从病原特征,目前流行病学的新特点,传统疫苗、新型疫苗的种类、特点,影响疫苗免疫效果的主要因素,目前应用中存在的问题及其未来解决的思路等进行了阐述。认为传统疫苗在世界许多国家IBD的防控中发挥了重要作用,发展新型疫苗的研究也已经兴起,但是新型疫苗在相当长的一段时间内还是无法取代传统疫苗。提出安全和有效防控是IBD疫苗研制与应用的根本出发点。

猪流感病毒的分离及NA基因的遗传进化分析

通过鸡胚接种分离到3株猪流感病毒,经HI、RT-PCR鉴定,其中GXHZ株为H1N2亚型毒株,GXLZ、GXXY株为H3N2亚型毒株,并对分离株进行EID50测定及GXHZ株的猪体攻毒试验。所扩增分离到3株SIV病毒NA基因与A/Sw/Hainan/1/2005(H1N2)的核苷酸和氨基酸序列同源性最高。3株SIV分离株的NA基因在氨基端胞浆尾区均由K6→R6,在非极性跨膜区均由V20→M20。系统发育分析表明本试验所分离的3个SIV毒株与H1N2亚型毒株亲缘性最相近,且来源于猪源H1N2亚型流感病毒。从时间上也发现,3个分离株的NA基因与1996年以后获得的H3N2毒株亲缘关系很近,都隶属于一个亚分支。

禽多杀性巴氏杆菌和大肠杆菌二联灭活油乳剂疫苗免疫保护试验

用禽多杀性巴氏杆菌和大肠杆菌本地分离菌株,分别液体培养、灭活,按一定比例混合,加入油佐剂制成二联灭活油乳剂疫苗。以0.5 mL/只、1.0 mL/只两个剂量分别肌肉注射免疫2月龄非免鸡30只,同条件设非免疫对照组8只,免疫后21 d用两种分离菌株分别攻毒及两种菌混合攻毒。试验结果显示,对禽多杀性巴氏杆菌的保护率为80%,对大肠杆菌病的保护率为100%,对两种菌混合攻毒的保护率为80%。本试验结果说明研制的二联灭活油乳剂疫苗安全有效。

猪圆环病毒2型核酸疫苗的小鼠免疫保护试验

为了研究猪圆环病毒2型(PCV2)核酸疫苗在小鼠攻毒试验中的免疫保护效果,以PCV-2 GXWZ-1株为模板,扩增出ORF2基因及其截短基因8个片段(A(ORF2)、B(51-100aa)、C(101-150aa)、D(181-235aa)、E(151-200aa)、F(51-150aa)、G(101-235aa)、H(51-235aa)),将其插入到pcDNA3.0载体中,构建出真核表达质粒,并将其转染至PK-15细胞,用间接免疫荧光试验检测其瞬时表达情况。将试验小鼠随机分成9组,其中免疫组7组,阴阳性对照各1组,将纯化的真核表达质粒对小鼠进行组合免疫;二免后,用经处理过的PCV-2 GXWZ-2株阳性病料悬液腹腔注射免疫组和非免疫对照组小鼠,阴性对照组用生理盐水腹腔注射;其后进行体重记录、病理切片制作及PCR检测。结果表明:共有6个真核表达质粒成功在PK-15细胞中表达。在攻毒后的3周内,阳性对照组小鼠PCR诊断均为阳性;免疫组中,部分组小鼠在攻毒后第1周或在第2周为阳性,到第3周时各免疫组小鼠全部为阴性;阴性对照组始终为阴性。免疫组在病理保护学方面明显优于非免疫对照组,非免疫对照组的体重增长速率略低于免疫组和阴性对照组。由此可见猪圆环病毒2型核酸疫苗在小鼠攻毒试验中有明显的保护作用。

Ⅰ群禽腺病毒双价油乳剂灭活苗的研究

【目的】提高国内I群禽腺病毒疫苗的防控能力,防止I群禽腺病毒蔓延。【方法】优化I群禽腺病毒的增殖条件,以I群禽腺病毒血清4型(FAV-4)及血清8型(FAV-8)的抗原液制备油乳剂单价及双价灭活苗,比较甲醛及β-丙内酯(BPL)的灭活效果,并检验疫苗性状、监测免疫抗体水平及进行免疫攻毒试验和田间试验。【结果】疫苗灭活以1.00mL/L终浓度的甲醛或0.500mL/L终浓度的BPL为宜;3种疫苗均为白色状乳液,4°C下保存期均可达12个月,单价疫苗的最小免疫剂量为100μL/羽,双价疫苗的最小免疫剂量为250μL/羽;免疫抗体水平监测结果表明,免疫后第4周抗体水平达到峰值,且在免疫后第8周仍维持较高水平;免疫攻毒试验结果显示,3种疫苗的保护率均为100%,能完全抵抗病毒攻击;田间试验结果表明,在免疫初期3种疫苗抗体均达到预期免疫效果,免疫保护期在6个月以上,在生产中使用双价疫苗可以减少注射次数。【结论】FAV-4、FAV-8双价油乳剂灭活苗免疫效果好、保存期长、安全性好,为净化I群禽腺病毒提供了技术支撑。

猪流感病毒H1N2亚型油乳剂灭活苗的免疫效果

【目的】评估以H1N2亚型猪流感病毒(SIV)制成油乳剂灭活苗的免疫效果,为预防SIV的发生和蔓延提供参考依据。【方法】采用不同剂量的SIVH1H2亚型油乳剂灭活苗对猪只进行免疫,免疫后采血,用HI试验测定抗体效价,连续测定至第10周,然后对猪只进行攻毒,并观察其临床症状及进行病毒检测等。【结果】中免疫剂量组(4mL/头)和高免疫剂量组(6mL/头)的抗体滴度高于低免疫剂量组(2mL/头);免疫组与对照组在攻毒后猪只的体温无显著差异(P>0.05),免疫组攻毒后无明显的临床症状,除中免疫剂量组在攻毒后第1d检测出鼻粘液病毒外,其他时间及其他剂量组均未检测到SIV,对猪只起到良好的保护作用。【结论】SIVH1N2亚型油乳剂灭活苗具有良好的免疫效果,对同亚型病毒的攻击具有一定保护作用,其最佳免疫剂量为4mL/头。

应用三种方法筛选猪瘟抗体阴性猪的比较试验

为了寻找筛选猪瘟抗体阴性猪更简便的方法,本试验应用猪瘟中和试验(SN)、阻断ELISA和正向间接血凝(IHA)三种方法分别对170份未经猪瘟活疫苗免疫的仔猪血清进行猪瘟抗体检测。结果显示,SN、ELISA和IHA检测出的猪瘟阴性血清分别为144份、150份和131份,表明三种检测方法有较好的符合率,其中SN与ELISA的检测符合率为90.59%,SN与IHA的检测符合率为82.94%,而ELISA法与另两种方法比较阴性符合率最高。本结果表明,ELISA法具有较高的敏感性,适合应用于猪瘟活疫苗安全检验抗体阴性猪的筛选。

禽白血病及其诊治技术研究进展

为了解我国禽白血病的研究现状,本文概述了禽白血病及禽白血病病毒基本特征,对比分析了国内外建立的多种禽白血病病毒检测方法,包括病原学方法、血清学方法和分子生物学方法,提出了加强监督和疫病净化、预防疫苗污染等防控建议,以期为禽白血病防控提供参考。

分段补料法生产猪多杀性巴氏杆菌病活疫苗(EO630株)的试验研究

为改进猪多杀性巴氏杆菌病(亦称猪肺疫)活疫苗抗原制备工艺,提高生产效率和产品质量,采用分段补料发酵工艺制备猪多杀性巴氏杆菌病活疫苗(EO630株)抗原,培养12~13 h,EO630株的活菌数达到高峰期,最高活菌数可达1.31×1010CFU/m L。按分段补料法共生产抗原5批,培养12 h后收获抗原,平均活菌数为1.17×1010CFU/m L,进行配苗和冻干疫苗5批,冻干后的平均存活率为69%。安全和效力检验均合格,达到预期效果。与传统方法相比,该方法培养的活菌数有大幅度的增长,优势明显。

从“皮革奶”思考中国动物性食品安全保障

2011年初,＂皮革奶死灰复燃＂的消息传出,又给中国乳业一次重创,受到影响的不仅仅是中国乳业经济,国人对肉、蛋、奶等动物性食品安全的信任度也大打折扣。笔者因此回顾我国动物性食品安全事件,

一例猪瘟病毒、蓝耳病毒和圆环病毒混合感染的病例调查

1基本情况以培育中猪为主要业务的某养猪场,分别于2016年4月1日（130头）和4月20日（80头）从不同猪场购进仔猪210头进行饲养,在购进后委托村兽医对仔猪进行免疫接种,免疫程序如表1。2临床症状2016年6月6日猪群开始发病,仔猪陆续出现腹部和臀部皮肤发红症状,体温升高达41℃以上,食欲下降或废绝,发病后期病猪皮肤、耳朵颜色逐渐发紫,病猪怕冷,喜欢扎推,拉水样绿色粪便,病程一般3~5天。6月22日进行采样送检。

玉林市祖代种鸡场禽白血病净化监测分析

玉林市部分祖代种禽场开展禽白血病净化工作已经七年之久,P27抗原阳性率从9.68%降到1.56%,净化效果显著。对不同样本类型的P27抗原检测发现泄殖腔棉拭子的P27抗原阳性率>蛋清的P27抗原阳性率>血清的P27抗原阳性率。同批次血清样品的A/B亚型抗体阳性率大于J亚型抗体阳性率。P27阳性蛋清样本PCR分型证实玉林市祖代鸡群中的主要存在的禽白血病亚型是B、J亚型。根据净化实际,指出禽白血病净化需要在垂直筛选净化、水平控制和严格把关弱毒苗三个关键点进行控制,旨在指导更多企业做好禽白血病净化工作。

中西医结合治疗猴的胃肠驰缓

为了解猴胃肠弛缓病的治疗效果,采用临床病例治疗效果观察的方法,对2例患胃肠弛缓的病猴进行中西医结合治疗。结果表明：猴胃肠弛缓病用中西医结合治疗取得较好疗效。