几种近江牡蛎肠道微生物DNA提取方法的比较

通过对牡蛎肠道微生物总DNA的提取方法进行优化,以OD260/OD280比值、琼脂糖凝胶电泳、DNA浓度及PCR反应为指标,分析比较提取近江牡蛎肠道微生物总DNA的方法,结果表明,SDS-溶菌酶法的结果最优,其次是CTAB提取法,最后依次是DNA简约提取法、试剂盒法。

细角滨对虾酚氧化酶原cDNA克隆及序列结构分析

采用RT-PCR原理和长片段扩增技术克隆细角滨对虾酚氧化酶原基因。结果表明,细角滨对虾血淋巴细胞内存在2个pro PO基因。pro PO gene 1的c DNA序列包含有372氨基酸,前190个氨基酸为一个M家族血蓝蛋白,是一个铜结合位点区域,191-372为一个C家族的血蓝蛋白,是一个免疫球蛋白样的区域。pro PO gene 2的2个功能位点之间的序列有重叠,pro PO gene 2 c DNA序列的6-935bp包含了第一个功能位点,928-1464bp则包含了第二个功能位点。系统进化树比对分析发现2个基因之间的序列差异非常大。细角滨对虾和凡纳滨对虾的pro PO gene 2同处于一个密切相关的群,pro PO gene 1则和其他几种对虾的pro PO gene处于一个群。pro PO gene 2与pro PO gene 1在对虾免疫活动中是否存在不同的功能还有待于进一步的研究。