眼镜蛇蛇毒因子与免疫研究

眼镜蛇蛇毒因子(Cobra venom factor,CVF)是一种从眼镜蛇毒中分离出来的抗补体因子,在二十世纪初已为人们所认识并与免疫研究尤其是补体系统的研究密切相关。CVF 在体内外均可与血清中的 B 因子结合成 CVF·B 复合物,在 D 因子的作用下裂解为 CVF·Bb,成为一种 C_3转化酶,由此起动补体激活的旁路途径,造成补体的大量激活及耗竭,CVF 以此独特的方式作用于补体系统,可造成补体耗竭动物模型用于各种免疫研究。本文就 CVF 免疫的关系作一简要综述。

某些中药成分对豚鼠补体及经CVF处理的豚鼠补体活性的影响

该文研究人参茎叶多糖、田七多糖、绞股兰皂甙、白花蛇舌草煎液对补体及经CVF处理的豚鼠补体活性的影响,发现上述中药成分对正常豚鼠补体水平无明显影响,但对经CVF处理后的豚鼠低补体状态在连续给药5～8天后有一定促进恢复作用。给豚鼠腹腔注射50μg/kg的CVF,CH_(50)下降94％～97％,12天后才恢复正常。此时再次给予同样剂量的CVF,几乎不能再产生降补体作用,可能是由于已产生CVF抗体的缘故。用CVF造成动物低补体状态以研究某些中药成分的药理作用是一新的尝试。

黄芪、党参、人参多糖对豚鼠免疫功能的影响

黄芪多糖(APS)、党参多糖(CPS)、人参多糖(GPS),对正常豚鼠及经过眼镜蛇蛇毒因子(CVF)处理后的低补体豚鼠免疫功能的影响,实验表明:3种多糖对正常豚鼠无影响,而对经过 CVF 处理后的补体下降、吞噬率下降的豚鼠有促进补体恢复的功能,促进中性白细胞吞噬率提高和恢复。电镜观察可见经注射 CVF 后豚鼠血液中性白细胞颗粒状物增多,吞噬率下降,再给3种多糖后颗粒减少,吞噬功能恢复。

中华眼镜蛇蛇毒因子(CVF)对补体系统的作用及与人补作C_3和其他蛇毒抗原性关系

中华眼镜蛇蛇毒经DEAE-Sepharose CL-6B。HPLC等多次柱层析分离出有抗补体及溶血活性的眼镜蛇蛇毒因子(Cobra venom factor,CVF),纯化后的CVF在聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱上呈单一区带,分子量为225000—230000,等电点为6.20。用二硫苏糖醇还原经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳得三类亚基,其分子量总和为237,000。 体外抗补体及溶血试验表明,CVF的作用是通过补体旁路途经使总补体活力下降。双向免疫电泳鉴定,发现CVF与人血清作用后,其中补体成分C_3分子的抗原性发生改变,则表明CVF的作用是通过激活补体成分C_3而发挥的。给豚鼠腹腔注射CVF(0.15ug/g体重)后,其血清总补体水平下降到正常值的3％以下,7天后回升,13天后恢复到正常水平。 单相免疫电泳表明,CVF与人补体C_3抗血清间无任何交叉免疫反应,但人血清与CVF抗血清间有微弱的免疫沉淀反应。另外,CVF的氨基酸组成与人补体C_3也较为相似。鉴定还表明眼镜蛇科中四种蛇毒与CVF抗血清有强烈的免疫沉淀反应,蝰蛇毒及海蛇毒也有免疫沉淀反应,但只有眼镜蛇毒具有抗补体活性。

桂木凝集素若干生物学性质的研究

含高凝血活力的桂木凝集素,能凝集人A、B、O、AB血型红细胞和兔、羊、豚鼠等动物的红细胞。凝集活力受N-乙酰半乳糖胺、半乳糖、乳糖和棉子糖等多种糖抑制,以N-乙酰半乳糖胺抑制最强。桂木凝集素还能凝集脾细胞、精细胞和促外周淋巴细胞转化;其凝集细胞的作用随凝集素浓度增加而增强,促淋转率约55%。

蛇毒中γ-谷氨酰转肽酶

γ-谷氨酰转肽酶(简称γ-GT)广泛存在各种哺乳动物组织中,在氨基酸转运中起重要作用。我们对分属于眼镜蛇科、蝰科和海蛇科的九种毒蛇的蛇毒进行研究,发现蛇毒中存在γ-GT,但各种蛇毒的总酶活力差异很大,以眼镜王蛇和眼镜蛇毒含量较丰富。聚丙烯酰胺凝胶电泳和凝胶等电聚焦电泳分析指出,大多数蛇毒含多种形式的γ-GT,存在分子量与等电点不同的酶区带。

一种快速灵敏分离凋亡细胞DNA片断的方法

一些资料表明氧应激能导致小鼠胸腺细胞凋亡。用含有２０μｍｏｌ／Ｌ 的过氧化氢和０ ．１ ｍ ｍｏｌ／Ｌ硫酸亚铁的磷酸缓冲液处理胸腺细胞１０ ｍｉｎ 后去掉处理液，再用含有１０ ％ 的小牛血清的ＲＰＭＩ１６４０ 培养基在３７ ℃５％ ＣＯ２ 条件下分别培养０，１，２ 和４ ｈ。测量凋亡细胞的ＤＮＡ 片断的百分数，同时比较了两种ＤＮＡ 抽提方法对凋亡细胞“ＤＮＡｌａｄｄｅｒ”的影响。结果提示快速一步法抽提凋亡细胞的“ＤＮＡｌａｄｄｅｒ”比用酚－ 氯仿抽提的效果好。

小鼠急性氨中毒与脑内5-羟色胺及去甲肾上腺素水平的关系

给小鼠腹腔注射浓度为10％的氯化铵(NH_4Cl),造成氨中毒后测定脑中5-羟色胺(5-HT)和去甲肾上腺素(NE)含量并计算其比值,结果5-HT/NE比值明显升高,证实氨中毒可导致脑内神经递质的不平衡。

小鼠侧脑室注射5-羟色胺对血糖浓度的影响

每只小鼠侧脑室注射28.41mmol/L的5-羟色胺(5-HT)10μl,引起血糖浓度明显升高,以45min最为显著,血糖浓度升高了148.1%,以后缓慢下降。若以不同剂量的5-HT侧脑室注射,在低剂量时,血糖浓度随着5-HT剂量增加而急剧升高;在剂量较高时,随着5-HT剂量增加,血糖浓度缓慢升高;当剂量更高时,再增加5-HT剂量,血糖浓度趋于恒定,不再受5-HT剂量的影响,血糖浓度变化曲线呈平坦状,出现特殊的饱和现象。给小鼠分别静脉注射各种受体阻断剂,10min后再侧脑室注射5-HT,结果显示肾上腺素a-受体阻断剂酚妥拉明能完全阻断5-HT作用于中枢的升高血糖效应,提示5-HT是通过肾上腺素α-受体起作用的。