某医科大学学生乙肝疫苗补种效果和补种意愿研究

目的了解某医科大学学生乙肝疫苗补种后的免疫效果和大学生乙肝疫苗的补种意愿,为选择加强乙肝补种的时机提供依据。方法选择某校2013年、2014年入学的311名医学生,分析其在免疫后第1、2、3年后的血清乙肝表面抗原抗体(抗-HBs)阳性率,并以现场和网络平台的调查方式收集问卷1207份,研究影响学生补种意愿的因素。结果共检测311名医学生,其中男生147名,女生164名,抗-HBs阳性率为84.24%(262/311)。补种后,不同时间抗-HBs阳性率差异有统计学意义(X^2=9.100,P<0.05),补种1年后抗-HBs阳性率为92.98%,2年后为88.18%,3年后为77.78%。多因素logistic回归分析结果提示,医学类专业、乙肝认知情况、周围是否有乙肝携带者、年级是高校学生乙肝接种意愿的影响因素,OR值95%CI分别为2.448(2.012-2.979)、2.592(2.086-33.220)、1.376(1.016-1.862)和1.171(1.036-1.324)。结论某医科大学医学生乙肝疫苗补种后免疫应答良好,面临实习的高年级医学生补种意愿较强,建议医学生在即将实习时复查抗-HBs浓度,必要时再次接种乙肝疫苗。

用班主任角色助力临床医学本科教改班学习——以“医学免疫学”为例

临床医学教改班是我国追赶国际医学教育的步伐,建立起具有中国特色,与国际医学教育实质等效的医学专业认证制度必需的一项有挑战的医学教育改革。利用班主任角色,把学习辅导融入班主任工作。结合教改班教改课程设计要求,建立强有力的教改教学团队;开展因材/才施教的教学训练;依托教改,拓展教学成果,培养更多卓越医学生的同时,积极帮助后进生进步。连续4年的学习辅导工作对临床医学本科教改班学习起到了良好的促进作用。

利用TBL等混合教学模式提高实验教学质量——以“临床免疫学检验技术”为例

医学检验本科的学习时间从5年减为4年,教学时间明显缩短。我们采用以TBL为主的混合式教学设计,分基础实验、综合性实验、探索性实验三个层次对原来的"临床免疫学检验"实验课程做了新的设计改革,各层次之间紧密联系,起到承前启后,逐步提升和训练学生检验技术和实验设计分析能力的目标。该项改革和实践在稳定了"临床免疫学检验技术"实践教学效果的同时,提高了四年制医学检验本科的专业培养质量。

成团泛菌脂多糖对两种狂犬病疫苗免疫效果的影响

目的:研究成团泛菌脂多糖(pantoea agglomerans lipopolysaccharide,LPSp)对两种狂犬病疫苗产生抗体的影响,了解LPSp作为狂犬病疫苗佐剂的可行性。方法:将Balb/c小鼠随机分为空白对照组、LPSp对照组、纯蛋白疫苗组、铝佐剂疫苗组、LPSp+纯蛋白疫苗组、LPSp+铝佐剂疫苗组6组,背部皮下免疫4次。免疫后第7、14、21、30、45、60天分别经小鼠眼内眦静脉采血,ELISA法检测血清抗狂犬病毒IgG滴度。结果:免疫4次后,LPSp能明显增强纯蛋白疫苗产生抗体的能力(P<0.05);对铝佐剂疫苗免疫效果影响不大(P>0.05)。结论:LPSp对纯蛋白疫苗免疫小鼠产生抗体具有较强促进作用,对铝佐剂疫苗产生抗体无明显促进作用。

保温小室在组织芯片免疫组化中避免“边缘效应”的作用

目的探讨保温小室在组织芯片免疫组化中避免"边缘效应"的作用。方法采用常规免疫组化SP两步法,实验分为两组,一组采用保温小室,另一组采用免疫组化PAP笔,同时改良抗体滴加方法。结果 40例肺癌组织芯片采用保温小室,32例肝癌组织芯片、各40例胃癌及鼻咽癌组织芯片使用免疫组化PAP笔,分别计算边缘组织和中央组织平均光密度值。经统计发现不论是采用保温小室或免疫组化PAP笔,4种组织切片边缘与中央部位平均光密度值相比,差异无统计学意义。结论采用保温小室较免疫组化PAP笔更为简单易行,在组织芯片免疫组化染色时避免"边缘效应"方面保温小室可取代免疫组化PAP笔。

Glypican3、MMP-9和MMP-14在原发性肝癌中的表达与临床意义

目的探讨原发性肝癌中磷脂酰肌醇蛋白聚糖(Glypican3)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和基质金属蛋白酶-14(MMP-14)的表达特征,关注其在肿瘤发生、发展和转移中的作用。方法本试验以102例原发性肝癌作为观察组,以80例正常肝组织作为对照组,采用免疫组织化学方法检测两组中Glypican3、MMP-9和MMP-14的表达,探讨Glypican3、MMP-9和MMP-14在不同临床病理特征中的表达差别及相关性。结果观察组中Glypican3、MMP-9和MMP-14表达的阳性率明显高于对照组,观察组中Glypican3、MMP-9和MMP-14表达的阳性率与肿瘤体积、分化程度、淋巴结转移、脉管浸润、被膜侵犯和增殖组胞核抗原的表达密切相关。相关性分析显示观察组中Glypican3和MMP-9、Glypican3和MMP-14、MMP-9和MMP-14的表达均呈正相关性(r=0.48,P=0.024 1;r=0.46,P=0.013 2;r=0.43.P=0.031 3)。生存分析显示Glypican3、MMP-9和MMP-14的表达与预后相关。结论原发性肝癌组织中Glypican3、MMP-9和MMP-14高表达,在肿瘤进展中有明显的促进作用,术后检测Glypican3、MMP-9和MMP-14的表达对判断原发性肝癌的预后有一定价值。

慢性乙型肝炎病毒感染者CD8^+T细胞Toll样受体2表达增强

目的测定未经抗病毒治疗的慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染者CD8^+T细胞中Toll样受体2(TLR2)的水平,探索TLR2在慢性HBV感染者CD8^+T细胞中的表达的情况。方法采用实时荧光定量PCR检测40例样本的血清HBV载量,分为高病毒载量组(HBV DNA>1×104拷贝/m L)、低病毒载量组(HBV DNA<1×104拷贝/m L),19例志愿者作为健康对照组;分离外周血单个核细胞,流式细胞术检测CD8^+T淋巴细胞亚群中TLR2和CD38、HLA-DR、CD95、程序性死亡蛋白1(PD-1)的表达,并分析TLR2表达情况及与它们之间的相关性。结果低病毒载量组与高病毒载量组CD8^+T细胞TLR2的表达较健康对照组高,低病毒载量组CD8^+T细胞TLR2表达高于高病毒载量组;相关性分析结果显示CD8^+T细胞亚群中TLR2和CD38、HLA-DR、CD95、PD-1表达缺乏相关性。结论 HBV感染者CD8^+T淋巴细胞TLR2的表达增强。

乙肝病毒携带者PBMC细胞中Toll样受体2表达水平与乙肝病毒增殖相关性研究

目的:探讨乙肝病毒(HBV)增殖与无症状乙肝病毒携带者(ASC)外周血中Toll样受体2(TLR2)表达水平的相关性。方法:分离乙肝病毒携带者和健康志愿者外周血单个核细胞,分别用免疫细胞化学染色方法检测TLR2在细胞表面的表达情况;用RT-PCR方法检测TLR2的mRNA水平;用ELISA法检测乙肝病毒携带者和健康志愿者血清中TLR2活化后产物TNF-α的表达水平。结果:HBV复制活跃组的外周血单个核细胞中TLR2在蛋白水平和mRNA水平表达明显低于HBV复制不活跃组和健康对照组;HBV复制活跃组血清中TNF-α水平显著低于HBV复制不活跃组。结论:乙肝病毒携带者外周血单个核细胞TLR2的表达及活化与乙肝病毒的增殖有相关性。

流感病毒受体结合与抗原性改变的分子基础

流感病毒的血凝素(HA)与宿主细胞表面糖链末端唾液酸(SA)的结合对流感病毒感染宿主起着至关重要的作用。禽流感病毒对SAα2-3Galβ糖链以及人流感病毒对SAα2-6Galβ糖链的结合特异性使跨种属传播受阻,但不同的流感病毒在猪和陆地家禽等中间宿主体内发生基因重配作用后,可使部分禽流感病毒获得适应性感染人的能力,另一方面,流感病毒自身的基因突变,尤其是受体结合部位周围的特定位点,可导致流感病毒受体结合特异性发生转变,而病毒的变异伴随着自身糖修饰和抗原表位的改变,使机体对其免疫识别结合的能力也随之发生变化。这些分子水平的改变都将对病毒相关的宿主受体结合和免疫应答反应产生影响。

非小细胞肺癌患者肿瘤组织乳酸脱氢酶A和Sox-2基因的表达及其临床意义

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者肿瘤组织的乳酸脱氢酶A(LDHA)和正性别决定区Y框蛋白-2(Sox-2)基因的表达情况及其临床意义。方法选择54例NSCLC患者,采用实时定量聚合酶链式反应检测肿瘤组织及癌旁组织中LDHA和Sox-2基因的表达水平,分析肿瘤组织中LDHA和Sox-2基因的表达水平与临床病理特征的关系,以及肿瘤组织LDHA与Sox-2基因表达水平的关系。结果 NSCLC肿瘤组织的LDHA和Sox-2相对表达均高于癌旁组织(P<0.05)。肿瘤细胞分化程度低者肿瘤组织LDHA、Sox-2表达量高于分化程度高者(P<0.05)。肿瘤组织LDHA与Sox-2基因表达水平呈正相关(P<0.05)。结论 NSCLC患者肿瘤组织中LDHA和Sox-2表达均有升高,两者在肿瘤发生发展中具有协同作用。

金雀异黄素诱导人白血病Jurkat E6-1细胞凋亡的机制

目的探讨金雀异黄素(Gen)对Jurkat E6-1人白血病细胞的凋亡诱导作用。方法用激光共聚焦技术观察金雀异黄素对JurkatE6-1白血病细胞形态的影响;流式细胞术检测细胞凋亡;Western印迹方法检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、Caspase3的表达。结果 Gen各浓度组瘤细胞皱缩、变形,染色质浓缩,部分核染色体碎裂,呈高蓝低红色;与1640组相比,Gen各浓度组凋亡率均呈显著增高,且随着Gen浓度的升高,凋亡率也增高;Gen 0.1、1.01、0.0μmol/L组的Bax和Caspase-3蛋白条带强度递增,并明显高于1640组,而Bcl-2蛋白条带强度则递减,并明显低于1640组。结论 Gen对Jurkat E6-1白血病细胞可能通过上调Bax和Caspase-3蛋白表达,下调Bcl-2蛋白表达来诱导其凋亡。

慢性乙型肝炎患者外周血CD8^+T细胞CD95表达的研究

目的检测慢性乙型肝炎患者外周血CD8+T细胞CD95分子的表达水平,了解CD95分子表达与炎症进展的关系。方法采集37例慢性乙型肝炎患者及健康对照者外周血,分离外周血单个核细胞(PBMCs),用流式细胞术检测外周血CD8+T细胞CD95分子的表达情况。结果高病毒载量组和低病毒载量组CD8+T细胞CD95的表达均显著高于健康对照组(P<0.05);CD95的表达及CD8+T细胞频率之间存在负相关关系(r=-0.3486)。结论慢性乙型肝炎患者CD95的高表达可能促进了CD8+T细胞的凋亡,使CD8+T细胞的抗病毒作用减弱,可能与HBV持续感染、慢性乙型肝炎的形成机制有关。

穿膜肽-抗体-微球偶联物的制备方法研究

目的:探讨制备穿膜肽-抗体-微球新型药物传送系统的可行性。方法:采用N-琥珀酰亚胺基-3-(2-吡啶二硫)-丙酸酯(SPDP)交联法将穿膜肽-增强型绿色荧光蛋白融合蛋白(CPPs-EGFP)、牛血清白蛋白微球(BSA-NS)、乙肝高效价免疫球蛋白(HBIg)分别采用一次偶联法和二次偶联法两种交联方案进行共价交联,采用还原和非还原SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫荧光法评价穿膜肽、抗体、微球间的交联。结果:两种交联方案制备的穿膜肽-抗体-微球偶联物,SDS-PAGE还原电泳均可见在低分子量端形成三条蛋白条带,非还原电泳均未见条带;在不同激发波长的荧光显微镜下,均可见微球表面分别发出绿色荧光和红色荧光。结论:应用SP-DP交联剂,无论是一次偶联法还是二次偶联法均能够将穿膜肽、抗体、微球有效地进行偶联,为进一步研究穿膜肽-抗体-微球新型药物传送系统的特性奠定了基础。

LPSp对狂犬病疫苗佐剂效应及安全性研究

目的研究成团泛菌脂多糖(LPSp)作为狂犬病疫苗佐剂的可行性。方法将Balb/c小鼠32只随机分为空白对照组(注射生理盐水)、LPSp对照组(注射LPSp)、狂犬病病毒蛋白组(注射狂犬病病毒蛋白)、LPSp实验组(注射LPSp和狂犬病病毒蛋白),分别在第0、7、15、21天经背部皮下免疫接种共4次。在免疫接种后第7、14、21、30、45、60天采集小鼠眼内眦静脉血,分离血清,末次采血后处死小鼠。用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清抗狂犬病病毒IgG,并进行血液学、血液生化、脏器指数等检查。结果免疫接种4次后,LPSp能明显增强狂犬病病毒蛋白免疫小鼠产生IgG的能力(P<0.05);实验期间各组小鼠未发现明显异常表现,体质量、血液学、血液生化和脏器指数等各组间未见明显差异(P>0.05)。结论 LPSp对狂犬病病毒蛋白具有较好佐剂效应;在本实验条件下,LPSp对小鼠安全性好。

慢性乙型肝炎病毒感染者外周血单个核细胞Toll样受体9水平与CD38、HLA-DR、CD95水平正相关

目的探讨慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染过程中外周血单个核细胞(PBMC)的Toll样受体9(TLR9)表达水平与CD38、HLA-DR、CD95水平的关系。方法募集70例未经抗病毒治疗的慢性HBV感染者,按HBV DNA的含量高低分为高病毒载量组与低病毒载量组,12例健康人作为对照组;采集外周抗凝血,密度梯度法分离PBMC;使用流式细胞术检测PBMC的TLR9、CD38、HLA-DR、CD95的水平。结果慢性HBV感染过程中,高病毒载量组和低病毒载量组PBMC的TLR9、HLA-DR、CD95表达水平显著高于健康对照组;高病毒载量组和低病毒载量组PBMC上TLR9与CD38、HLA-DR、CD95的共表达率显著高于健康对照组;相关性分析结果显示慢性HBV感染者PBMC上,TLR9与CD38、HLA-DR、CD95的表达正相关(r分别为0.345、0.334、0.227)。结论慢性HBV感染过程中,PBMC的TLR9、HLA-DR、CD95表达水平升高,TLR9表达水平与CD38、HLA-DR、CD95水平正相关。

Toll样受体3的信号通路及作为靶点的药物研究进展

Toll样受体3是Toll样受体中的重要成员之一,可特异性识别相应配体,通过独特的信号活化途径在抗感染、自身免疫性疾病、肿瘤等疾病的发生发展过程中发挥重要作用,是疾病防治和药物开发的重要靶点。文章对TLR3结构、信号通路及以TLR3为靶点的药物,包括激动剂、拮抗剂及中医药方面的研究进展进行了综述,通过综述发现,在我国丰富的中医药资源宝库中,可能存在着新的TLR3靶点拮抗或者激动分子,能够通过TLR3及其信号通路发挥对相关疾病的调制作用。

一例瑶山亚种树鼩自发隆突性皮肤纤维肉瘤的诊断

隆突性皮肤纤维肉瘤(dermatofibrosarcoma protuberants,DSFP)是一种皮肤恶性肿瘤。建立对应的肿瘤相关动物模型对于研究隆突性皮肤纤维肉瘤的发生机制及开发对应防治方法非常重要。论文报告了1例瑶山树鼩自发性隆突性皮肤纤维肉瘤。该树鼩瘤细胞主要由梭性细胞构成,呈束状、车辐状或席纹状排列,异型性明显,核分裂像多见,局灶伴有钙化。免疫组化结果显示,瘤细胞Vimentin弥漫阳性、ki-67瘤细胞低比例阳性、CD31和CD34血管呈阳性,诊断为隆突性皮肤纤维肉瘤。研究结果不仅为树鼩的自发肿瘤提供背景依据,有利于掌握树鼩自发肿瘤的基本形态特点和规律,也为进一步建立树鼩的肿瘤模型和探索肿瘤的发病机制提供参考。

Calponin家族在肿瘤转移过程中的作用

近几年Calponin家族在肿瘤的发生发展过程中的作用受到广泛关注，以往的研究着重在作为一种钙调节蛋白参与细胞的收缩作用方面，

TLR2抗病毒固有免疫作用研究现状

Toll样受体2(Toll like receptor 2,TLR2)是Toll样受体家族中重要的成员,在多种细胞表达,可识别多种配体使炎症因子释放,参与固有免疫和适应性免疫应答过程,在机体抗病毒感染中发挥重要作用。本文就近五年TLR2及其信号途径参与病毒感染性疾病发展过程作一综述。

气道嗜酸性粒细胞呈递抗原对Th1/Th2细胞分化的影响

目的 探讨嗜酸粒细胞 (EOS)呈递抗原在体内和体外对Th1/Th2细胞分化的影响。方法 以鸡卵清蛋白抗原致敏和雾化吸入刺激BALB/c小鼠以诱发EOS在气道聚集后将其分离纯化。将曾在气道接触抗原的EOS和致敏CD+ 4 T细胞在体外共同培养 ,在部分实验中加入抗CD80或/和CD86单克隆抗体 ;同时 ,将EOS注入致敏小鼠气道 ,部分小鼠还接受抗CD80或 /和CD86单克隆抗体静脉注射 ,然后在预定的时间收集气管旁淋巴结细胞进行培养。应用ELISA方法测定培养上清液中白细胞介素 4 (IL 4 )、IL 5、IL 13以及γ 干扰素 (IFN γ)的含量。结果 在和EOS体外共同培养的条件下 ,CD4 + 细胞产生较大量的IL 4、IL 5、IL 13等Th2类细胞因子 ,而产生的Th1类细胞因子IFN γ的量相当低。抗CD80或 /和抗CD86单抗可以明显地抑制Th2类细胞因子的产生。在体内实验中 ,接受EOS气管注入的小鼠引流淋巴结细胞主要被激发产生IL 4、IL 5和IL 13。在体外较短时间的培养过程中加入外原性OVA抗原后所产生的Th2类细胞因子的量更高。和体外实验结果相类似 ,抗CD80或 /和抗CD86单抗同样可以明显地抑制EOS在体内的抗原呈递过程。结论 EOS无论在体内还是体外均能摄取和处理抗原 ,然后激发Th2反应。提示EOS不仅作为终末效应细胞 。