基于网络药理学和体外验证实验探索槲皮素治疗胰腺癌的作用机制

使用网络药理学技术与方法挖掘槲皮素治疗胰腺癌的潜在分子机制。方法 使用中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)获取槲皮素的相关作用靶点,UCSC Xena下载相关数据,使用R软件的Limma软件包进行差异分析,String预测靶点间的蛋白互作关系并构建蛋白质互作网络,使用AutoDock Vina 1.1.2软件进行槲皮素与靶点的分子对接并用Pymol 2.5.2软件进行可视化,使用槲皮素处理胰腺癌细胞PANC-1后检测细胞增殖及凋亡的改变,并用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-timePCR)检测基因mRNA水平表达的变化。结果 通过中药系统药理学数据库与分析平台筛选获得槲皮素的相关靶点142个,UCSC Xena获得上调743个下调846个共计1589个胰腺癌差异表达基因,10个关键基因为MMP9、PTGS2、MMP2、SERPINE1、EGF、MMP1、SPP1、HMOX1、CXCL8和PPARG,其中槲皮素与MMP2对接结果最好。槲皮素处理后的胰腺癌细胞增殖受到抑制,凋亡细胞数增多,MMP2基因表达下降。结论 槲皮素可能通过抑制基因MMP2的方式在胰腺癌的治疗上发挥作用。

细胞周期蛋白A2在肝细胞癌中的表达及其意义

目的:探讨细胞周期蛋白A2(CCNA2)在肝细胞癌(HCC)中的表达及其意义。方法:从TCGA、GEO、GETx数据库获得测序数据,通过STATA 15.0进行meta分析评估HCC患者肿瘤组织中CCNA2 mRNA的表达水平;通过数据库GEPIA绘制CCNA2在HCC中的生存曲线,探究CCNA2对HCC预后的影响。在HCC细胞系(Huh7和SK-Hep1)沉默CCNA2(shCCNA2组),并设置空载体对照组(shNC组),通过细胞功能学实验检测沉默CCNA2对HCC细胞增殖、迁移与侵袭、细胞周期和细胞凋亡中的影响。通过在鸡胚绒毛尿囊膜构建HCC细胞移植瘤模型,观察并分离瘤体,检测CCNA2在体内对HCC生长的影响。结果:CCNA2在HCC患者肿瘤组织中m RNA水平显著高于非癌肝组织(SMD=1.65,95%CI:1.46~1.85,I2=89%)。CCNA2高表达与肝癌患者的不良预后呈负相关关系。与shNC组相比,shCCNA2组细胞增殖、迁移和侵袭能力降低(P<0.05)。shCCNA2组Huh7和SK-Hep1细胞的G0/G1期、S期、G2/M期占比发生改变(P<0.05)。鸡胚绒毛尿囊膜移植成瘤实验中,与shNC组比较,shCCNA2组肿瘤体积明显减小(P<0.05)。结论:CCNA2可能通过影响HCC细胞的增殖、迁移和侵袭能力,抑制HCC的进展和转移,其有望成为HCC治疗靶点。

长寿及冠心病人群miR-27a-3p血清表达水平的状况分析

目的:研究miR-27a-3p在红水河流域长寿人群及广西地区冠心病人群血清中的表达状况,探讨miR-27a-3p与衰老相关性疾病的关系。方法:实时荧光定量PCR(q PCR)检测长寿组(年龄>90岁)、老年组(65~84岁)、年轻组(<65岁)、冠心病组(46~90岁)和健康对照组(50~85岁)血清中miR-27a-3p表达情况,使用Spearman评估miR-27a-3p表达水平与各临床指标的相关性。结果:miR-27a-3p在长寿组及年轻组血清中相对表达量高于老年组(P<0.05);整体分析,miR-27a-3p相对表达量与体重指数(Ibm)、空腹血糖(FBG)、收缩压(SBP)、C反应蛋白(CRP)、载脂蛋白A(Apo A)和载脂蛋白B(Apo B)呈负相关关系(P<0.05);在长寿组中,miR-27a-3p相对表达量与Ibm、SBP、舒张压(DBP)、CRP和Apo B呈负相关关系(P <0.05);在老年组中,miR-27a-3p相对表达量与DBP、CRP成负相关关系(P <0.05);在年轻组中,miR-27a-3p相对表达量与CRP、Apo B呈负相关关系(P<0.05);与正常对照组相比,miR-27a-3p在冠心病患者中低表达。结论:miR-27a-3p在红水河流域长寿人群中高表达,在冠心病样本中低表达,且miR-27a-3p表达量与多种冠心病危险因素呈负相关关系,提示该长寿人群可能因为miR-27a-3p的高表达减少了冠心病的发生而体现一定的生存优势。