实验生理科学一体化实验教学体系建设的探索与实践

本文结合广西医科大学实验生理科学实验中心建设省级精品课程的实践,阐述了实验生理科学课程建设的设计思想、一体化实验教学体系、课程实施等方面的经验和成效。

加强实验技术队伍建设搞好实验教学

本文结合广西医科大学实验生理科学实验中心工作,重点阐述如何做好实验技术人员工作,配合教师协同作战,提高实验教学质量。

LBL+TBL教学在临床血液学检验教学中的效果评价

目的为提高临床血液学检验教学质量,探讨LBL+TBL相结合的教学方法的教学效果。方法采用调查问卷的方式对LBL+TBL相结合的教学模式在临床血液学检验教学研究中的效果进行了初步分析。结果 LBL+TBL教学有助于提高学生学习兴趣、自主学习能力、解决实际问题能力、创新科研能力、协作、沟通能力及学习效率等。结论 LBL教学法目前仍为必要的基础教学方法,加强TBL教学的学生学习效果明显提高,学习主动性增强,LBL+TBL教学模式值得推广。

高肺血流性肺动脉高压大鼠肺动脉平滑肌中钙敏感受体表达和血浆中H_2S含量的检测及其意义

目的:检测钙敏感受体(CaSR)在高肺血流性肺动脉高压(PH)大鼠肺动脉平滑肌中的表达水平及血浆中H2S含量,阐明两者在PH形成机制中的作用。方法:18只雄性SD大鼠随机分为对照组和PH组,对照组大鼠行单纯开胸,PH组大鼠行左肺切除手术。饲养35d后,应用右心导管法分别测定各组大鼠肺动脉平均压(PAMP),检测右心室/体质量(RV/BW)和右心室/左心室+室间隔[RV/(LV+S)]比值,光学显微镜观察肺血管结构的变化,分光光度法检测血浆H2S含量,应用实时荧光定量PCR方法检测大鼠肺动脉平滑肌细胞CaSR mRNA的表达水平。结果:PH组大鼠PAMP、RV/BW及RV/(LV+S)比值均明显高于对照组(P<0.05),光镜下肺小血管肌化程度明显增强,肺中、小肌型动脉相对中膜厚度明显增加(P<0.05)。PH组大鼠肺动脉平滑肌细胞CaSR mRNA的表达水平较对照组明显增高(P<0.05);PH组大鼠血浆中H2S含量较对照组明显降低(P<0.05)。大鼠肺动平滑肌细胞CaSR mRNA的表达水平与血浆H2S含量呈负相关(r=-0.931,P<0.05)。结论:高肺血流时肺动脉平滑肌细胞CaSR mRNA表达的改变可能通过改变内源性H2S的产生参与PH的形成。

酸性成纤维细胞生长因子对大鼠急性心肌缺血损伤的保护作用

目的:研究酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)对垂体后叶素(Pit)诱发大鼠急性心肌缺血的保护作用。方法:大白鼠随机分成3组:对照组、Pit损伤组、aFGF预处理组。采用静脉注射Pit制备大鼠急性心肌缺血模型,aFGF预处理组则于实验前24h应用aFGF。以生理信号分析系统描记Ⅱ导联心电图,全自动生化分析仪测定血清心肌酶活性变化。结果:aFGFF预处理组明显对抗急性心肌缺血大鼠心电图ST段的偏移,Pit损伤组和aFGF预处理组心肌酶均升高,但aFGF预处理组心肌酶的升高幅度较Pit损伤组低(P<0.05)。结论:aFGF可减轻大鼠心肌损伤,对急性心肌缺血大鼠具有保护作用。

紫菜多糖对急性酒精灌胃小鼠胃组织SOD、GSH-Px的影响

目的观察紫菜多糖对急性酒精灌胃小鼠胃组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的影响,探讨其保护胃黏膜免受损伤的机制。方法将小鼠分为生理盐水组、模型组和低、中、高剂量紫菜多糖组。制作急性酒精性胃黏膜损伤模型,测定小鼠胃溃疡指数及胃组织SOD、GSH-Px。结果高、中、低剂量紫菜多糖组小鼠胃溃疡指数均低于模型组,高、中剂量紫菜多糖组小鼠胃组织SOD、GSH-Px高于模型组并呈一定剂量依赖性(P<0.05,P<0.01)。结论紫菜多糖可通过提高急性酒精灌小鼠组织SOD、GSH-Px保护胃黏膜免受损伤。

紫菜多糖对急性酒精性胃黏膜损伤小鼠胃组织PGE_2及NO的影响

目的观察紫菜多糖对急性酒精性胃黏膜损伤小鼠胃组织中前列腺素E2(PGE2)和一氧化氮(NO)含量的影响,探讨其保护胃黏膜的机制。方法将小鼠随机分为正常组,模型组,西咪替丁组和紫菜多糖高、中、低剂量组。制作急性酒精性胃黏膜损伤模型,测定小鼠胃溃疡指数及胃组织中PGE2,NO含量。结果紫菜多糖高、中、低剂量组小鼠胃溃疡指数均低于模型组(P<0.05,P<0.01);紫菜多糖高、中剂量组小鼠胃组织PGE2,NO高于模型组(P<0.05,P<0.01);紫菜多糖高剂量组胃组织PGE2高于紫菜多糖低剂量组(P<0.01)。结论紫菜多糖可能通过提高急性酒精性胃黏膜损伤小鼠胃组织中PGE2,NO含量而起到保护胃黏膜的作用。

玉郎伞提取物对大鼠急性肺损伤的影响

目的:探讨玉郎伞(YLS)提取物对大鼠急性肺损伤(ALI)的影响。方法:将Wistar大鼠随机分为7组,分别为正常组,模型组,阳性对照组(地塞米松,3 mg·kg-1),玉郎伞水提物(TYLS)高、低剂量组(按生药量计60,30 g·kg-1),YLS总黄酮(FYLS)高、低剂量组(0.1,0.05 g·kg-1),每组动物连续灌胃给药7 d,于末次给药后30 min,采用腹腔注射20%酵母混悬液5 mL·kg-12次诱发大鼠急性肺损伤模型。最后测定肺组织的湿干比重(W/D)和肺组织髓过氧化物酶(MPO)的活性,免疫组化法测定大鼠肺组织中核因子-κB p65(NF-κB p65)的表达、ELISA法测定肺组织白介素-1β(IL-1β)的含量,并HE染色观察肺组织病理形态改变。结果:与正常组比较,模型组肺W/D和MPO活性增大、肺组织IL-1β含量增加、NF-κB p65表达升高(均P<0.01),肺组织有炎性病理改变。与模型组比较,TYLS高、低剂量组(4.31±0.15),(4.72±0.35)及FYLS高剂量组(4.74±0.23)肺W/D低于模型组(5.01±0.33)(P<0.05,P<0.01);TYLS高剂量组及FYLS高剂量组的肺MPO活性为(1.000±0.304),(0.956±0.139)U·g湿片-1,肺IL-1β含量为(265.58±47.05),(222.31±53.99)ng·L-1,肺组织细胞NF-κB p65阳性率为(51.00±8.62)%,(48.88±11.80)%,均比模型组明显降低(P<0.05,P<0.01);另外,从组织病理学角度上看,TYLS及FYLS组肺损伤程度也有所减轻,以高剂量组较为明显。结论:预先给予TYLS或FYLS可明显减轻ALI大鼠肺组织炎症反应及肺水肿程度,其机制可能是通过干扰NF-κB途径从而抑制IL-1β生成。

17-甲氧基-7-羟基-苯骈呋喃查耳酮对小鼠心室肌细胞膜钠电流的影响

目的观察17-甲氧基-7-羟基-苯并呋喃查耳酮(YLSC)对小鼠心室肌细胞膜上钠电流的影响。方法采用Langendorff逆行主动脉灌流法急性分离昆明小鼠心室肌细胞,全细胞膜片钳技术记录心室肌细胞膜钠电流(INa)在灌流YLSC前后的变化情况。结果 YLSC灌流可使INa的电流幅值减小,I-V曲线上移,但I-V曲线形状、最大激活电位和反转电位基本不变。INa的电流密度在膜电位-40 m V达到最大峰值,给药前的峰电流密度值为(-22.31±2.20)p A/p F,400μmol·L-1 YLSC灌流给药后为(-10.64±0.97)p A/p F,与给药前比较有显著差异(n=5,P<0.05),对钠电流的抑制率为(48.9±3.6)%;400μmol·L-1 YLSC给药前后的半数激活电压分别为(-49.51±1.22)m V和(-48.13±2.34)m V,斜率因子分别为2.43±0.36和3.39±0.64,给药前后无显著差异(n=5)。YLSC使失活曲线左移,给药前后半数失活电压分别为(-73.29±1.09)m V和(-76.79±1.62)m V,斜率因子分别为-12.13±2.15和-11.45±1.91,给药前后有显著差异(n=5,P<0.05)。结论 YLSC能通过降低钠通道失活电压,促进钠通道失活而抑制钠通道电流。

17-甲氧基-7-羟基-苯并呋喃查尔酮对心肌细胞内游离钙浓度及L-型钙电流的影响

目的:研究17-甲氧基-7-羟基-苯并呋喃查尔酮(YLSC)对H2O2诱导的心肌细胞内钙超载的拮抗作用及对L型钙电流(ICa-L)的影响。方法:采用SD大鼠乳鼠进行心肌细胞培养,实验分为①正常对照组;②H2O2组:上机前加入终浓度为0.3 mmol.L-1的H2O2;③预先给予低、中、高不同终浓度YLSC药物处理组:分别给予100,200,400μmol.L-1YLSC的无血清培养基,孵育24 h,上机前加入终浓度为0.3 mmol.L-1H2O2,以Fluo-3/AM荧光指示剂负载,应用激光共聚焦显微镜技术,分别于加入H2O2后15 min内检测细胞内[Ca2+]i的变化;分离昆明种小鼠单个心室肌细胞,全细胞膜片钳技术记录YLSC对ICa-L的影响。结果:①与正常对照组比较,H2O2诱导的模型组细胞内[Ca2+]i增加60.43%±7.75%,而高、中、低YLSC预处理组[Ca2+]i分别增加38.39%±13.87%,14.49%±2.94%,-28.1%±1.52%,与模型组比较显著降低(P<0.01)。②YLSC可使心室肌细胞ICa-L的电流-电压(I-V)关系曲线上移,能改变ICa-L的激活和失活特征,使ICa-L的激活曲线和稳态失活曲线左移。结论:YLSC对心肌细胞钙离子通道有较好的阻断作用,能显著减轻H2O2诱导的心肌细胞内[Ca2+]i超载。