广西汉族人血管紧张素转换酶I基因多态性与2型糖尿病肾病相关性研究

目的探讨血管紧张素 I转换酶 (ACE)基因多态性与 2型糖尿病肾病 (DN)的关系。方法应用多聚酶链反应 (PCR)技术 ,对 10 0例正常人、34例 2型糖尿病肾病 ,5 2例 2型糖尿病不伴 DN的 ACE基因插入 /缺失 (I/D)多态性进行检测。结果 2型 DM肾病组 DD基因型及 D等位基因发生频率高于正常对照组及无 DN组 ,2型 DM肾病组 II基因型及 I等位基因发生频率低于正常对照组及无 DN组 ,均有显著意义 P<0 .0 5。结论 ACE基因插入 /缺失 (I/D)多态性与

广西地区壮族2型糖尿病患者脂联素基因多态性研究

目的：研究脂联素基因外显子2单核苷酸多态性（SNP）＋45T→G多态性与广西地区壮族2型糖尿病（T2DM）、肥胖及胰岛素抵抗（IR）的关系。方法：运用PCR-RFLP的方法对303例无亲缘关系的广西地区壮族人群[正常糖耐量者（NGT）98例、糖耐量减低者（IGT）108例、T2DM者97例]中检测脂联素基因外显子2的多态性。结果：广西地区壮族人群中脂联素基因＋45位有SNP＋45T→G存在。含脂联素基因外显子2的SNP＋45GG基因型的人群BMI、FPG、PPG、FINS、HOMA-IR高于含TT基因型的人群（P〈0.05）.T2DM组的含GG基因型人数高于NGT、IGT组，GG基因型比TT基因型增加了3.077倍T2DM的危险性（95％CI：1.240-7.634）。结论：脂联素基因外显子2SNP＋45GG变异与肥胖、IR及T2DM相关。

广西壮、汉族体重指数与血压、血脂、脂肪肝等相关因素的关系

目的 :探讨广西地区人群体重指数 (BMI)与血压、血糖、血脂、脂肪肝、心电图异常、性别、民族及其他心脑血管病史等因素的相关性 ,并比较这些因素在壮族与汉族人群中的差异。方法 :对在本院及田阳县、田东县参加体检的 110 5例壮族与汉族人群询问病史并检查身高、体重、血压、空腹血糖、血脂、肝脏 B超、心电图等。结果 :在控制其他因素后 ,汉族人群 BMI与脂肪肝、舒张压水平及高血压病史呈密切正相关关系 ,男性 BMI高于女性 ;壮族人群 BMI与脂肪肝、血清甘油三酯浓度及收缩压水平有密切正相关关系 ;汉族人群的年龄、 BMI、血清甘油三酯浓度、胆固醇浓度、收缩压水平、脂肪肝检出率及心电图异常检出率均较壮族人群高。结论 :肥胖与脂肪肝、血压、血脂密切相关 ,且广西汉族人群肥胖、脂肪肝、高血脂。

肥胖与血脂、血压、脂肪肝等因素关系的Logistic回归分析

目的 :探讨广西地区人群肥胖与年龄、性别、民族、脂代谢紊乱及心脑血管疾病危险因素的相关性。方法 :对 15 98例参加健康体检人群的资料用非条件Logistic回归分析方法分析肥胖与性别、民族、年龄、血压、血糖、胆固醇、甘油三酯、脂肪肝、心电图异常及糖尿病、高血压病、冠心病、脑血管病病史等因素的相关关系。结果 :在控制混杂因素后肥胖与脂肪肝、收缩压、甘油三酯浓度密切相关 ,与民族密切相关 ,非广西壮、汉族以外的其他民族体重指数 (BMI)最高 ,其次是广西的汉族 ,BMI最小的是广西壮族。与性别密切相关 ,男性BMI高于女性。与心电图异常呈负相关。结论 :对容易出现肥胖的人群及男性应注意监控体重 ,肥胖的人群除了控制体重外 ,还应治疗伴随的脂肪肝。

肝癌相关抗原kinectin基因片断的重组表达

目的:研究肝癌相关抗原kinectin基因片断的体外重组表达方法,为该抗原的生产奠定基础。方法:用PCR法扩增肝癌相关抗原kinectin的基因片断,将目的基因插入表达载体pMAL-C2上麦芽糖结合蛋白(MBP)基因下游的多克隆位点,转化DH5α菌。通过蓝白斑筛选、PCR鉴定、内切酶鉴定及DNA测序筛出正确的重组子,并用其转化TB1菌。用IPTG对重组的TB1工程菌进行诱导表达,SDS-PAGE电泳鉴定。结果:kinectin基因片断正确插入pMAL-C2载体的多克隆位点,用IPTG对工程菌进行诱导,可见目的蛋白条带出现。结论:pMAL-C2载体可用于对肝癌相关抗原kinectin的体外基因重组表达。

红桂木凝集素糖蛋白的特征及其糖肽键性质的分析

目的：探讨红桂木凝集素（ＡｒｔｏｃａｒｐｕｓＬｅｎｇｎａｎｅｎｓｉｓＬｅｃｔｉｎ，ＡＬＬ）的糖蛋白特征及其糖肽键类型。方法：经Ｇａｌ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ６Ｂ亲和柱层析，从红桂木种子纯化获红桂木凝集素。以链霉蛋白酶将ＡＬＬ降解，ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２５层析，分离得糖肽，用化学及物理方法分析单糖组成，以β－消除反应及凝集素结合试验分析糖肽键类型。结果：ＡＬＬ和糖肽均含氨基半乳糖、葡萄糖、甘露糖、阿拉伯糖；β－消除反应后，２４０ｎｍ呈明显紫外吸收增加；ＡＬＬ可与木菠萝凝集素结合。结论：ＡＬＬ是一种糖蛋白，由两种分子量接近的亚基组成，其糖链与多肽连接类型为Ｏ—连接。

不同胃液胃蛋白酶含量及活性的测定

目的 :探讨红桂木凝集素用于胃液胃蛋白酶定量的可行性 ;证实胃蛋白酶在胃部疾病中的作用。方法 :将红桂木凝集素 (AL L)标记上辣根过氧化物酶 (HRP) ,用夹心酶联法测定不同胃病患者胃液中胃蛋白酶的含量 ,并用改良安宋氏法测定其相应的酶活性。结果 :正常组 (16例 )、胃炎组 (32例 )、十二指肠溃疡组 (32例 )、胃溃疡组 (2 1例 )及胃癌组 (5例 )中胃蛋白酶的含量及其活性均无显著性差异 ,但胃液 p H值 <3的酶含量要高于 p H值 >4的酶含量 ,而酶活性无明显差异。表明在胃酸增加时 ,胃蛋白酶的分泌亦增加 ,但酶含量并不与酶活性成正相关 ,提示胃蛋白酶与胃部疾病的发生关系不密切 ,可能不是胃部疾病发生的主要原因。

酶标红桂木凝集素检测初乳中SIgA

制备红桂木凝集素－辣根过氧化物酶（ＡＬＬ－ＨＲＰ）并经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２００纯化作为酶结合物，ＡＬＬ为包被物，确定最适包被浓度及ＡＬＬ－ＨＲＰ工作稀释度，夹心酶联检测ＩｇＡ及ＳＩｇＡ，进行抑制性、检出限、精密度、重现性等实验并制备标准曲线，初步测定４２例产妇初乳ＳＩｇＡ。结果表明，夹心法检测血清中ＩｇＡ可被外加的ＡＬＬ竞争性抑制，以血清或初乳中凝集素结合蛋白（Ｓ－ＬＢＰ或Ｃ－ＬＢＰ）作标准制备的标准曲线线性检测范围分别为０．９０～１１５．０μｇ／ｍｌ，４．０６～１３０．０μｇ／ｍｌ。本法测定４２例产后２～８天产妇初乳ＳＩｇＡ含量为２８８２．７±１８７４．５μｇ／ｍｌ，可用于乳汁中ＳＩｇＡ的含量测定，但因ＩｇＧ干扰不能用于血清ＩｇＡ测定。此方法简便、准确。

脑肿瘤中Pten/MMAC1/Tep1蛋白的表达

探讨Ｐｔｅｎ／ＭＭＡＣ１／Ｔｅｐ１蛋白在不同分化程度的脑肿瘤组织中的表达。［方法］应用免疫组化技术检测３０例 脑胶质细胞瘤和１５例脑膜瘤Ｐｔｅｎ／ＭＭＡＣ１／Ｔｅｐ１蛋白表达。［结果］脑胶质细胞瘤组织中Ｐｔｅｎ／ＭＭＡＣ１／Ｔｅｐ１蛋白表达阳性率为 ５３．３３％，脑膜瘤组织中Ｐｔｅｎ／ＭＭＡＣ１／Ｔｅｐ１蛋白表达阳性率为９３．３３％，两者差异有显著性（Ｐ＜０．０１）。［结论］Ｐｔｅｎ／ＭＭＡＣ１／Ｔｅｐ１ 蛋白丢失与脑胶质瘤的分化程度密切相关。

人血清及初乳中红桂木凝集素结合蛋白的研究

我们采用Ｇａｌ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ６Ｂ柱从红桂木种子抽提液中分离出纯化的红桂木凝集素（ＡＬＬ），并制成ＡＬＬ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ亲和柱，从人血清及初乳中分离出ＡＬＬ结合蛋白。免疫学鉴定发现血清中ＡＬＬ结合蛋白是ＩｇＡ、ＩｓＧ，其中以ＩｇＡ为主；初乳中ＡＬＬ结合蛋白是ＳＩｇＡ。研究结果显示，ＡＬＬ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ可用于从人血清及初乳中快速、大量纯化ＩｇＡ。

木菠萝凝集素的纯化与性质研究

木菠萝种子经抽提、４０％～６０％饱和度硫酸铵沉淀和Ｇａｌ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ６Ｂ亲和层析，得到纯化的木菠萝凝集素（Ｊａｃａｌｉｎ）。Ｊａｃａｌｉｎ分子量约为５８２００，由分子量分别是１４０００和１５８００的亚基组成，等电聚焦电泳显示多条区带，其ｐＩ为５．７～８．６５，Ｓｃｈｉｆｆ＇ｓ试剂染色证明它是一种糖蛋白，Ｎ－末端为精氨酸和甘氨酸。Ｊａｃａｌｉｎ能凝集除山羊、鸡以外的多种动物和人Ａ、Ｂ、Ｏ和ＡＢ血型红细胞，凝集活性受Ｎ－酰凝半乳糖胺（ＧａｌＮＡｃ）和半乳糖（Ｇａｌ）抑制。在ｐＨ值为４．５～１０，ｐＨ改变不影响Ｊａｃａｌｉｎ凝集活性。

单核细胞趋化蛋白-1A-2518G基因多态性与2型糖尿病及葡萄糖耐量异常的关系

目的探讨单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)A-2518G基因多态性与葡萄糖耐量异常(IGT)、新发2型糖尿病(T2DM)的关系。方法对111例健康人(NC组)、82例IGT患者(IGT组)及76例新发T2DM患者(T2DM组)采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术,观察MCP-1A-2518G基因多态性,分析其与IGT和T2DM的关系。结果 IGT、T2DM组与NC组的MCP-1等位基因和基因频率比较差异无统计学意义(P>0.05),logistic回归分析结果显示,腰臀比、胰岛素抵抗指数、MCP-1 AA是IGT及新发T2DM发病的独立危险因素(P<0.05)。结论 MCP-1 A-2518G基因多态性可能参与IGT及新发T2DM的发病机制,AA基因携带增加人群IGT及新发T2DM的患病风险。

序列特异性引物-聚合酶链反应法用于广东汉族人群HLA DQA1等位基因分析

目的：研究广东汉族人群中人类白细胞抗原（ＨＬＡ）ＤＱＡ１等位基因频率分布，为ＨＬＡＤＱＡ１相关疾病的研究及人类学的研究提供基础资料。方法：用序列特异性引物聚合酶链反应（ＳＳＰＰＣＲ）法对广东汉族人群作ＨＬＡＤＱＡ１等位基因分型，根据出现扩增产物所用的序列特异性引物，直接分析判断受检查者的基因型别。结果：１４６例广东汉族健康无血缘关系个体中共检出１０个等位基因，以ＤＱＡ１０３０１的频率（０．２９１）最高，基因型的观察值与期望值相比，符合ＨａｒｄｙＷｅｉｎｂｅｒｇ平衡，纯合基因型的观察值与期望值相比，Ｐ＞０．９５，家系调查及重复性试验显示结果可靠。结论：广东汉族ＨＬＡＤＱＡ１基因与其他１０组华人群体的资料比较，总体检验有显著差异，但均以ＤＱＡ１０３０１的频率最高，显示华人的遗传系统既有共性亦有各自的特点，南方汉族人群体间或与南方一些少数民族比较均有显著差异，显示南方华人群体遗传背景的复杂性。

用酶标凝集素检测胃液中的胃蛋白酶

采用辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）标记ＡＬＬ，通过夹心酶联法检测各种胃病患者胃液中的胃蛋白酶。结果：胃蛋白酶在正常组（１５例）、胃炎组（２８例）、十二指肠溃疡组（２５例）、胃溃疡组（２５例）及胃癌组（１３例）中的含量无显著性差异。但胃液ｐＨ值≥５的胃蛋白酶含量明显高于ｐＨ值＜４的酶含量。表明胃粘膜屏障的局部缺陷使之对胃蛋白酶抵抗能力下降，可能与消化性溃疡的发生关系更为密切。

Ig融合蛋白的应用研究进展

Ig融合蛋白是指在基因水平将目的基因同Ig部分片段基因相连 ,克隆并表达的重组蛋白。该蛋白具有目的蛋白的功能 ,又获取Ig的新特性。本文综述了Fab融合蛋白及Fc融合蛋白在临床及科学研究应用方面的进展。

顶体素结合蛋白真核表达载体的构建及其在肝癌细胞株的表达

目的:构建ACRBP真核表达载体,建立稳定表达ACRBP的人肝癌细胞株,为后继研究该基因的功能奠定基础。方法:以pMAL-C2/ACRBP重组质粒作为模板进行PCR,扩增出ACRBP编码区cDNA,并与真核表达载体pEGFP-N1连接,构建pEGFP-N1/ACRBP重组质粒。通过Fugene HD将该重组质粒转染至ACRBP表达阴性的肝癌细胞株HepG2,经G418筛选阳性克隆获得稳定转染株。RT-PCR和免疫组织化学方法检测HepG2细胞中ACRBP的表达情况。结果:pEG-FP-N1/ACRBP真核表达载体经测序证实插入序列完全正确;ACRBP基因已经稳定转染至HepG2细胞中并获得表达。结论:成功构建了pEGFP-N1/ACRBP真核表达载体并将其转染HepG2后,能稳定地表达ACRBP。

十二指肠溃疡、慢性糜烂性胃炎患者胃窦粘膜一氧化氮含量及一氧化氮合酶活力研究

对19例十二指肠球部溃疡及19例慢性糜烂性胃炎患者胃窦粘膜的一氧化氮（NO）与一氧化氮合酶（NOS）进行定量检测并与正常人比较，结果显示：十二指肠溃疡及慢性糜烂性胃炎患者胃粘膜的NO含量升高、NOS活力增强（P值均＜0．01）。提示：胃、十二指肠粘膜的损伤或炎症可能与胃粘膜NOS过度表达、NO产生过多有关。

PCR-SSCP中加或不加去离子甲酰胺的方法比较

目的 :探讨不同电泳条件对 ob基因检出的影响。方法 :在样品处理中分别采用加或不加去离子甲酰胺的方法 ,观察其扩增带 ,并对电泳结果进行比较。结果 :在 SSCP中 ,加与不加去离子甲酰胺均可检出 ob基因 ,表现出的基因各带无明显差异 (P >0 .0 5 )。结论 :PCR- SSCP中加或不加去离子甲酰胺对