红桂木凝集素的纯化与性质研究

红桂木（Ａｒｔｏｃａｒｐｕｓｌｉｎｇｎａｎｅｎｓｉｓ）、俗名胭脂，属桑科桂木属，为亚热带、热带植物．红桂木种子含丰富的红桂木凝集素（Ａｒｔｏｃａｒｐｕｓｌｉｎｇｎａｎｅｎｓｉｓｌｅｃｔｉｎ，ＡＬＬ），但迄今国内外均未见关于它的报道．我们采用Ｇａｌ－Ｓ...

酶标白桂木凝集素糖蛋白结合特性的分析

采用辣根过氧化物酶 ( HRP)标记白桂木凝集素 ( AHL) ,应用酶联夹心法及糖竞争抑制实验 ,研究 AHL的糖蛋白结合特性 .研究表明 ,AHL能与两种不同类型的糖蛋白结合 ,一类以胃蛋白酶为代表 ,AHL能以高亲和力与胃蛋白酶结合 .其次能与β-乳球蛋白、牛血清清蛋白结合 ,但结合力依次递减 .AHL也能与透明质酸以较高亲和力相结合 .AHL与胃蛋白酶、β-乳球蛋白、牛血清清蛋白、透明质酸的结合受 Me- Gal的强烈竞争抑制 ,亦受 Me- Man\D- Gal\Raf的抑制 .另一类为Con A,AHL与 Con A的结合受 Me- Man的强烈竞争抑制 ,并受 Me- Glc\D- Man\D- Fru\D- Glc的较强抑制 .各种糖的封闭性抑制实验结果与竞争性抑制实验相似 .提示 AHL上存在 O-糖苷键结合位点 .

金樱子对大鼠肝组织脂质抗氧化作用的体外实验

目的:研究金樱子(RLM)水醇提取液的抗脂质过氧化作用。方法:以大鼠肝匀浆为体外实验体系,应用分光光度法检测金樱子对大鼠肝匀浆化学诱导脂质过氧化产物丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量的影响。结果:金樱子能抑制大鼠肝组织脂质过氧化产物MDA生成,并呈现出一定的量效关系。结论:金樱子在一定的浓度范围内具有抗氧化活性。

复发性鼻咽癌单纯放疗或同步放化疗的疗效分析

目的：观察紫杉醇＋奈达铂联合调强适形放疗（IMRT）治疗复发性鼻咽癌的疗效及不良反应.方法：选择我院2007年1月至2010年2月96例经病理确诊的复发性鼻咽癌患者,随机分为观察组和对照组,观察组为紫杉醇＋奈达铂联合IMRT.对照组为单纯IMRT.对患者近期疗效及不良反应进行观察,比较远期疗效,所有患者均随访36～72个月.结果：近期疗效：总有效率（CR＋PR）观察组为42例（87.50％）,对照组为20例（41.67％）,两组差异有统计学意义（P＜0.001）.远期疗效：观察组：1,2年生存率分别为87.50％,70.83％.对照组：1,2年生存率分别为81.25％,62.50％,两组比较差异无统计学意义（P＞0.05）.3年生存率：观察组为60.42％,对照组为22.92％,两组比较差异有统计学意义（P＜0.001）.远处转移率：观察组及对照组分别为6.25％,31.25％,两组比较差异有统计学意义（P=0.002）.观察组主要毒副反应为血液学毒性、消化道反应和口腔黏膜反应,多为0～2级.予以对症治疗后均好转,无一例患者因化疗毒副反应而中断治疗.两组不良反应发生率比较差异有统计学意义（P ＜0.05）.结论：紫杉醇＋奈达铂联合IMRT治疗复发性鼻咽癌是安全、有效的方法,值得推广.

采用酶标凝集素检测特异的糖蛋白

红桂木凝集素（ＡＬＬ）和木菠萝凝集素（Ｊａｃａｌｉｎ）经过碘酸钠法标记辣根过氧化物酶（ＨＲＰ）得到ＡＬＬ－ＨＲＰ和Ｊａｃａｌｉｎ－ＨＲＰ的酶标复合物。通过对１６种蛋白质进行检测，发现这两种凝集素均与胃蛋白酶、β－乳球蛋白结合（ＡＬＬ还可与牛血清白蛋白结合），其中与胃蛋白酶的结合最强。糖抑制试验表明半乳糖、棉子糖均可抑制两种凝集素对胃蛋白酶的作用。利用ＡＬＬ－ＨＲＰ酶联法检测１５例正常人胃液中的胃蛋白酶，酶含量为（１．２２５±０．７９５）ｍｇ／Ｌ。说明ＡＬＬ和Ｊａｃａｌｉｎ有许多相似的生物学特性，利用它们的这些特性可检测或分离纯化特异的糖蛋白。

双脱水二乙酰卫矛醇对3种肝癌细胞生长的影响

目的:探讨双脱水二乙酰卫矛醇(DADAG)对3种人肝癌细胞生长的影响。方法:在培养的人肝癌细胞HLE、BEL-7404和SMMC-7721中,加入DADAG作用1、2、3、4d后,用MTT法检测细胞生长情况。结果:DADAG对不同肝癌细胞其半数抑制浓度(IC50)不同,HLE为5.39mg/L;BEL-7404为7.49mg/L;SMMC-7721为14.30mg/L。加入浓度为8.0mg/L的DADAG作用4d后,HLE的生长抑制率分别为31.48%、16.05%、34.86%和48.20%;BEL-7404的生长抑制率分别为26.32%、25.88%、17.86%和29.40%;而加入浓度为16.7mg/L的DADAG作用4d后,SMMC-7721的生长抑制率分别为23.81%、36.62%、33.15%和50.83%。镜下可见药物作用后细胞形态变圆、固缩等现象。结论:DADAG在体外具有明显的抑制肝癌细胞生长的作用。

1555例体重指数与血压、血脂、脂肪肝、民族等因素的多元回归分析

目的 :探讨广西地区人群肥胖与年龄、性别、民族、脂代谢紊乱及心脑血管疾病危险因素的相关性。方法 :对 15 5 5例参加健康体检的人群的资料用多元回归分析方法分析体重指数 (BMI)与性别、民族、年龄、血压、血糖、胆固醇、甘油三酯、脂肪肝、心电图异常及糖尿病、高血压病、冠心病、脑血管病病史等因素的相关关系。结果 :BMI与脂肪肝、收缩压、甘油三酯及高血压病史密切相关 ;与民族密切相关 ,非广西壮、汉族以外的其他民族 BMI最高 ,广西汉族次之 ,广西壮族最小 ;与性别密切相关 ,男性 BMI高于女性。结论 :对容易出现肥胖的人群及男性应注意监控体重 ,肥胖的人群除了控制体重外 ,还应治疗伴随的脂肪肝、高血压及高脂血症。

采用白桂木凝集素-HRP测定唾液SIgA方法的建立

目的：建立白桂木凝集素－ＨＲＰ夹心法检测唾液中分泌型ＩｇＡ（ＳＩｇＡ）。方法：制备ＡＨＬ－ＨＲＰ作为酶标凝集素，ＡＨＬ为包被物，确定最适包被浓度及ＡＨＬ－ＨＲＰ工作稀释度，夹心酶联检测ＳＩｇＡ，进行检出限、精密度、准确性等实验并制备标准曲线，初步测定７１例正常人唾液ＳＩｇＡ含量。结果：ＡＨＬ－ＨＲＰ夹心法检测ＳＩｇＡ标准曲线线性检测范围５～３３７ｍｇ／Ｌ。本法测定７１例健康人唾液ＳＩｇＡ含量为（５０９．１５±２９６．７５）ｍｇ／Ｌ。其中５份标本批内平均变异７．４％，批间变异１０．５６％，回收率平均９４％。结论：ＡＨＬ－ＨＲＰ夹心法测定ＳＩｇＡ的作用模式为ＡＨＬ→ＳＩｇＡ→ＡＨＬ－ＨＲＰ，可用于唾液中的ＳＩｇＡ含量的测定。方法简便、准确、便于推广。

两种亲和层析法纯化白桂木凝集素的比较

分别采用人血清γ球蛋白－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ亲和层析及半乳糖（Ｇａｌ）－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ６Ｂ亲和层析来分离纯化白桂木凝集素（ＡＨＬ）。结果：两种方法提取的ＡＨＬ在纯度、凝集活力及回收率上均无明显差别。但用Ｇａｌ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ６Ｂ来分离纯化ＡＨＬ更安全、简便、快捷和经济等优点，不失为分离桂木凝集素的一种好方法。

凝集素的寡糖链结构分析及临床应用综述

描述凝集素的寡糖链制备 ,糖链结构分析的各种手段 ,介绍各种凝集素在肿瘤诊断。

一种检测初乳SIgA的新方法

目的：建立一种新的检测初乳ＳＩｇＡ的方法。方法：以辣根过氧化酶（ＨＲＰ）标记红桂木凝集素（ＡｒｔｏｃａｒｐｕｓＬｉｎｇｎａｎｅｎ－ｓｉｓＬｅｃｔｉｎ，ＡＬＬ），并经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２００纯化，采用ＡＬＬ－ＳＩｇＡ－ＡＬＬ－ＨＲＰ夹心酶联法检测初乳ＳＩｇＡ，进行检出限、精密度、重现性等实验并制备标准曲线，初步应用于产妇初乳中ＳＩｇＡ的测试。结果：以初乳中红桂木凝集素结合蛋白为标准品制备标准曲线，检测ＳＩｇＡ的线性范围是４．０６～１３０．０ｍｇ／Ｌ。本法测定４２例产后２～８ｄ产妇初乳ＳＩｇＡ含量为（２８８２．７±１８７４．５）ｍｇ／Ｌ，其中８例批内变异为７．５１％，批间变异为９．６２％。结论：本法简便、准确。

端粒酶逆转录酶mRNA在舌鳞癌和癌前病变中的表达

目的 :探讨端粒酶活性在正常舌黏膜、上皮单纯性增生、上皮异常增生和舌鳞癌中的表达。方法 :用原位杂交法检测 8例正常舌黏膜 ,8例上皮单纯性增生 ,2 7例上皮异常增生和 5 2例舌鳞癌中端粒酶逆转录酶 (TERT) m RNA的表达。结果 :TERTm RNA 阳性率在正常舌黏膜和上皮良性增生中为 0。在上皮异常增生中为 4 8.1 % (1 3/ 2 7) ;在舌鳞癌中为 84 .6 %(4 4 / 5 2 )。TERTm RNA阳性率与舌癌患者局部淋巴结转移相关 (P =0 .0 4 2 ) ,与 TNM分期和组织学分级无关 (P =0 .0 91和P =0 .6 71 )。TERTm RNA阳性表达患者生存率低于阴性表达患者 (P =0 .0 2 3)。结论 :端粒酶活性可能在舌鳞癌的发生上起了关键作用。TERTm

男性肥胖患者皮下脂肪组织PPARγ_2、leptin、TNF-α mRNA的表达与胰岛素抵抗

目的:研究肥胖患者腹部皮下脂肪组织过氧化物酶体增殖物激活受体γ-2(PPARγ2)、瘦素(leptin)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α) mRNA与胰岛素抵抗(IR)的关系。方法:应用RT-PCR凝胶成像半定量技术测定男性肥胖患者皮下脂肪组织PPARγ2 mRNA、leptin mRNA及TNF-α mRNA,以及空腹血清leptin、胰岛素(FINS)、空腹血糖(FBS),计算胰岛素抵抗指数(IRI),分析观察指标与肥胖之间的相关关系。结果:①肥胖组FINS、leptin、IRI、脂肪组织mRNA、leptin mRNA及TNF-α mRNA高于非肥胖组(P<0.05);②IRI与leptin mRNA、TNF-α mRNA、PPARγ2 mRNA、leptin、BMI、FINS成正相关(P<0.05);③以IRI为应变量,TNF-α mRNA、PPARγ2 mRNA、leptinmRNA、血清leptin、BMI为自变量做多元逐步回归分析,回归方程:Y=0.358+0.813PPARγ2mRNA。结论:①男性肥胖患者leptin及腹部皮下脂肪组织PPARγ2 mRNA、leptin mRNA、TNF-α mRNA较非肥胖者升高;②男性患者PPARγ2 mRNA与IR密切相关,可以反映IR的程度。

人肺癌细胞转染野生型P^(53)基因对生长的影响

研究转染野生型 P5 3基因对人肺癌细胞的生长影响作用。方法 :将带有野生型 P5 3基因的 p CEP4质粒 ,通过 L ipo-fectin转染肺癌细胞 ,用四甲基偶氮唑 (MTT)法观察细胞的生长情况。结果 :转染野生型 P5 3 基因 ,可使肺腺癌、肺鳞癌和小细胞肺癌细胞的生长明显受到抑制。结论 :野生型 P5 3基因有效抑制肺癌细胞的生长 ,可作为肺癌基因治疗的一种手段。

二乙酰去水卫矛醇对胃癌细胞系HGC27生长和凋亡的影响

目的:探讨二乙酰去水卫矛醇(DADAG)对胃癌细胞系HGC27生长的影响。方法:在培养的人胃癌细胞系HGC27中,加入DADAG作用24、48、72、96h后,用MTT法检测细胞生长情况,用BECKMAN COULTER流式细胞分析仪检测细胞的凋亡百分率。结果:DADAG对胃癌细胞系HGC27的半数抑制浓度(IC50)为6.29mg/L。加入浓度为8.0mg/L的DADAG,24、48、72、96h时HGC27细胞的生长抑制率分别为31.58%、43.04%、49.51%和63.91%;凋亡率分别为22.553%、29.331%、33.237%、35.117%。结论:DADAG在体外具有明显的抑制胃癌细胞系HGC27生长的作用。

NO含量与NOS活力对ALT与AST活力影响的研究

目的：研究一氧化氮（Ｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅ；ＮＯ）与一氧化氮合酶（ＮｉｔｒｉｃＯｘｉｄｅｓｙｎｔｈａｓｅ；ＮＯＳ）活力对丙氨酸转氨酶（ＡＬＴ）与天冬氨酸转氨酶（ＡＳＴ）活力的影响并探讨其机制。方法：对大鼠腹腔注射Ｌ－Ａｒｇ，４ｈ后采血取肝检测ＮＯ含量，ＮＯＳ活力、ＡＬＴ及ＡＳＴ活力并与对照组大鼠对比．ＮＯ定量用硝酸还原酶法、ＮＯＳ测定用分光光度法、ＡＬＴ与ＡＳＴ测定用改良赖氏法（２，４一二硝基苯肼比色法）。用ＮａＮＯ２和ＮａＮＯ３作抑制剂进行酶抑制试验。结果：腹腔注射Ｌ－Ａｒｇ后肝脏及血清中ＮＯ含量与ＮＯＳ活力显著升高（Ｐ＜０．０１）；而肝脏及血清中ＡＬＴ与ＡＳＴ活力下降。结论：体内ＮＯ转化生成的ＮＯ－２、ＮＯ－３对ＡＬＴ及ＡＳＴ有抑制作用，其中ＮＯ－２的抑制作用强于ＮＯ－３。

HPLC法测定芪麦口服液中黄芪甲苷的含量

[目的]采用高效液相色谱法测定芪麦口服液中黄芪甲苷的含量。[方法]色谱柱为Waters symertry C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为乙腈-水(1∶2),检测波长为203nm。[结果]黄芪甲苷的线性范围为0.20μg^1.10μg,平均回收率为96.88%,RSD=1.32%(n=5),三个批号的样品含量分别为0.328mg/ml,0.319mg/ml,0.356mg/ml。[结论]HPLC法快速准确,可用于芪麦口服液的质量控制。

缺氧环境中的端脑素表达变化

目的：探索端脑素蛋白在缺氧环境中的表达变化.方法：建立缺氧神经元模型并验证缺氧模型的效果;以稳定表达常量人端脑素蛋白的PAJU-TLN细胞株和具有NEO抗性的PAJU-NEO细胞株作为神经元缺氧模型,分别对PAJU-TLN和PAJU-NEO细胞进行缺氧处理,采用蛋白免疫印记技术检测端脑素蛋白的表达变化.结果：经免疫荧光检测缺氧诱导因子HIF-1a的表达证实缺氧神经元模型有效,经过缺氧处理后,端脑素蛋白的表达缓慢下降,于缺氧48小时表达下降,72小时表达更低（P＜0.05）.结论：端脑素在缺氧环境中表达明显的降低,可能失去其对神经细胞的保护作用.