肝细胞癌中VEGF,HPA的表达与肿瘤微血管密度的关系及意义

目的:探讨血管内皮生长因子(VEGF),乙酰肝素酶(HPA)在肝细胞癌(HCC)组织中的表达与肿瘤微血管密度(MVD)的关系及其意义。方法:应用免疫组织化学二步法联合检测72例HCC,62例肝硬化和23例正常肝组织中VEGF,HPA的表达和进行MVD计数,结合临床病理资料进行分析。结果: HCC中VEGF,HPA的表达率均明显高于肝硬化及正常肝,HCC中MVD值也显著高于肝硬化及正常肝。VEGF,HPA的表达率在TNMⅠⅡ期、无转移复发组、AFP<400μg/L组、无门脉癌栓组均明显低于ⅢⅣ期、转移复发组、AFP≥400μg/L组、有门脉癌栓组。在TNMⅠⅡ期、无转移复发组、AFP<400μg/L组、无门脉癌栓、单个肿瘤结节以及肿瘤直径<5cm组MVD计数亦明显低于ⅢⅣ期、转移复发组、AFP≥400μg/L组、有门脉癌栓、多个肿瘤结节以及肿瘤直径≥5cm组。VEGF,HPA的表达率与MVD值三者两两之间显示明显正相关。结论: VEGF,HPA在促进肿瘤微血管生成中起重要的作用,联合检测VEGF,HPA,CD34在肝癌中的表达,对肝癌患者的预后评估有一定的辅助意义。

DcR3对肝癌细胞生长迁移的影响

目的:观察将DcR3中和性抗体加入肝癌细胞系hepG2后,细胞生长增殖、运动迁移等生物学特性的变化。方法:将DcR3抗体加入hepG2中,MTT检测不同浓度抗体作用于hepG2存活率,挑选最佳作用时间和浓度;免疫细胞化学检测DcR3抗体加入后hepG2 DcR3蛋白表达差异;通过绘制生长曲线及集落形成实验分析生长增殖特性;流式细胞仪(FCM)检测其对细胞周期的影响;划痕实验分析DcR3对hepG2迁移能力的影响。结果:DcR3抗体最佳实验浓度为0.8mg/L,作用时间48h。加入DcR3抗体后,HepG2 DcR3蛋白表达明显减弱;细胞生长增殖能力和集落形成能力均显著下降;细胞周期阻滞在G1/S期;同时迁移能力也明显被抑制。结论:DcR3中和性抗体能显著抑制肝癌细胞的生长和迁移,提示该基因在肝癌的发生发展及浸润转移中发挥重要作用,其中和性抗体有望在临床治疗中应用。

应用组织微阵列技术检测胃癌组织肿瘤坏死因子受体6的表达及意义

目的:探讨胃癌(gastric carcinoma,GC)组织肿瘤坏死因子受体6(tumor necrosis factor receptor 6,TR6)蛋白过度表达的临床意义.方法:2001/2005年手术切除或内镜活检的胃黏膜标本151例,包括慢性浅表性胃炎(CSG)42例,胃黏膜肠上皮化生(IM)37例,异型增生(Dys)45例,GC27例,另外,GC52例为组织微阵列产品.所有病例每例取2处,作成组织微阵列6组:GC24例、GC27例、GC28例、Dys45例、IM37例、CSG42例.应用免疫组织化学检测TR6蛋白的表达水平,并分析其与临床病理特征的关系.结果:GC组织TR6阳性率明显高于Dys、IM及CSG组织(χ2=2.288,P=0.022;χ2=2.639,P=0.008;χ2=3.593,P=0.000).GC高分化组TR6阳性率明显低于低分化组(χ2=2.183,P=0.029);TNMⅠ、Ⅱ期阳性率明显低于Ⅲ、Ⅳ期(χ2=2.194,P=0.028);无淋巴结转移组阳性率明显低于淋巴结转移组(χ2=2.891,P=0.004);无远处转移组阳性率明显低于远处转移组(χ2=5.021,P=0.000);TR6表达与年龄、性别及肿瘤浸润深度无关.结论:TR6高表达在GC的发生发展及转移中起重要作用;检测TR6蛋白指标有助于GC诊断和判断患者预后.

TR6mRNA在肝癌中的表达及其临床意义

[目的]研究肝癌中TR6mRNA的表达及其与临床病理特征之间的关系,阐明TR6在肝癌转移过程中的作用。[方法]应用半定量RT-PCR方法,检测TR6mRNA在肝癌组织中的表达和相对含量,分析TR6mRNA的相对含量与肝癌临床病理特征的关系。[结果]69例肝癌组织中,67例标本可扩增出426bp的条带,TR6mRNA的阳性表达率为97.10%,癌旁组织TR6mRNA的阳性表达率为76.81%(53/69);癌组织中TR6mRNA相对含量明显高于癌旁组织(P﹤0.01)。TR6mRNA表达与转移复发和肿瘤大小有关,与年龄、性别、分化程度、临床分期、有无肝硬化、AFP、门脉癌栓、包膜浸润、肿瘤结节及HBsAg无关。序列分析发现其两例病例序列mRNA与源序列比较均有4个不同的碱基改变。[结论]肝癌中,TR6mRNA表达增高。肝癌TR6mRNA表达产物存在碱基改变。TR6mRNA的高表达在肝癌的转移复发过程中可能发挥重要的作用。

DcR3对乳腺癌细胞凋亡的影响及其在乳腺癌血清中的表达

目的研究诱捕受体3(DcR3)单克隆中和性抗体对乳腺癌细胞生长和凋亡的影响,以及DcR3在乳腺癌患者血清中的表达及临床意义。方法将DcR3单克隆中和性抗体作用于体外培养的人乳腺癌细胞系MCF-7,检测细胞增殖情况及Caspase3/7活性变化,应用Hoechst33342及碘化丙啶双重染色荧光显微镜下观察细胞凋亡形态及计算凋亡率。应用ELISA检测乳腺癌患者血清中DcR3的表达。结果 DcR3中和性抗体可抑制MCF-7细胞生长并可诱导细胞凋亡(P<0.05)。乳腺癌患者血清DcR3水平明显高于健康对照组(P<0.01);DcR3表达水平与肿瘤大小及临床TNM分期有关(P<0.05)。结论 DcR3对人乳腺癌细胞增殖具有抑制作用,其机制与诱导肿瘤细胞凋亡有关。DcR3与乳腺癌的发生及恶性进展有关,检测DcR3血清表达有助于乳腺癌诊断及预后判断。

肿瘤坏死因子受体6在肝癌组织及肝癌细胞系中的表达研究

目的探讨肿瘤坏死因子受体6（TR-6）蛋白在原发性肝细胞癌（HCC）组织芯片及肝癌细胞系中的表达及临床意义。方法利用125例HCC、48例癌旁、89例非癌肝组织构建组织微阵列。应用免疫组织化学法检测组织芯片和5种肝癌细胞系中TR-6蛋白的表达水平，并分析其与HCC临床病理特征的关系。结果（1）组织微阵列利用率为96．56％（253／262）；（2）HCC组织中的TR-6蛋白的阳性率为73．33％（88／120），明显高于癌旁的54．17％（26／48，x^2=5．755，P=0．016）及非癌组织的29．41％（25／85，x^2=38．801，P=0．000）。癌旁组织中的TR-6蛋白阳性率明显高于非癌组织（x^2=7．952，P=0．005）。5种肝癌细胞系均有TR-6蛋白的表达，而癌旁肝细胞系QSG-7701及正常肝细胞系HL-7702均无表达；（3）HCC中临床TNM分期Ⅰ、Ⅱ期TR-6阳性率61．76％（42／68）明显低于Ⅲ、Ⅳ期88．46％（46／52，x^2=10．739，P=0．001）；（4）HCC中无转移组TR-6阳性率58．82％（20／34）明显低于转移组96．67％（29／30，x^2=19．858，P=0．000）；（5）TR-6表达率在AFP≥400μg／L组为80．82％（59／73）、有门静脉癌栓组91．30％（42／46）、包膜浸润组84．34％（70／83）和多个肿瘤结节组89．13％（41／46）分别高于AFP〈400μg／L组的61．70％（29／47，x^2=5．345，P=0．021）、无门静脉癌栓组的62．16％（46／74，x^2=12．319，P=0．000）、无包膜浸润组的48．65％（18／37，x^2=16．668，P=0．000）及单个肿瘤结节组的63．51％（47／74，x^2=9．519，P=0．002）。（6）TR-6表达与年龄、性别、肿瘤分化程度、有无肝硬化及肿瘤直径无关。结论检测TR-6蛋白指标有助于HCC的诊断和判断患者预后。

诱捕受体3中和性抗体在HepG2细胞凋亡中的作用

诱捕受体3（decoyreceptor3，DcR3）又称为TR6，在多种恶性肿瘤存在着过度表达。该基因表达产物可与相关配体结合，从而阻断由这些配体介导的细胞凋亡，而且还能调控免疫细胞的活性与分化，下调机体免疫系统，与肿瘤免疫逃逸密切相关。我们在前期研究中发现，在原发性肝细胞癌（HCC）组织及非癌肝组织中DcR3阳性者的凋亡率均低于DcR3阴性者，DcR3表达与凋亡率呈负相关。

肝细胞癌中肿瘤坏死因子受体6的表达

近来研究表明肿瘤坏死因子受体6（TR6）在人类多种恶性肿瘤的发生发展以及肿瘤的免疫逃逸中发挥重要作用,其表达量越高对细胞凋亡的抑制作用越显著。我们检测了TR6在39例HCC及癌旁肝组织的表达及与凋亡的关系,报道如下。