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MAPK信号转导通路多基因多重RT-PCR方法的建立
被引量:
1
1
作者
陈茂伟
曹骥
+1 位作者
苏建家
焦杨
《广西医科大学学报》
CAS
北大核心
2006年第2期274-276,共3页
目的:建立检测MAPK激酶信号转导通路ERK1、JNK1、p38各基因mRNA表达情况的多重逆转录聚合酶链式反应(Multi RT-PCR)的方法。方法:自Genebank中获取大鼠及人源ERK1、JNK1及p38的基因序列,将大鼠与人的基因序列用Align X进行同源性比较,...
目的:建立检测MAPK激酶信号转导通路ERK1、JNK1、p38各基因mRNA表达情况的多重逆转录聚合酶链式反应(Multi RT-PCR)的方法。方法:自Genebank中获取大鼠及人源ERK1、JNK1及p38的基因序列,将大鼠与人的基因序列用Align X进行同源性比较,选取保守区应用primer 5软件设计3对引物,建立Multi RT-PCR检测体系,分别扩增ERK1、JNK1、p38基因,产物长度分别403、3096、07 bp;对RT-PCR扩增产物分别切胶回收进行PCR产物测序进一步验证。结果:①应用Multi RT-PCR方法对11例大鼠及11例人肝细胞癌组织进行检测,琼脂糖电泳结果显示各基因产物条带清晰、无引物二聚体产生、无非特异性扩增产物,并对各基因产物片段分别切胶测序得到证实;②对22例肝癌组织检测结果表明在肝癌组织中ERK1、JNK1、p38mRNA阳性率分别为95.83%、100%、100%,且在表达丰度上有明显的变化。结论:所建立的MAPKMulti RT-PCR检测方法具有特异性强、效率高、简单易行、可靠的特点,对MAPK信号转导通路在疾病中的作用研究具有较强的应用价值。
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关键词
多重逆转录PCR
分裂原激活的激酶信号转导通路
基因
信使RNA
下载PDF
职称材料
题名
MAPK信号转导通路多基因多重RT-PCR方法的建立
被引量:
1
1
作者
陈茂伟
曹骥
苏建家
焦杨
机构
广西医科大学第一附属医院传染病学科
广西医科大学
附属
肿瘤
医院
实验研究部
广西医科大学
药理学教研室
出处
《广西医科大学学报》
CAS
北大核心
2006年第2期274-276,共3页
文摘
目的:建立检测MAPK激酶信号转导通路ERK1、JNK1、p38各基因mRNA表达情况的多重逆转录聚合酶链式反应(Multi RT-PCR)的方法。方法:自Genebank中获取大鼠及人源ERK1、JNK1及p38的基因序列,将大鼠与人的基因序列用Align X进行同源性比较,选取保守区应用primer 5软件设计3对引物,建立Multi RT-PCR检测体系,分别扩增ERK1、JNK1、p38基因,产物长度分别403、3096、07 bp;对RT-PCR扩增产物分别切胶回收进行PCR产物测序进一步验证。结果:①应用Multi RT-PCR方法对11例大鼠及11例人肝细胞癌组织进行检测,琼脂糖电泳结果显示各基因产物条带清晰、无引物二聚体产生、无非特异性扩增产物,并对各基因产物片段分别切胶测序得到证实;②对22例肝癌组织检测结果表明在肝癌组织中ERK1、JNK1、p38mRNA阳性率分别为95.83%、100%、100%,且在表达丰度上有明显的变化。结论:所建立的MAPKMulti RT-PCR检测方法具有特异性强、效率高、简单易行、可靠的特点,对MAPK信号转导通路在疾病中的作用研究具有较强的应用价值。
关键词
多重逆转录PCR
分裂原激活的激酶信号转导通路
基因
信使RNA
分类号
R392-33 [医药卫生—免疫学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
MAPK信号转导通路多基因多重RT-PCR方法的建立
陈茂伟
曹骥
苏建家
焦杨
《广西医科大学学报》
CAS
北大核心
2006
1
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