α-地中海贫血实验室诊断技术进展

地中海贫血(thalassaemias),是由于某类珠蛋白合成受抑制所引起的溶血性贫血,但并不涉及血红蛋白结构的异常。是人类最常见的单基因遗传病。总结近年α-地中海贫血实验室诊断技术,为提高地中海贫血诊断的准确性,减少误诊和漏诊,需要要已有的实验技术综合应用,开陈出新,尽力创造最为适合患者诊断的实验手段。

红细胞参数的运算公式对缺铁性贫血与β-地中海贫血鉴别诊断价值探讨

目的探讨红细胞参数的运算公式对缺铁性贫血与β-地中海贫血鉴别诊断的实用价值。方法使用全自动血细胞分析仪对160例缺铁性贫血和172例β-地中海贫血患者的红细胞相关参数进行检测,以文献报道的5个红细胞参数的运算公式作为缺铁性贫血与β-地中海贫血的鉴别指标,分析它们的灵敏度、特异度、假阳性率、假阴性率、阳性预测值、阴性预测值、约登指数、阳性似然比、阴性似然比、对应的ROC曲线以及曲线下面积。结果在诊断IDA时,MI、S&BI、SI、和EI灵敏度在72.5%-81.88%,但特异度较低,在22.09%-26.74%之间;S&LI特异度为62.79%,但灵敏度仅为9.38%。在诊断β-地中海贫血时结果相反。各红细胞参数运算公式的约登指数和阳性似然比都较低。ROC曲线下面积最高的S&LI仅为0.753。结论上述5个红细胞参数运算公式对IDA和β-TT的鉴别诊断效能不高。

采用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳纯化PCR产物的观察

目的 :观察采用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳纯化目的 PCR产物的效果。方法 :使用不同的 31对引物 ,4 5例标本行 PCR扩增出不同的目的 DNA片段 ,将每一份 PCR产物分为 2份 ,其中 1份直接测序 ,为对照组 ;另 1份则做非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 ,以分离出的目的 DNA片段单链为模板行 2次 PCR,对 2次 PCR产物测序 ,此为实验组。结果 :实验组只有 4例不能被测序仪判读 (4 / 4 5 ) ,而对照组有 2 4例不能被测序仪判读 (2 4 / 4 5 ) ,两组比较 ,差异有统计学意义 (P <0 .0 1 )结论 :根据单链DNA片段形成构象的不同来纯化

多重二次PCR在微量DNA标本检验中的应用

目的 :探讨用多重二次 PCR扩增极微量 DNA标本供后续 SSCP和 DNA测序分析。方法 :对照组取微量组织提取的DNA为模板 ,分别用不同的 4对引物各自行 PCR,同一 PCR反应体系里加入 4对引物扩增。然后将此扩增产物稀释 10 0 0倍为模板 ,再以相同引物进行第二次 PCR。实验组 :取微量组织提取的 DNA为模板 ,以与对照组相同的 4对引物各自进行 PCR。用琼脂糖凝胶电泳检测 PCR结果 ,用 DNA测序方法检测二次 PCR扩增产物的特异性。结果 :微量的 DNA标本可同时被多对引物二次扩增。实验组与对照组比较 ,各自引物扩增的 DNA片段在琼脂糖凝胶电泳显示区带速率相同 ,测序显示碱基序列相同。结论 :因极微量的 DNA模板不能满足多引物多次 PCR时 ,可用多重二次 PCR扩增 ,本方法在法医学。

小儿呼吸道感染病毒病原学研究

为了解近年来南宁地区小儿呼吸道感染病毒的流行趋势，采用桥联酶标法（Ａ－ＰＡＡＰ），对２６５例急性呼吸道感染患儿的鼻咽分泌物进行呼吸道６种常见病毒检测，同时采用ＥＬＩＳＡ法检测轮状病毒抗原。检测结果显示：阳性６１例，检出率为２３．０１％，其中合胞病毒３．０１％，腺病毒３．４％，流感Ａ５．６６％，流感Ｂ１．８９％，副流感Ⅰ、Ⅲ１．８９％，副流感Ⅱ３．０２％，轮状病毒４．１５％。６１例阳性患儿中，有１３例为混合感染（２１．１３％）。在各年龄组及各疾病组，病毒检出率无显著性差异，提示病毒仍是近年来本地区小儿急性呼吸道感染的一个重要病原。