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基于CRISPR/Cas9技术构建SLC19A2基因敲除小鼠及其表型验证
1
作者
钱晨
向利群
+4 位作者
覃媛媛
闫婕
赵安然
叶玉萍
林发全
《中国医药导报》
CAS
2024年第22期1-5,21,共6页
目的利用CRISPR/Cas9技术构建SLC19A2基因敲除的纯合子小鼠模型,并验证其表型。方法设计gRNA载体,将构建好的gRNA载体和Cas9载体进行体外转录后共注射到受精卵,经胚胎移植后获得6只(雌性3只、雄性3只)阳性F0代小鼠。通过繁育获得12只(雄...
目的利用CRISPR/Cas9技术构建SLC19A2基因敲除的纯合子小鼠模型,并验证其表型。方法设计gRNA载体,将构建好的gRNA载体和Cas9载体进行体外转录后共注射到受精卵,经胚胎移植后获得6只(雌性3只、雄性3只)阳性F0代小鼠。通过繁育获得12只(雄性6只、雌性6只)SLC19A2基因敲除纯合子小鼠[SLC19A2-/-小鼠(C57BL/6)]。8周龄野生型C57BL/6小鼠和SLC19A2-/-小鼠各12只(雄性6只、雌性6只),分别设为野生型组与基因敲除纯合子组。采用PCR扩增凝胶电泳法鉴定小鼠基因型;采用实时荧光定量PCR检测胰腺组织和肝脏组织中SLC19A2 mRNA表达,采用蛋白质印迹法检测胰腺组织和肝脏组织中THTR-1蛋白表达。结果PCR扩增凝胶电泳法成功鉴定出SLC19A2-/-小鼠。基因敲除纯合子组胰腺组织和肝脏组织中SLC19A2 mRNA及THTR-1蛋白表达水平低于野生型组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论基于CRISPR/Cas9技术成功构建了SLC19A2基因敲除小鼠。
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关键词
SLC19A2
基因敲除
CRISPR/Cas9
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职称材料
题名
基于CRISPR/Cas9技术构建SLC19A2基因敲除小鼠及其表型验证
1
作者
钱晨
向利群
覃媛媛
闫婕
赵安然
叶玉萍
林发全
机构
广西医科大学第一附属医院检验科、广西高校临床检验诊断学重点实验室
出处
《中国医药导报》
CAS
2024年第22期1-5,21,共6页
基金
国家自然科学基金资助项目(82060170)
广西自然科学基金项目(2020GXNSFAA297264)。
文摘
目的利用CRISPR/Cas9技术构建SLC19A2基因敲除的纯合子小鼠模型,并验证其表型。方法设计gRNA载体,将构建好的gRNA载体和Cas9载体进行体外转录后共注射到受精卵,经胚胎移植后获得6只(雌性3只、雄性3只)阳性F0代小鼠。通过繁育获得12只(雄性6只、雌性6只)SLC19A2基因敲除纯合子小鼠[SLC19A2-/-小鼠(C57BL/6)]。8周龄野生型C57BL/6小鼠和SLC19A2-/-小鼠各12只(雄性6只、雌性6只),分别设为野生型组与基因敲除纯合子组。采用PCR扩增凝胶电泳法鉴定小鼠基因型;采用实时荧光定量PCR检测胰腺组织和肝脏组织中SLC19A2 mRNA表达,采用蛋白质印迹法检测胰腺组织和肝脏组织中THTR-1蛋白表达。结果PCR扩增凝胶电泳法成功鉴定出SLC19A2-/-小鼠。基因敲除纯合子组胰腺组织和肝脏组织中SLC19A2 mRNA及THTR-1蛋白表达水平低于野生型组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论基于CRISPR/Cas9技术成功构建了SLC19A2基因敲除小鼠。
关键词
SLC19A2
基因敲除
CRISPR/Cas9
Keywords
SLC19A2
Knockout
CRISPR/Cas9
分类号
R338 [医药卫生—人体生理学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
基于CRISPR/Cas9技术构建SLC19A2基因敲除小鼠及其表型验证
钱晨
向利群
覃媛媛
闫婕
赵安然
叶玉萍
林发全
《中国医药导报》
CAS
2024
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