RASA4表达失活促进鼻咽癌增殖的机制研究

目的:探究RASA4基因在鼻咽癌(NPC)中的表达情况,研究RASA4基因对影响NPC增殖和转移的影响及分子机制。方法:利用GEO数据库进行NPC中RASA4转录水平的Meta分析。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和western blotting法检测NPC细胞中RASA4 mRNA及蛋白表达水平,免疫组织化学染色法检测RASA4在NPC组织中的蛋白表达及定位情况,CCK-8及平板克隆实验评估RASA4对NPC细胞增殖能力的影响。结果:基于GEO数据的生物信息学分析显示,RASA4在NPC中的m RNA表达显著下调。RT-qPCR和western blotting显示NPC细胞中RASA4 mRNA及蛋白表达下调。外源性过表达RASA4基因可抑制NPC细胞增殖。结论:RASA4可能是NPC潜在的抑制基因,研究其失活机制及其功能对于NPC的发生机制和治疗具有重要意义。

海带多糖对人鼻咽癌HONE1细胞裸鼠移植瘤的抑制及凋亡相关基因的调控

目的:观察海带多糖(laminaria japonica polysaccharides,LJP)对人鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)HONE1细胞移植瘤生长抑制及凋亡相关基因调控效应,探讨其抗癌机制。方法:以人NPC细胞株HONE1建立裸鼠皮下移植瘤模型及LJP行体内抑瘤实验,并以RT-PCR检测移植瘤Bax,Bcl-2,Caspase-3,8,9mRNA表达。结果:LJP中、高剂量组抑瘤率分别为33.7%和47.0%,具有明显抑瘤作用;RT-PCR检测结果显示,Bax mRNA表达随着LJP浓度的增加而增高(P<0.05);Bcl-2mRNA表达随着LJP浓度增加而降低(P<0.05)。Caspase-3mRNA表达随着LJP浓度增加而增高(P<0.05);LJP组Caspase-8,9mRNA表达无差异,且Caspase-9mRNA表达均低于顺铂(cisplatin,DDP)组。结论:LJP具有抑制NPCHONE1细胞生长的作用,其机制是促进癌细胞凋亡而实现的。

大剂量^(60)Co放疗后内耳形态学改变及Caspase3的表达

目的:探讨一次性大剂量60Co放疗后内耳的损伤及Caspase3的表达。方法:白化豚鼠55只,随机分为对照组和放疗组,对照组5只(10耳)为未进行放疗的正常豚鼠,放疗组50只,右耳为照射耳,于放疗后1、4、7、14、30d处死(每个时间点10只)。做耳蜗中轴切片HE染色及Caspase3免疫组织化学染色。在每个时间点分别取2只耳蜗做基底膜的扫描电镜。结果:放疗可引起内耳损伤,放疗组不同时间点螺旋神经节细胞Caspase3的光密度值与对照组比较差异均有显著性(P<0.01),放疗后第4、7天Corti器中Caspase3的光密度值与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。放疗后第14、30天血管纹中的Caspase3的光密度值与对照耳比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:放疗可引起内耳的损伤,Caspase3在内耳的表达上调可能与细胞损伤有关。

海带多糖对人鼻咽癌细胞及其裸鼠移植瘤的抑制作用

目的:通过观察海带多糖(laminaria japonica polysaccharides,LJP)在体内外对人鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)细胞的抑制作用,探讨其可能的抗癌机制。方法:应用MTT法检测LJP对人NPC细胞株(HONE1和CNE2)增殖的抑制作用;运用PI加Annexin V双染法检测LJP对HONE1细胞凋亡的影响;以人NPC细胞株HONE1建立裸鼠皮下移植瘤模型及行体内抑瘤实验,并在透射电镜(transmission electron microscopy,TEM)下观察移植瘤细胞超微结构。结果:MTT显示LJP对人NPC细胞(HONE1和CNE2)的增殖有抑制作用,且具有剂量相关性,320 mg/L的LJP作用72h的抑制率分别为58.27%(P<0.01)和55.00%(P<0.01);流式细胞仪检测结果显示,LJP具有诱导HONE1细胞凋亡的作用,凋亡率随着LJP浓度的增加而增高,320mg/L的凋亡率为(49.51±1.89)%(P<0.01)。体内实验中,LJP中、高剂量组抑瘤率分别为33.7%(P<0.05)和47.0%(P<0.01),具有明显抑制移植瘤的作用,而低剂量组的抑瘤率仅为16.4%(P>0.05)。TEM结果提示癌细胞呈现凋亡特征的改变。结论:LJP具有抑制NPC细胞生长的作用,机制可能是通过诱导癌细胞凋亡而实现的。

大剂量放疗后豚鼠内耳螺旋神经节细胞Caspase3的表达

目的:探讨一次性大剂量放射治疗(放疗)后豚鼠内耳螺旋神经节细胞(SGC)的损伤情况。方法:白化豚鼠40只随机分为5组,每组8只,右耳为放疗组,左耳为对照组。豚鼠右耳颞部做一次性60Co照射70Gy。分别于放疗后1、4、7、14和30d处死,行耳蜗中轴切片HE染色及免疫组织化学染色。结果:HE染色显示放疗组的SGC在放疗后不同时间点均出现萎缩,放疗后各不同时间点螺旋神经节细胞萎缩率与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。放疗组SGC的Caspase3的阳性表达比对照组增强,放疗后不同时间点SGC的Caspase3光密度值与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论:放疗可引起内耳SGC的损伤,Caspase3在SGC的表达上调可能与细胞损伤有关。

鼻内镜下真菌性上颌窦炎的术式选择及疗效评估

目的鼻内镜下采用3种不同入路手术治疗真菌性上颌窦炎并对其临床疗效进行观察,为临床个体化治疗真菌性上颌窦炎提供参考。方法以该院2016年1月-2017年12月收治的84例非侵袭性真菌性上颌窦炎的手术患者作为研究对象,术前常规行鼻内镜检查和鼻窦CT检查,根据病变的部位范围选择手术方式,将患者分为3组:A组30例,行鼻腔外侧壁保留黏膜瓣的下鼻道入路;B组20例,行上颌窦自然口入路手术;C组34例,行联合入路手术。结果 84例患者均治愈,血涕、面部胀痛、头痛或鼻腔异味症状逐步消失,鼻内镜复查见术腔愈合好,上皮化良好,各鼻道无异常分泌物,术腔病变无残留,无鼻腔粘连、前鼻孔狭窄、鼻泪管损伤或其他并发症。术后6个月复查鼻窦CT无病变残留,下鼻道黏膜瓣愈合良好。结论术前根据病变部位及范围选择手术方式个体化治疗真菌性上颌窦炎,能充分暴露上颌窦窦腔,有效清除病变,避免损伤鼻腔鼻窦的正常结构,达到既微创又能彻底清除病灶的目的。

水杨酸钠抑制大鼠螺旋神经节神经元电压门控钾通道的研究

目的研究水杨酸钠对大鼠螺旋神经节神经元电压门控钾通道电流(Ik)的影响。方法采用全细胞膜片钳技术分析水杨酸钠对急性分离大鼠SGN电压门控钾通道电流的影响。结果水杨酸钠抑制电压门控钾通道电流幅值,其抑制强度与水杨酸钠浓度呈正相关,1mmol/L水杨酸钠可导致Ik激活曲线向超级化方向移动10.5885mV。结论水杨酸钠对大鼠SGN电压门控钾通道电流具有抑制作用,使其电流峰值减低、激活曲线向超级化方向移动。

鼻咽癌的流行病学进展

鼻咽癌(NPC)具有显著的地理学分布特征,其病因学广受关注,包括遗传、EB病毒和环境等因素。随着研究深入,NPC病因流行病学特征逐步完善。本文以广东省和广西壮族自治区的人群病例对照研究——NPC基因、环境和EB病毒项目(NPCGEE项目)结果为重点,总结了NPC病因流行病学的最新进展。遗传因素在NPC病因中占重要作用。早期EB病毒感染可能与NPC发生有因果关系,EB病毒高危亚型可能与宿主基因相互作用,共同促进NPC进展。NPCGEE项目为NPC的流行病学提供了新的见解,尤其是环境相关病因学:中式腌鱼致病作用较前减弱,被动吸烟和室内空气污染与NPC发病风险中度正关联,职业性甲醛暴露和吸入性粉尘与NPC发病风险的关联尚不明确,口腔健康和口腔微生物群可能对NPC发病有影响。NPC的病因学特征随着更严谨的研究设计和环境变化日趋完善,但仍需要含足够数量病例的大型研究,并获取详细的暴露数据,以便更深入地了解NPC遗传、EB病毒和环境之间的相互作用。

扁桃体鳞状细胞癌中CK7 CK19和p16的表达关系研究

目的分析细胞角蛋白7(CK7)、细胞角蛋白19(CK19)和p16^(INK4a)蛋白(p16)在扁桃体鳞状细胞癌(TSCC)组织及癌周隐窝上皮和表面上皮中的表达关系,探讨其在人乳头状瘤病毒(HPV)感染相关扁桃体癌变机制中的作用。方法选择2015-07~2018-01广西医科大学第一附属医院耳鼻喉头颈外科收治的17例TSCC患者的病历资料及组织样本。对TSCC组织样本进行连续石蜡切片,采用免疫组化法检测CK7、CK19、p16的表达情况,观察和分析三者的表达强度、定位以及相互关系。结果CK7、CK19、p16阳性染色均定位于胞质。在TSCC组织中,呈斑片或弥漫染色,在TSCC癌周正常上皮中,呈斑片染色。CK7主要表达于上皮表层,CK19主要表达于上皮下层和基底细胞。p16主要表达于上皮的下1/3至全层,与CK19部位基本重叠。对于HPV相关性(p16^(+))TSCC,Kappa一致性分析结果显示,CK7与CK19、CK7与p16以及CK19与p16的检测结果均具有一致性(P<0.05);但对于非HPV相关性TSCC,三个标志物检测结果未显示出显著关联(P>0.05)。对于TSCC癌周隐窝上皮和癌周表面上皮组织,Kappa一致性分析结果显示,CK7与CK19、CK7与p16以及CK19与p16的检测结果均具有一致性(P<0.05)。结论CK7、CK19与p16的表达与HPV相关性(p16^(+))TSCC的发生密切相关,可能存在一种“CK7→CK19→p16轴”作用机制。

鼻咽癌放疗后诱发头颈部恶性肿瘤的治疗

放疗是目前治疗鼻咽癌的主要手段,但放疗后可诱发恶性肿瘤。对其诊断及致病机制、发病年龄及潜伏期、诱发肿瘤的病理类型及好发部位、治疗及预后进行综述。

乙酰半胱氨酸在豚鼠放疗后耳蜗损伤中的防护作用

目的探讨乙酰半胱氨酸（NAC）在豚鼠放疗后耳蜗损伤中的防护作用。方法普通级白化豚鼠72只，随机数字表法分为4组，每组18只，分为正常组、单纯放疗组、放疗生理盐水组及NAC药物组。除正常组外，其余3组豚鼠一侧耳颞部（右耳）做一次性^60Co照射70Gy，放疗生理盐水组及NAC药物组于放疗后3h内经圆窗膜分别给予生理盐水和NAC。放疗后14d处死动物后分别做耳蜗中轴切片半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶（Caspase）3免疫组织化学染色、Tunel染色、基底膜扫描电镜以及耳蜗丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）检测。结果与单纯放疗组比较，NAC药物组：外毛细胞纤毛无明显缺失，螺旋神经节细胞（SGC）的凋亡数减少。NAC药物组耳蜗MDA含量（0．33±0．05）低于单纯放疗组（0．84±0．13）、NAC药物组SOD活力（10．7±3．0）高于单纯放疗组（8．7±1．3），差异均有统计学意义（均P〈0．05）；NAC药物组Caspase3平均光密度值（0．08±0．02）低于单纯放疗组（0．10±0．01），差异有统计学意义（P〈0．01）。NAC药物组SGC凋亡比率（7．8％±1．8％）较单纯放疗组（32．0％±8．7％）低。结论MDA水平的升高与SOD活力下降可能与耳蜗细胞的损伤有关，NAC可保护豚鼠因放疗引起的耳蜗细胞损伤。