C-反应蛋白诱导人肾小管上皮细胞凋亡

目的:探讨与微炎症状态相应的C-反应蛋白(CRP)水平是否诱导肾小管上皮细胞凋亡。方法:以微炎症状态相应的CRP浓度刺激HK-2细胞。采用AnnexinⅤ-FITC、PI染色和流式细胞术检测凋亡细胞的百分率。采用Hoechst 33258染色观察肾小管上皮细胞凋亡的形态学改变。比色法检测细胞caspase-3活性。Real-time PCR检测促凋亡基因bax、抗凋亡基因bcl-2的mRNA表达。结果:CRP呈剂量和时间依赖性地诱导HK-2细胞凋亡,细胞凋亡在CRP浓度为10 mg/L时达高峰,在20 mg/L时则以晚期凋亡和坏死为主。Hoechst 33258细胞核染色显示CRP作用的HK-2细胞呈现染色质浓缩、碎裂或染色质边集等细胞凋亡的特点。CRP增高细胞caspase-3的酶活性、上调促凋亡基因bax的表达和下调抗凋亡基因bcl-2的表达。结论:CRP轻度增高可诱导肾小管上皮细胞凋亡。

高水平血清铁蛋白对血液透析患者促红细胞生成素反应性的影响

目的：探讨维持性血液透析（MHD）患者在肾性贫血的治疗中高水平血清铁蛋白（SF）对促红细胞生成素（EPO）反应性的影响.方法：纳入31例已接受重组人EPO和蔗糖铁治疗的MHD伴肾性贫血患者,按SF水平分100 μg/L＜SF＜500 μg/L组（A组）和500 μg/L≤SF＜1 200 μg/L组（B组）.两组均通过调整重组人EPO剂量以使血红蛋白达到最佳水平（110～120 g/L）为目标再治疗12周.以血红蛋白升高值、每周EPO用量、促红素抵抗指数（ERI）评估不同SF水平对EPO生成素反应性的影响.结果：两组基线血红蛋白、每周EPO用量和ERI差异均无统计学意义（均P＞0.05）,治疗12周后B组血红蛋白升高值较高,终末每周EPO用量较少、终末ERI较低,与A组比较差异均有统计学意义（均P ＜0.05）.所有患者终末SF与终末EPO和终末ERI均呈负相关关系（r=-0.366,P＜0.05;r=-0.394,P＜0.05）.结论：静脉补充铁剂维持SF在500～1 200 μg/L较维持在100～500 μg/L可进一步改善MHD患者EPO反应性,减少EPO的需要量.

C反应蛋白诱导肾小管上皮细胞TGFβ1表达的受体途径

目的观察C反应蛋白（CRP）对肾小管上皮细胞Fcγ受体表达的影响，并探讨Fcγ受体在CRP诱导转化生长因子β1（TGFβ1）表达中的作用。方法以CRP干预人肾小管上皮细胞株（HK-2细胞），实时定量PCR检测FcγRI（CD64）、FcγRIIa（CD32a）、FcγRⅢ（CDl6）3种Fcγ受体mRNA表达。根据实验结果，采用流式细胞术和Western印迹法检测CD32a蛋白的表达。以抗CD32a抗体封闭CD32a受体，实时定量PCR检测TGFβ1mRNA表达，酶联免疫吸附试验（ELISA）检测TGFβ1蛋白和I型胶原蛋白、Ⅳ型胶原蛋白的分泌水平。结果HK-2细胞无CD64和CDl6mRNA表达，有CD32amRNA表达。CD32amRNA表达呈剂量依赖性增高（P〈0．01），CRP10mg／L刺激达到高峰。流式细胞术示CRP10mg／L刺激HK-2细胞24hCD32a平均表达量为23．35％±7．43％，未刺激组为1．66％±0．28％，差异有统计学意义（P〈0．01）。Western印迹显示CRP以剂量依赖方式上调CD32a表达，CRP10mg／L显著性上调CD32a表达（P〈0．01）。抗CD32a抗体封闭CD32a受体后，CRP作用减弱，TGFIMmRNA表达下调（P〈0．01），TGFβ1、I型胶原蛋白、Ⅳ型胶原蛋白的分泌下降（均P〈0．05）。结论CRP刺激可上调肾小管上皮细胞表面的CD32a受体的表达，CRP通过肾小管上皮细胞CD32a受体介导促纤维化因子TGFβ1表达上调。