眼镜蛇神经毒素分离纯化及其经大鼠直肠给药吸收的实验研究

目的利用色谱技术从眼镜蛇粗毒中分离纯化神经毒素,探索神经毒素经大鼠直肠途径给药后的吸收情况和镇痛活性。方法通过CM Sepharose Fast Flow阳离子交换色谱和Sephadex G-50凝胶过滤色谱两步法分离纯化神经毒素。采用免疫组织化学技术观察神经毒素在大鼠直肠组织中的分布。利用Shotgun质谱技术和数据库检测大鼠血浆神经毒素片段。利用HE染色观察神经毒素对大鼠直肠组织结构的影响。利用醋酸扭体法测定神经毒素直肠给药后镇痛活性。结果通过色谱分离纯化得到电泳纯的神经毒素。神经毒素直肠给药3 h后直肠黏膜组织内神经毒素分布明显,阳性面积比率、平均光密度值、H-SCORE值与对照组相比差异明显(P<0.01)。质谱检测到大鼠血浆中神经毒素有关片段。HE染色表明神经毒素对大鼠直肠组织没有损伤,组织结构无明显病理变化。醋酸扭体法测定小鼠直肠给药神经毒素3 h后扭体抑制率达50%,提示具有镇痛活性。结论眼镜蛇神经毒素可以通过直肠吸收入血并且发挥镇痛作用,为后续研究眼镜蛇神经毒素直肠给药制剂提供实验依据。

2010—2020年广西某三甲医院恶性肿瘤住院死亡病例分析

目的分析广西某三甲医院恶性肿瘤住院死亡病例的分布特征及死因构成情况,为医院管理和学科建设提供参考。方法基于广西医科大学附属肿瘤医院2010年1月1日—2020年12月31日期间收集的1834例恶性肿瘤住院死亡病例的相关临床信息数据,对恶性肿瘤住院患者的病死率趋势、性别及年龄分布、死因顺位等情况进行分析。结果恶性肿瘤住院患者的病死率呈下降趋势,男性病死率高于女性(χ^(2)=141.487,P<0.001),不同年龄组恶性肿瘤住院患者病死率差异有统计学意义(χ^(2)=389.637,P<0.001),且随年龄的增加而升高。死因顺位前10位依次为肺癌、肝癌、结直肠癌、乳腺癌、胃癌、淋巴瘤、食管癌、鼻咽癌、卵巢癌、胰腺癌。结论医院恶性肿瘤住院患者的病死率逐步下降,其中肺癌、肝癌是主要死亡病种。医院可进一步优化医疗资源配置和加强相关学科建设,以持续提升医疗质量,降低肿瘤病死率。

肿瘤抗原致敏树突状细胞诱导机体产生抗肿瘤作用的实验研究

目的:探讨肿瘤抗原冲击致敏的树突状细胞(DC)诱导机体产生的特异性抗肿瘤作用。方法:体外培养的小鼠骨髓树突状细胞用小鼠结肠腺癌细胞株CT 26细胞抗原冲击致敏;混合淋巴细胞反应检测肿瘤抗原致敏DC刺激同基因型T淋巴细胞增殖的能力;观察小鼠经皮下免疫肿瘤抗原致敏DC后诱导产生肿瘤特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)和抵抗CT 26细胞再攻击的能力。结果:肿瘤抗原致敏DC能有效刺激同基因型T淋巴细胞增殖反应;小鼠经肿瘤抗原致敏DC免疫后可诱导强烈的CTL杀瘤活性,产生免疫保护作用,能有效抵抗CT 26细胞再攻击,肿瘤生长明显减缓,与未经抗原致敏DC免疫的小鼠组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:肿瘤抗原致敏的DC能有效诱导机体产生特异性的抗肿瘤作用。

医院公共实验平台管理与研究生培训经验总结

医院公共实验平台是医院科研工作的重要组成部分，也是医学研究生科研能力培养的重要支撑力量。本文以广西医科大学附属肿瘤医院公共实验平台的运行经验，探讨在医院公共平台的管理及研究生培训存在的问题和解决方法。

人参皂苷调控非编码RNA抗肿瘤的研究进展

人参皂苷(Ginsenoside)是人参中主要的活性成分之一,具有广泛的药理作用,包括抗炎、抗肿瘤及增强免疫力等。非编码RNA (non-codingRNAs,ncRNAs)是肿瘤发生、发展过程中的重要调节因子。近年来,大量研究证实人参皂苷作为非编码RNA的调控因子,能通过多个生物学过程影响肿瘤细胞恶性表型发挥抗肿瘤作用。本文围绕人参皂苷调控非编码RNA发挥抗肿瘤作用的研究进展进行综述。

纳米气体制剂的构建及治疗恶性肿瘤的研究进展

纳米气体制剂是将气体或其前体药物与纳米载体相结合,实现气体的肿瘤靶向递送。当纳米气体制剂到达恶性肿瘤区域后,借助刺激源实现气体分子的可控释放,对恶性肿瘤具有治疗作用。纳米气体制剂构建有提高分子负载量、提高分子释放可控性、提高化学催化反应效率等多种形式,基于气体疗法联合一氧化氮、一氧化碳、硫化氢、氢气、二氧化硫的纳米气体制剂的肿瘤治疗策略与其他治疗策略相结合,可最大程度增强恶性肿瘤的治疗效果并减少治疗过程中产生的不良反应。

DMDD与索拉非尼联合应用协同抑制肝癌细胞恶性生物学行为的实验研究

目的:探讨中药杨桃根提取物DMDD单体(2-dodecyl-6-methoxycyclohexa-2,5-diene-1,4-dione)与索拉非尼联合应用对人肝癌Huh7细胞恶性生物学行为的影响及可能的机制。方法:实验分4组:Huh7细胞对照组、DMDD组、索拉非尼组及DMDD与索拉非尼联合应用组(简称联合应用组)。CCK-8法检测Huh7细胞活力,以金氏公式判定协同效应;平板克隆实验检测Huh7细胞的集落形成能力;划痕实验、Transwell迁移实验和侵袭实验检测Huh7细胞的迁移能力和侵袭能力;流式细胞术检测Huh7细胞周期;RT-qPCR和Western blot检测丝氨酸合成通路中的PHGDH mRNA转录水平和蛋白表达水平。结果:平板克隆实验、划痕实验和Transwell迁移实验结果显示,与Huh7细胞对照组、DMDD组、索拉非尼组比较,DMDD和索拉非尼联合应用组对Huh7细胞增殖、迁移和侵袭能力的抑制作用显著增强(均P<0.05),经金氏公式计算,2、4、8μmol/L DMDD分别联合1、2、4μmol/L索拉非尼具有协同作用(Q>1.15),6、10μmol/L DMDD分别联合3、5μmol/L索拉非尼具有相加作用(0.85<Q<1.15);流式细胞周期检测显示,各组药物干预48 h后,对照组、DMDD组、索拉非尼组及联合应用组G2/M期细胞比例分别为(10.63±0.32)%、(35.77±1.22)%、(30.03±2.22)%、(38.97±0.60)%。与对照组比较,3个组的G2/M期细胞比例均显著上升(均P<0.0001),与索拉非尼组比较,联合应用组G2/M期细胞比例显著上升(P<0.0001)。RT-qPCR和Western blot结果显示,DMDD与索拉非尼联合应用可显著抑制PHGDH的mRNA转录水平和蛋白表达水平(P<0.05)。结论:DMDD与索拉非尼联合应用具有协同增效作用,可协同抑制Huh7细胞的增殖、侵袭和迁移能力,其机制与协同抑制丝氨酸合成通路中的PHGDH的基因转录和蛋白表达有关。

广西地区6家医院结肠镜下结直肠癌检出率的分析研究

目的分析广西地区6家医院结肠镜下结直肠癌的检出率情况。方法收集2019年6月至2021年6月在广西5个地区6家三甲医院行结肠镜检查者的资料,根据不同年份、性别、年龄和医院进行分层,分别计算结肠镜下结直肠癌的检出率。结果共收集61786例行结肠镜检查者的资料,结直肠癌的总检出率为2.81%。与2019年、2021年相比,2020年结直肠癌的检出率最高(P<0.05);男性的结直肠癌检出率显著高于女性(P<0.05);不同年龄段结直肠癌检出率差异有统计学意义(P<0.05);北海市人民医院的结直肠癌检出率高于其他5家医院(P<0.05)。男性的结肠癌检出率、直肠癌检出率均高于女性(均P<0.05),北海市人民医院结肠癌检出率、直肠癌检出率均高于其他医院(均P<0.05);男性和女性结肠癌检出率均高于直肠癌检出率,30~79岁人群结肠癌检出率高于直肠癌检出率(均P<0.05)。结论广西地区结肠镜下结直肠癌的检出率为2.81%,不同年份、性别、年龄、医院之间结直肠癌的检出率存在差异,结肠癌检出率总体高于直肠癌。

某三甲医院胃癌患者住院费用结构及影响因素分析

胃癌是我国常见的恶性肿瘤之一,随着人口老龄化、生活方式改变等因素影响,我国胃癌的发病率及死亡率也在不断上升。本文通过分析广西某三甲医院2017—2022年胃癌患者医疗费用的构成特点以及影响住院总费用的主要因素,结果表明医疗服务资源分配仍需要进一步优化,费用的内部构成流向还需引导。应继续进一步规范和加强医院诊疗过程监管,在保证医疗质量的同时,提高医疗服务效率从而有效降低胃癌患者住院总费用。

肝癌树突状细胞瘤苗诱导抗肿瘤作用的研究

目的:研究负载肝癌抗原的肝癌树突状细胞(dendritic cell,DC)瘤苗诱导的抗肿瘤作用。方法:于体外用rhGM-CSF和rhIL-4从肝癌患者外周血诱导DC,并用肝癌细胞抗原冲击致敏,制成负载肝癌抗原的肝癌DC瘤苗。肝癌DC瘤苗活化自体T淋巴细胞分化为细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic of T-lymphocytes,CTL),采用流式细胞术检测CTL分型;乳酸脱氢酸(LDH)4 h释放法检测CTL对肝癌细胞的特异性杀伤作用。MTT法检测肝癌DC瘤苗及其活化CTL培养上清对肿瘤细胞的抑制作用;ELISA法检测肝癌DC瘤苗活化的CTL培养上清中IL-12、IFN-γ和TNF-α水平。结果:经肝癌DC瘤苗活化后的T淋巴细胞群中,CD56+细胞数量显著减少,CD4+T和CD8+T细胞数量增加,其中以CD8+T细胞增加较明显;细胞毒实验显示,该CTL对自体肝癌细胞具有较强的杀伤作用,而对与致敏DC的肝癌抗原无关的CT26结肠腺癌细胞无明显杀伤作用;单纯肝癌DC瘤苗或其激活的CTL培养上清也表现出较强的抑瘤作用,而且这种抑瘤作用具有广谱性,可抑制多种肿瘤细胞的生长;在CTL培养上清中可检测到IL-12、TNF-α和IFN-γ的含量。结论:肝癌DC瘤苗不仅诱导了对肝癌细胞的特异性CTL杀伤作用,而且可激活CD4+T和CD8+T细胞分泌IL-12、TNF-α和IFN-γ等细胞因子,以非杀伤方式直接或间接地抑制肿瘤细胞生长,发挥非特异性的抗肿瘤作用。

TNF-α基因多态性与广西肝癌家族聚集性的相关性研究

目的研究肿瘤坏死因子基因TNF-α-308、TNF-α-238与广西肝癌家族聚集性的关系。方法在广西肝癌高发区选取12个肝癌高发家族(124例)及与之相对应的12个非肿瘤对照家族(129例)为研究对象,采用SNP芯片技术检测两组中TNF-α-308、TNF-α-238的基因型及等位基因频率。结果肝癌高发家族组TNF-α-308G/A基因型分布频率高于对照家族组,差异有统计学意义(22.6%vs11.6%,χ2=5.376,P=0.020);肝癌高发家族组TNF-α-308A等位基因分布频率亦高于对照家族组,差异有统计学意义(11.3%vs5.8%,χ2=4.877,P=0.024)。两组TNF-α-238基因型频率及等位基因频率差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 TNF-α-308基因多态性可能与广西肝癌家族聚集性相关,携带TNF-α-308A等位基因可能会增加肝癌高发家族成员患肝癌的风险;TNF-α-238基因多态性与广西肝癌家族聚集无统计学关联。

广西壮族人群microRNA-146a基因多态性与肝癌遗传易感性的相关性研究

目的探讨广西壮族人群microRNA-146a基因rs2910164位点多态性与肝癌遗传易感性的关系。方法应用病例-对照研究方法,分别选择广西肝癌高发区壮族肝癌患者110例以及健康对照者110名,采用基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱技术(MALDI-TOF-MS)对microRNA-146a基因rs2910164位点进行SNP分型,以χ2检验比较microRNA-146a基因rs2910164位点基因型在病例组与对照组之间的分布差异,采用非条件Logistic回归分析其多态基因型与肝癌发生危险性的关系。结果病例组中microRNA-146a基因rs2910164位点的CG基因型分布频率高于对照组,差异有统计学意义(P=0.026)。Logistic回归分析结果显示,携带CG基因型者患肝癌风险增高(OR=3.473,95%CI:1.116～10.802,P=0.032),GG基因型在两组间分布频率的差异无统计学意义(P>0.05)。其等位基因C和G在病例组中的分布频率分别为62.7%和37.3%,在对照组中的分布频率分别为67.7%和32.3%,等位基因C或G在两组间分布频率的差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 microRNA-146a基因rs2910164位点的CG基因型携带者的肝癌发病风险显著增加,其CG基因型可能是广西壮族人群肝癌发病的遗传易感因素之一。

2014年广西肿瘤登记地区肺癌发病和死亡情况分析

目的:分析2014年广西肿瘤登记地区肺癌发病与死亡情况。方法:根据2017年广西肿瘤登记中心收集的广西肿瘤登记地区恶性肿瘤登记资料,按照全国肿瘤登记中心制定的对以人群为基础的肿瘤登记数据的审核方法和评价标准,对广西肿瘤登记地区上报的2014年肿瘤登记数据进行评估,有9个登记处的数据符合标准。将入选登记处的肿瘤发病、死亡数据和人口数据进行汇总,按地区、性别、年龄分层计算肺癌发病率和病死率,评估广西肺癌发病和死亡情况。结果:2014年广西肿瘤登记地区新发肺癌病例3 158例,发病率为45.54/10万,中标率为35.55/10万,世标率为35.45/10万;肺癌死亡病例2 524例,病死率为36.40/10万,中标率为27.68/10万,世标率为27.62/10万。全区男性发病率和病死率均明显高于女性(P<0.05),而城市、农村间比较差异不明显(P>0.05)。结论:广西肿瘤登记地区肺癌的发病和死亡与全国平均水平接近,中老年人群,尤其男性人群是广西肿瘤登记地区肺癌发病和死亡的高危人群,为重点开展肿瘤防治工作的对象。

电化学治疗后培养液pH的改变对宫颈癌细胞生长抑制的实验研究

目的:探讨电化学治疗后培养液pH改变对宫颈癌细胞(Hela细胞)的生长抑制作用。方法:在体外实验的条件下,用不同电化学治疗剂量和不同浓度的碱、酸培养液在不同时间范围内处理Hela细胞并分别采用精密pH试纸和酸度计测试法,MTT法以及细胞培养直接爬片,HE染色和光镜观察方法观察电化学治疗后不同电极处pH值改变,不同pH值培养液对Hela细胞生长抑制作用以及不同剂量电化学治疗及不同pH值培养液对Hela细胞形态学影响。结果:①各电化学剂量处理后阴、阳极处pH值与空白对照相比较,差异均有统计学意义(P<0.05～0.01)。阴极呈碱性;阳极呈酸性。②不同浓度酸性培养液不同作用时间对Hela细胞生长抑制率之间比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。24、48 h,各浓度碱性培养液对Hela细胞的生长抑制率间比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。③不同时段各电化学剂量对Hela细胞生长抑制率均高于其对应酸碱培养液的生长抑制率,差异均有统计学意义(P<0.01)。④HE染色显示,碱性对Hela细胞形态学破坏强于酸性。结论:电化学治疗时导致细胞生存环境的pH改变从而抑制Hela细胞生长。

广西乙型肝炎病毒基因型及基因亚型流行病学分布研究

目的:研究广西乙型肝炎病毒(HBV)基因型及基因亚型的流行病学分布特征,为广西乙肝防治提供理论依据。方法:采用巢式PCR的方法扩增广西东、南、西、北、中5个地区的乙肝病毒感染者血清HBV DNA S区,用直接测序法获取S区序列进行基因分型,构建系统进化树确定基因亚型。结果:379例标本中,C基因型占54.35%(206/379),B基因型占43.54%(165/379),G基因型占2.11%(8/379),未检测到其他基因型。各基因型在不同地区、年龄组分布差异有统计学意义(P=0.00、P=0.009),在性别上的分布差异无统计学意义(P=0.152)。B基因型中有160例成功分型,其中B2亚型占96.25%(154/160),B4亚型占3.75%(6/160),B基因亚型在不同地区、年龄组及性别上的差异均无统计学意义(P=0.07、P=0,67、P=0.41)。C基因型中有204例成功分型,其中C1亚型占72.06%(147/204),C5亚型占25.49%(52/204),C2亚型占2.45%(5/204),C基因亚型在不同地区的分布差异有统计学意义(P=0.00),而在不同年龄组及性别上的分布差异无统计学意义(P=0.23、P=0.49)。结论:广西HBV基因型以C型为主,其次为B型,桂北、桂西地区以及40岁以下、60岁以上人群以B基因型为优势基因型,桂东、桂南、桂中以及40岁至59岁人群则以C基因型为优势基因型;基因亚型以B2、C1亚型为主。B2亚型主要分布在桂北,C1亚型主要分布在桂南。

2014年广西肿瘤登记地区结直肠肛门癌发病和死亡分析

目的分析2014年广西结直肠肛门癌发病和死亡情况。方法按照全国肿瘤登记中心制定的审核方法和评价标准评估广西肿瘤登记地区上报的2014年肿瘤登记数据,将9个入选的肿瘤登记地区的肿瘤发病、死亡和人口数据进行汇总,按地区(城乡)、性别、年龄别分层,计算结直肠肛门癌的发病率、死亡率、构成比和截缩率等。人口标准化率根据2000年全国人口普查结构和Segis′s世界人口结构。结果 2014年广西纳入分析的9个肿瘤登记地区结直肠肛门癌新发病例为1 716例(其中男性1 039例,女性677例),发病率为24.74/10万,中标率为19.68/10万,世标率为19.37/10万,男性发病率高于女性(28.73%vs 20.40%,χ~2=48.433,P<0.001);城市地区发病率为36.19/10万,中标率为27.45/10万;农村地区发病率为19.24/10万,中标率为16.07/10万。结直肠肛门癌死亡病例827例(其中男性518例,女性309例),死亡率为11.93/10万,中标率为9.06/10万,世标率为9.00/10万,男性死亡率高于女性(14.32%vs 9.31%,χ~2=36.400,P<0.001);城市地区死亡率为17.63/10万,中标率为13.21/10万;农村地区死亡率为9.18/10万,中标率为7.13/10万。结论广西肿瘤登记地区结直肠肛门癌发病和死亡例数男性均高于女性,城市地区高于农村地区,45岁以上的中老年人群尤其是城市地区男性人群是重点开展肿瘤防治工作的对象。

CDC25A与肿瘤的研究进展

细胞分裂周期因子25A(CDC25A)作为CDC25家族中的重要成员,具有双特异性磷酸酶活性,可以催化激活细胞周期依赖性蛋白激酶(CDK),在细胞周期各期转换及有丝分裂过程中起重要作用,是细胞周期的重要调控因子。CDC25A的编码基因定位于染色体3p21上,具有癌基因功能,编码酪氨酸磷酸酶,过量的CDC25A可导致细胞生长失控从而引起细胞恶性转化及肿瘤生长。目前在多种恶性肿瘤中观察到CDC25A呈高表达状态,并与患者不良预后密切相关。近年的研究还发现CDC25A在细胞凋亡、细胞代谢、肿瘤细胞转移中发挥着关键作用。CDC25A在肿瘤中过表达的调控机制可归结于转录、转录后和翻译后水平的调控紊乱。肿瘤中异常表达的CDC25A表现出的原癌基因特性,使其逐渐成为抗癌药物研发中一个极具价值的分子靶标。CDC25A抑制剂的运用有望成为肿瘤治疗的有效途径。本文就CDC25A与肿瘤关系的研究进展作一综述。

关于肿瘤学研究生科研能力培养途径的思考

肿瘤学科发展迅速,为适应学科发展研究生必须具备较高的科研能力,尤其是科研创新能力。文章结合广西医科大学附属肿瘤医院实验研究部实际情况,从学术研究氛围、查阅文献、实验技能和科研合作四个方面探讨了肿瘤学研究生科研能力培养的可行途径。

hMIP-1β基因修饰瘤苗体内诱导抗肿瘤免疫效应的研究

目的:探讨人巨噬细胞炎性蛋白-1β(hMIP-1β)基因修饰瘤苗体内诱导的抗肿瘤免疫效应。方法:通过重组腺病毒载体介导将hMIP-1β基因导入CT26细胞中,X-gal染色法检测基因转染效率;ELISA法检测hMIP-1β基因修饰CT26细胞培养上清中hMIP-1β的含量;Boyden趋化小室法检测培养上清对CD4+T细胞、CD8+T细胞、NK细胞及未成熟树突状细胞(imDCs)的趋化作用;制备hMIP-1β基因修饰的CT26细胞瘤苗并免疫BALB/c小鼠,观察其诱导免疫细胞的杀伤活性和保护性免疫反应。结果:腺病毒载体可介导hMIP-1β基因转染CT26细胞和表达(X-gal染色的阳性率>95%),培养上清中hMIP-1β水平为980pg/mL,并对CD4+T细胞、CD8+T细胞、NK细胞及im-DCs有显著的趋化作用,与转染对照基因LacZ的CT26细胞及野生型CT26细胞比较差异均有统计学意义,P<0.01。hMIP-1β基因修饰的CT26细胞瘤苗免疫小鼠能有效诱导肿瘤特异性CTL活性和非特异性NK活性,产生明显的免疫保护作用,可抵抗肿瘤细胞的再攻击,成瘤率降低,肿瘤生长速度减慢,小鼠生存期延长。结论:hMIP-1β基因修饰瘤苗可诱导产生有效的抗肿瘤免疫保护作用,有希望成为预防肿瘤转移与复发的有效手段。

应用飞行时间质谱技术结合蛋白芯片筛选鼻咽低分化鳞癌患者血清肿瘤标志物的研究

目的探讨筛选鼻咽低分化鳞癌血清肿瘤标志物的临床应用价值。方法应用表面增强激光解吸离子化飞行时间质谱(surface enhanced laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,SELDI-TOF-MS)及CM10型弱阳离子交换芯片对61例初治的鼻咽低分化鳞癌患者和72名健康人血清标本进行蛋白质指纹图谱测定,其中80例用于建模(40例鼻咽癌,40名健康人),53例用于盲法检测(21例鼻咽癌,32名健康人),用Biomarker Wizard3.01及Biomarker Pattern5.01分析软件对测得的数据进行处理及建立诊断模型。结果用建立的区分鼻咽低分化鳞癌与健康人的血清蛋白指纹图诊断模型进行盲法检测的准确性、敏感性和特异性分别为86.8%、81.0%和90.6%。其中Ⅰ、Ⅱ期鼻咽低分化鳞癌检出的准确性为73.7%,Ⅲ、Ⅳ期鼻咽低分化鳞癌检出的准确性为81.0%。结论用SELDI-TOF-MS技术与生物信息分析法筛选的血清肿瘤标志物对鼻咽低分化鳞癌的定性诊断提供了一条新途径。