AS-miR-21对鼻咽癌转移潜能及其对Bcl-2调控作用研究

目的探讨AS-miR-21对鼻咽癌转移潜能及其对Bcl-2调控作用机制。方法应用MTT检测鼻咽癌细胞增殖抑制率;Giemsa染色检测鼻咽癌细胞克隆形成;细胞划痕实验检测鼻咽癌细胞迁移能力;半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测Bcl-2 mRNA表达;免疫组化方法和蛋白质印迹法检测Bcl-2蛋白表达水平。结果结果显示,AS-miR-21、miR-21和miR-NC组24hA值分别为0.12±0.01、0.23±0.02和0.22±0.02,F=106.47,P<0.000 1;48hA值分别为0.21±0.02、0.53±0.03和0.52±0.02,F=340.01,P<0.000 1;72hA值分别为0.43±0.03、0.75±0.03和0.66±0.02,F=209.45,P<0.000 1;96hA值分别为0.74±0.02、0.95±0.03和0.93±0.01,F=114.52,P<0.000 1。Giemsa染色结果显示,AS-miR-21组克隆形成率为(0.35±0.02)%,比对照组的(0.65±0.06)%减少46.2%,t=8.215 8,P=0.001 2;miR-21组克隆形成率为(0.82±0.08)%,比对照组的(0.65±0.06)%增加20.7%,t=2.944 5,P=0.042 2。划痕实验结果显示,12h后AS-miR-21组愈合率为(0.207±0.015)%,比对照组的(0.487±0.032)%减少57.49%,F=185.68,P<0.000 1;24h后AS-miR-21组愈合率为(0.471±0.002)%,比对照组的(0.810±0.036)%减少41.85%,F=264.96,P<0.000 1。RT-PCR结果显示,AS-miR-21组Bcl-2 mRNA表达为0.252±0.053,比对照组的1.000±0.095减少74.8%,t=11.909 6,P=0.000 3;miR-21组Bcl-2 mRNA表达为1.837±0.152,比对照组的1.000±0.095增加83.7%,t=8.087 9,P=0.001 3。免疫组化结果显示,AS-miR-21组Bcl-2蛋白表达灰度值为196.2±11.8,比对照组的126.9±7.3减少54.6%,t=15.793 7,P<0.000 1。蛋白质印迹结果显示,AS-miR-21组Bcl-2蛋白表达为0.125±0.073,比对照组的1.000±0.163减少87.5%,t=15.492 7,P<0.000 1;miR-21组Bcl-2蛋白表达为2.018±0.182,比对照组的1.000±0.095增加101.8%,t=13.176 1,P<0.000 1。结论AS-miR-21能抑制鼻咽癌迁移及增殖并促进其凋亡,此外,AS-miR-21通过负调控Bcl-2有可能成为鼻咽癌新靶点之一。