免疫磁珠分选的口腔鳞状细胞癌干细胞诱导分化及成瘤活性研究

目的探讨口腔鳞状细胞癌干细胞的诱导分化及成瘤活性。方法采用免疫磁珠分选法从6例原代培养的口腔鳞状细胞癌细胞中分选出CD133^+、CD44^+细胞,以流式细胞术检测其纯度及细胞周期,并绘制CD133^+细胞生长曲线。将分选出的细胞经诱导向成骨肪细胞及成脂肪细胞分化,将原代鳞癌细胞、分选所得的CD44^+细胞及CD133^+细胞进行体内成瘤实验。结果经免疫磁珠分选法成功获得CD44^+细胞、CD133^+细胞,其纯度经检测均在94%以上,且主要处于G0/G1期。CD133+细胞在接种后第2天进入对数期,细胞倍增时间为3.22 d。经诱导后CD44^+、CD133^+细胞成功分化为成骨细胞及成脂肪细胞。皮下注射后第3天可触及新生肿物,在3种细胞成瘤实验中CD133^+细胞组瘤体体积最大,HE染色显示符合低分化口腔鳞状细胞癌病理表现。结论免疫磁珠分选法可高效获得高纯度的口腔鳞状细胞癌干细胞。CD44^+、CD133^+细胞均具有较强的多向分化能力,CD133^+细胞成瘤性较强。

牵张成骨术对小型猪腭裂模型治疗效果研究

目的:研究牵张成骨(DO)术对腭裂软硬组织缺损的治疗效果、术后瘢痕的影响。方法:建立21只小型猪的腭裂模型,并将其随机分成3个实验组:对照组(A组,n=6)、传统手术组(B组,n=6)以及DO治疗组(C组,n=9)。其中,A组中的小型猪在建立好腭裂模型后不接受任何外科手术整复治疗,B组小型猪行传统腭裂整复术,C组小型猪行DO术修复腭部缺损。术后6个月内每月通过锥形束CT(CBCT)检测3组小型猪术后上颌骨成骨情况并行评估。同时,在C组中,随机选取3只小型猪,分别在术后第2周、第4周以及第8周处死并采用苏木精-伊红(HE)染色及Masson染色观察其腭部缺损区域骨组织及纤维组织形成情况。结果:A组6个月后缺损间隙略微缩小,缺损间隙有絮状胶原纤维呈网状排列;B、C组腭部缺损完全闭合;B组愈合部分胶原纤维直径明显增大;在C组发现有骨组织再生,且没有明显的瘢痕形成,术后8周骨组织与正常骨组织相近且可见丰富且细长的胶原纤维。术后1~6个月上颌骨的宽度和高度3组之间无明显的差异(P>0.05),而术后2个月上颌骨的长度C组明显长于A组和B组(P<0.05)。A、C组组内各时间点间上颌骨长度、宽度以及高度比较,差异均具有统计学意义(P<0.05);而B组上颌骨长度在术后5~6个月无明显差异,上颌骨宽度和高度在术后3~6个月均无明显差异(P>0.05)。结论:DO术对于闭合腭部缺损是有效且成功的,并且有助于促进上颌骨的成骨以及减轻术后瘢痕的形成。