人肺腺癌A549细胞系SP细胞亚群的分选及初步探讨

目的:探讨一种简单有效的分离肺癌干细胞的方法。方法:用免疫组化方法检测人肺腺癌A549细胞系中ABCG2蛋白的表达情况;用流式细胞学方法分选A549细胞系中sidepo pulationcells(SP细胞)及非SP细胞亚群,并对该两亚群细胞的分化功能进行检测;用RT-PCR方法检测两亚群细胞ABCG2的表达。结果:免疫组化方法检测A549细胞系中ABCG2蛋白的阳性表达率为2%。流式方法成功分选得到SP细胞及非SP细胞亚群,其中SP细胞含量约为A549活细胞总量的1.09%,经拮抗剂Verapamil处理后下降为0.20%,两亚群细胞经培养后重新上机检测,发现SP细胞亚群可产生SP细胞及非SP两种细胞,而非SP细胞只能产生非SP细胞。SP细胞表达ABCG2,非SP细胞则不表达。结论:人肺腺癌A549细胞系SP亚群细胞富集了肺癌干细胞。通过流式细胞仪分选肺腺癌SP细胞亚群是分离肺腺癌干细胞的有效方法。