稳定沉默CUL5基因的CNE2细胞系建立

目的:建立稳定沉默CUL5基因的CNE2细胞系,探讨CUL5在连续分割照射下鼻咽癌细胞加速再增殖现象中所起的作用。方法:设计并合成能表达针对CUL5基因的shRNA的DNA序列,构建真核表达载体;脂质体转染重组质粒至人鼻咽癌细胞株CNE2;G418筛选阳性细胞并扩大培养;RT-PCR检测连续分割照射前后阳性细胞CUL5基因沉默效果。结果:经限制性内切酶酶切和DNA测序证实质粒中插入的为所需序列;G418筛选所得阳性细胞经RT-PCR证实照射前后均能抑制CUL5基因表达。结论:成功建立CUL5基因沉默的CNE2细胞系。

FDG PET或PET-CT与MRI判断鼻咽癌放疗后局部残留或复发价值荟萃分析

目的 比较氟标记脱氧葡萄糖（FDG）PET或PET-CT和MRI判断鼻咽癌放疗后局部残留或复发的价值.方法 检索Medline、Embase和Cochrane图书馆系统评价1995年1月至2009年8月相关FDG PET或PET-CT和MRI的原始文献.金标准为病理分析和（或）临床及影像学随访.2个人独立搜索文献和提取数据,分别计算出FDG PET或PET-CT与MRI的敏感性、特异性、汇总的受试者工作特征（SROC）曲线和Q＊值.结果 17个FDG PET或PET-CT和10个MRI研究纳入分析,汇总的FDG PET或PET-CT与MRI的敏感性分别为0.935（95% CI=0.901～0.964）与0.792（95%CI=0.731～0.844）,汇总的特异性分别为0.924（95% CI=0.898～0.945）与0.787（95% CI=0.746～0.825）.PET或PET-CT的SROC曲线下面积明显大于MRI（0.966∶0.852;z=2.29,P〈0.05）.PET或PET-CT的Q＊值明显高于MRI的（0.914∶0.783;z=2.94,P〈0.05）.结论 FDG PET或PET-CT在诊断鼻咽癌放疗后局部复发或残留的准确性高于MRI.

鼻咽癌调强放疗唾液腺保护技术应用现状

鼻咽癌是我国南方常见恶性肿瘤之一，放疗是首选且十分有效的治疗方式；但鼻咽癌常规放疗后口干的发生率近乎100％，对患者讲话、吞咽、睡眠、牙齿患病率有严重影响，一直是困扰患者的主要问题。多年来，国内外学者就口干的预防和治疗做了不少研究，但治疗放疗所致口干的效果十分有限且副作用较多。通过调强放疗（intensity—modulated radiation therapy，IMRT）减轻鼻咽癌放疗所致口干是 惟一在一定程度上有预防作用的措施。

人鼻咽癌放射抗拒细胞株建立及其细胞周期的观察

目的:建立人鼻咽癌放射抗拒细胞株CNE-2R,为研究鼻咽癌放射抗拒机制提供具有可比性的成对细胞。方法:用γ射线反复照射CNE-2细胞,筛选出放射抗拒细胞株CNE-2R;检测细胞生长的倍增时间;应用细胞克隆形成实验检测细胞的放射敏感性;MTT法检测照射后不同时间的存活分数;用流式细胞术检测细胞的周期分布特征。结果:CNE-2R的细胞群体倍增时间长于亲代CNE-2(4.5dvs3.6d),P=0.047;CNE-2及CNE-2R的放射敏感性明显不同,CNE-2R的放射抗拒性增加;照射后12hCNE-2R的存活率大于CNE-2(89.0%vs71.7%),P=0.001;细胞分布周期改变,CNE-2R的S期比例增高,G0/G1和G2/M期细胞减少,χ2=7.312,P=0.034;CNE-2R在照射后12～36h出现明显的G2/M期阻滞,亲本CNE-2仅在照射后12～24hG2/M期略有增加。结论:人鼻咽癌细胞株CNE-2经间歇性大剂量γ射线多次照射后得到的CNE-2R具有稳定放射抗拒性,并且显示出与亲代不同的细胞周期特征。

不同增殖状态下CNE-2细胞株DNA损伤修复相关基因表达差异的观察

目的:了解不同增殖状态鼻咽癌细胞(CNE-2)基因表达差异,探讨鼻咽癌放射治疗中加速再增殖的机制。方法:对不同增殖状态的CNE-2细胞,采用基因芯片技术、实时荧光定量PCR检测其DNA损伤修复相关基因的表达差异。结果:CNE-2细胞增殖活性最高时相(2Gy连续照射第3天)与最低时相(2Gy连续照射第5天)表达有差异的DNA损伤修复相关基因6条,占检测基因总数的5.9%(6/102),其中细胞增殖活性增高时上调基因为CDC25A,下调基因为DDIT3、GADD45、CDKN1A、BNIP3和FOXO3A。应用相对定量荧光实时PCR技术,对部分差异表达>2倍的基因(CCNE1、CDC25A、CDKN1A、DDIT3、GADD45和BNIP3)进行了mRNA水平的验证,结果显示实时PCR实验结果与芯片结果具有良好的一致性。结论:DNA损伤修复的某些基因如CDC25A、CDKN1A、DDIT3、GADD45、BNIP3和FOXO3A等可能参与了CNE-2细胞放射治疗过程中发生的加速再增殖过程,加速再增殖可能是一个复杂的、多基因协同作用的结果。

局部晚期鼻咽癌IMRT联合化疗±靶向治疗疗效与安全性对比

目的：回顾对比局部晚期鼻咽癌患者IMRT联合化疗±靶向治疗的疗效与不良反应，初步评价放化疗基础上加用靶向药物的必要性。方法收集2007—2012年间接受IMRT联合同步化疗±辅助化疗加靶向治疗的Ⅲ—Ⅳb 期鼻咽癌患者42例（试验组），同期仅行IMRT联合同步放化疗±辅助化疗的患者与其按1∶4配对入组168例（对照组）。 Kaplan.Meier法计算生存率并Logrank检验差异，余用χ^2检验。结果随访率为100％，试验组、对照组3年样本量分别为42例、168例。试验组3年OS、LRFS、DMFS率分别为94％、100％、92％，对照组的分别为87.3％、94.6％、89.1％（ P＝0.647、0.193、0.744）。3—4级胃肠道不良反应、骨髓抑制及口腔黏膜反应发生率试验组分别为7％（3／42）、26％（11／42）、41％（17／42），对照组分别为3.6％（6／168）、17.3％（29／168）、14.9％（25／168）（ P＝0.388、0.272、0.000）。结论初步结果提示IMRT联合化疗的基础上加用靶向治疗对提高局部晚期鼻咽癌患者OS、LRFS及DMFS的疗效不明显，且有可能加重放化疗相关的口腔黏膜反应。