阿帕替尼在治疗消化系统恶性肿瘤中的研究进展

在肿瘤组织的生长过程中,机体内部新生血管网可提供不可或缺的营养支持,而针对形态巨大的肿瘤大多因组织内缺血坏死形成溃疡型恶性肿瘤组织。针对这些恶性肿瘤组织的临床治疗,需要通过靶向治疗对组织血管生成的血液供应加以抑制[1]。

壮药扶正方对TAMs与肿瘤细胞共培养体系A549细胞生物学行为的影响

目的:探讨壮药扶正方含药血清对肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)与肺癌A549细胞共培养体系肺癌A549细胞增殖、迁移及侵袭等生物学行为影响及可能的作用机制。方法:采用氟波酯(PMA)联合白细胞介素-4、白细胞介素-13诱导人急性白血病单核细胞株(THP-1)建立TAMs体外模型,实时定量PCR及酶联免疫吸附试验法分析含药血清(低、中、高剂量组)及药物处理后24、48、72 h对TAMs表型调节;采用共培养体系,以肺癌A549细胞为研究对象,分别采用MTT法、实时细胞分析技术(RTCA)、Transwell法检测不同条件下A549细胞增殖、迁移及侵袭情况。结果:壮药扶正方含药血清能显著上调TMAs中M1型标志物白细胞介素-12、诱导型一氧化氮合酶表达水平,下调M2型标志物白细胞介素-10、CD206表达水平;与空白对照组比较,共培养组A549细胞增殖明显增加,细胞迁移及侵袭能力均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);与共培养组比较,壮药扶正方含药血清低、中、高剂量组A549细胞增殖、迁移和侵袭作用受抑制,且呈剂量依赖性(P<0.05)。结论:壮药扶正方含药血清在共培养体系中能够抑制肺癌A549细胞的增殖、迁移及侵袭作用,机制可能与其调节肿瘤微环境TAMs表型有关。

补阳还五汤有效组分对肺癌细胞增殖及转移的影响

目的:探究补阳还五汤有效组分对肺癌细胞增殖、转移的影响及可能的通路机制。方法:将人肺癌H460细胞分为对照组、苷类组分组,对照组细胞加入10ml/kg蒸馏水,苷类组分组细胞分别加入0.04g/ml、0.08g/ml、0.16g/ml的补阳还五汤药液10ml/kg分别作为实验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组。采用MTT法检测各组细胞处理前与处理后1、2、3d受抑制率,细胞划痕实验检测细胞转移能力,RT-PCR法、Western Blot法检测细胞中上皮-间充质转化(EMT)下游基因mRNA和蛋白表达水平。结果:补阳还五汤各含药血浆浓度为10%时,与对照组比较,可显著抑制H460细胞增殖;且随着浓度增加,抑制作用也增强;3个有效成分合用血浆的IC_(50)低于苷组分、黄芪甲苷、苦杏仁苷、芍药苷组(P<0.05)。实验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组细胞增殖率、迁移率随处理时间及药物浓度的增加而降低。与对照组比较,实验Ⅰ组、实验Ⅱ组、实验Ⅲ组H460细胞G0/G1期细胞增多(P<0.05),S期和G2/M期细胞减少(P<0.05);实验Ⅲ组H460细胞G0/G1期细胞多于实验Ⅰ组、实验Ⅱ组(P<0.05),S期和G2/M期细胞少于实验Ⅰ组、实验Ⅱ组(P<0.05)。与对照组比较,实验Ⅰ组、实验Ⅱ组、实验Ⅲ组EMT下游基因因子E-cadherin、Snail、N-cadherin、Vimentin的mRNA和蛋白表达水平均升高(P<0.05);实验Ⅱ组、实验Ⅲ组EMT下游基因因子Snail,Vimentin的mRNA和蛋白表达水平高于实验Ⅰ组(P<0.05)。结论:补阳还五汤通过抑制EMT通路关键基因因子表达,其有效苷类组分具有显著抑制非小细胞肺癌H460细胞增殖和转移的作用。

VX-680抑制肝癌HepG2细胞恶性表型的分子机制研究

目的探究VX-680对肝癌HepG2细胞恶性表型的影响及其分子机制。方法取肝癌细胞系HepG2细胞进行培养,分别给予0μmol/L、4μmol/L、8μmol/L、16μmol/L浓度VX-680进行处理,采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色(MTT)法、平板克隆法、4',6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)法、体外HUVEC小管形成实验检测肝癌HepG2细胞增殖、凋亡及血管生成等生物学行为,分别采用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)、Western Blot法测定细胞磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、丝氨酸苏氨酸激酶(Akt)、血管内皮生长因子(VEGF)基因mRNA、蛋白表达情况。结果①VX-680各浓度处理组细胞增殖抑制率显著高于对照组(P<0.05),克隆形成数显著低于对照组(P<0.05),随着浓度的升高,增殖抑制率、克隆形成数升高或降低幅度加大(P<0.05)。②DAPI染色实验示,各浓度VX-680作用下细胞可见不同程度凋亡,随浓度升高细胞凋亡数增多,组间比较差异具统计学意义(P<0.05)。③小管生成实验结果显示,与0μmol/L VX-680组比较,4μmol/L、8μmol/L、16μmol/L浓度VX-680作用下小管形成数逐渐减少,随着浓度的升高,小管生成数减少,差异具统计学意义(P<0.05)。④RT-PCR、Western-blot实验显示,随着处理浓度的升高,细胞PI3K、Akt、VEGF基因mRNA、蛋白表达均显著降低,差异具统计学意义(P<0.05)。结论VX-680可抑制肝癌HepG2细胞增殖、凋亡及血管生成作用,且存在明显的剂量效应,这一作用机制可能与其抑制PI3K/Akt通路的活性及VEGF的表达相关。

沙参麦冬汤加减联合化疗治疗晚期非小细胞肺癌对减轻毒副反应的作用

目的:研究沙参麦冬汤加减+化疗联合应用于晚期非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer,NSCLC)对减轻毒副反应的作用.方法:观察对象选择2018年9月~2020年1月我院接收的40例晚期NSCLC患者,以随机数字表法分组,即:对照组(20例,化疗治疗)、实验组(20例,加用沙参麦冬汤加减),比较两组的临床疗效、不良反应情况.结果:(1)实验组总有效率(55.00%)、稳定率(90.00%)高于对照组,但组间差异并不显著(P>0.05);(2)实验组肝损伤(5.00%)、白细胞减少(20.00%)、恶心呕吐(20.00%)发生率低于对照组,组间差异显著(P<0.05).结论:给予晚期NSCLC患者沙参麦冬汤加减+化疗治疗,可减轻毒副反应,值得推广.

补阳还五汤提取物调控肺癌细胞对乏氧环境适应性的作用及机制

目的探讨补阳还五汤提取物(Buyang Huanwu decoction,BHD)调控肺癌细胞对乏氧环境适应性的作用及潜在机制。方法将肺癌细胞Calu-1和A549暴露在缺氧环境中16 h后使用或不使用1 mg/mL BHD处理,分为Control组(使用同体积的PBS处理)和BHD组,检测肺癌细胞的增殖水平并通过RNA-Seq检测基因表达的差异。选取下调倍数在4倍以上的基因进行筛选,鉴定调控肺癌细胞增殖的关键基因。转染过表达空载体或HIF-α的过表达质粒后,分为Vector组和HIF-α组,检测肺癌细胞的增殖水平。同时,检测Control组和BHD组的耗氧量、葡萄糖水平、乳酸水平和谷氨酰胺水平。结果BHD显著降低了Calu-1和A549的增殖水平(P<0.05)。BHD显著调控多种基因的mRNA水平下调。通过siRNA敲低筛选上述表达水平下调4倍的基因对细胞增殖水平的影响,发现敲低HIF-α时肺癌细胞Calu-1和A549的增殖水平显著下降(P<0.05)。过表达HIF-α后,肺癌细胞Calu-1和A549的增殖水平显著上升(P<0.05)。BHD处理16 h后,相比于Control组,肺癌细胞Calu-1和A549的葡萄糖水平显著上升(P<0.05)、乳酸水平显著下降(P<0.05)、谷氨酰胺水平无显著变化(P>0.05)。BHD处理的同时过表达HIF-α后,相比于Control组,肺癌细胞Calu-1和A549的增殖水平无显著变化(P>0.05),耗氧量无显著变化(P>0.05),葡萄糖水平和乳酸水平无显著变化(P>0.05)。结论BHD通过下调HIF-α的表达量,减少肺癌细胞的糖酵解水平,降低肺癌细胞对乏氧环境的适应性,抑制肺癌细胞的增殖。

扶正方对Lewis肺癌小鼠免疫功能、PI3K/AKT信号通路和外周血IL-2、IL-6、INF-γ的影响

目的:观察扶正方对Lewis肺癌小鼠免疫功能、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路和外周血白细胞介素(IL)-2、IL-6、γ干扰素(INF-γ)的影响。方法:将40只Lewis肺癌小鼠随机分为模型组(M组)、扶正方低剂量组(A组)、扶正方高剂量组(B组)、顺铂组(S组),每组10只,A组、B组分别给予扶正方0.4 m L/20 g、0.8 m L/20 g灌胃,M组给予生理盐水0.4 m L/20 g灌胃,S组给予顺铂1 mg/m L,0.4 m L灌胃,连续14d,比较各组小鼠一般情况、肿瘤重量,胸腺指数、脾脏指数、脾脏CD3^(+)细胞、CD4^(+)细胞、CD8^(+)细胞比例细胞百分比,鼠肿瘤组织PI3K/AKT信号通路蛋白表达水平及外周血IL-2、IL-6、INF-γ水平。结果:A组、B组、S组小鼠肿瘤重量低于M组,S组小鼠肿瘤重量低于A组、B组(P<0.05),治疗前各组小鼠体重比较无统计学差异(P>0.05),治疗后A组、B组小鼠体重高于S组、M组(P<0.05)。A组、B组小鼠胸腺指数显著高于M组、S组(P<0.05)。A组、B组CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)显著高于M组、S组,CD8^(+)显著低于M组、S组(P<0.05),B组CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)显著高于A组,CD8^(+)低于A组(P<0.05)。A组、B组、S组小鼠肿瘤组织PI3K蛋白、AKT蛋白表达水平显著低于M组(P<0.05)。A组、B组、S组小鼠外周血IL-2、INF-γ水平显著高于M组,IL-6水平显著低于M组(P<0.05)。结论:扶正方可以提升Lewis肺癌小鼠免疫功能,调节IL-2、IL-6、INF-γ细胞因子水平,抑制PI3K/AKT信号通路起到抗肺癌的作用。

基于TCGA及验证分析关键lncRNA作为胃癌患者的潜在预后生物标志物

目的:构建基于长链非编码RNA(lncRNA)的胃癌(GCa)患者预后风险模型。方法:从癌症基因组图谱(TCGA)数据库中检索GCa患者的RNA测序数据和临床信息,使用R软件筛选免疫相关基因及lncRNA,进行单变量和多变量Cox回归分析以构建预后风险模型、生存分析和受试者ROC曲线用于评估模型的敏感性和特异性。结果:从TCGA数据库收集的GCa患者的临床信息,以确定用于预后的lncRNA生物标志物。从375例胃腺癌(stomach adenocarcinoma,STAD)组织和32例非癌组织中根据单变量和多变量Cox回归分析,发现了6个lncRNA(AP003392.1、AL022316.1、AC005586.1、LINC01315、AP001318.2、AL161785.1)与GCa患者存活相关,被选择建立预后风险模型。基于该风险模型,高危患者和低危患者的总生存率存在显著差异。该模型的ROC曲线下面积(AUC)为0.686。基因表达谱数据动态分析(gene expression profiling interactive analysis,GE-PIA)结果证实了LINC01315在STAD中的表达和预后意义。临床数据证实胃癌中LINC01315的表达较健康人,群是高表达。结论:构建lncRNA预后风险模型,风险值可以作为独立预后因子预测GCa患者的预后情况,降低LINC01315表达可能在GCa患者的生存率方面发挥重要作用。

壮药扶正复方辅助治疗晚期表皮生长因子受体敏感型突变非小细胞肺癌临床研究

目的评价壮药扶正复方辅助治疗晚期表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)敏感型突变非小细胞肺癌(non small cell lung cancer,NSCLC)的疗效。方法将符合入选标准的2019年6月-2020年5月广西国际壮医医院120例晚期NSCLC患者,按随机数字表法分为2组,每组60例。对照组以酪氨酸激酶抑制剂(tyrosine kinase inhibitor,TKIs)治疗,观察组以壮药扶正复方辅助表皮生长因子受体-酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKIs)治疗。2组均治疗至疾病进展或出现不可耐受的毒副作用时为治疗终点。分别于治疗前后进行中医证候评分,采用生活质量量表(QLQ-C30)评估生活质量;采用放射免疫分析法检测血清癌胚抗原(CEA)、鳞状细胞癌抗原(SCC-Ag)、糖类抗原50(CA50)水平;采用流式细胞仪检测CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)水平,计算CD4^(+)/CD8^(+)比值;观察并记录治疗期间的毒副作用,评价疗效。结果观察组客观缓解率为66.7%(40/60)、疾病控制率为81.7%(49/60),对照组分别为48.3%(29/60)、63.3%(38/60),2组客观缓解率、疾病控制率比较,差异有统计学意义(χ^(2)值分别为4.13、5.06,P值分别为0.042、0.025)。观察组治疗后胸闷气促、痰中带血、神疲乏力评分低于对照组(t值分别为8.72、5.02、5.47,P值均<0.001);QLQ-C30评分高于对照组(t=5.21,P<0.01)。治疗后,观察组CEA[(31.45±4.56)mU/L比(38.98±5.71)mU/L,t=7.98]、SCC-Ag[(4.87±0.93)μg/L比(7.29±1.25)μg/L,t=12.03]、CA50[(58.27±7.14)U/L比(66.48±7.94)U/L,t=5.96]水平低于对照组(P<0.01);CD3^(+)[(52.43±5.01)%比(48.56±4.87)%,t=4.29]、CD4^(+)[(54.89±5.03)%比(51.09±5.22)%,t=4.06]、CD4^(+)/CD8^(+)比值[(1.95±0.28)比(1.65±0.27),t=5.97]高于对照组(P<0.01),CD8^(+)[(28.12±2.70)%比(31.23±2.64)%,t=6.38]低于对照组(P<0.01)。治疗期间,观察组毒副作用发生率为13.3%(8/60)、对照组为8.3%(5/60),2组比较差异无统计学意义(χ^(2)=0.78,P=0.378)。结论壮药扶正复方辅助EGFR-TKIs可降低晚期EGFR敏感型突变NSCLC患者肿瘤标志物水平,改善患者中医证候、生活质量,增强患者免疫力,提高疗效。