大鼠生精细胞分离方法的研究

目的:建立一种简单、有效的哺乳动物睾丸生精细胞分离方法。方法:采用研磨-Percoll法、单一酶-研磨-Percoll法、组合酶法制备成熟期前大鼠睾丸生精细胞,分析比较其细胞总数、分离所需时间和细胞纯度,以及检测细胞培养前后的存活率。结果:组合酶法得到的睾丸生精细胞总数最多、分离所需时间最短;获得的细胞含杂质最少、细胞存活率最高;细胞培养48h后的存活率高,与其他两种分离方法比较有显著性差异(P<0.05)。结论:用组合酶法能在较短时间内获得数量较多的、比较纯化和存活率较高的生精细胞。

孕早期绒毛膜细胞原位培养和染色体制备方法的初步研究

目的:摸索建立一种快速简便的孕早期绒毛膜细胞原位培养和染色体制备方法。方法:对55例孕早期绒毛膜细胞酶消化解离后,进行原位培养和原位染色体制备。结果:建立了一种快速简便的孕早期绒毛膜原位培养和染色体制备方法,在55例孕早期绒毛膜细胞中,除3例因污染培养失败外,其余均获得成功,成功率达94.54%。结论:该方法成功率高、操作简便、培养时间短、细胞损耗小、染色体形态质量好,可供分析的染色体核型多,对异常胎儿能及早终止妊娠。

人类睾丸生精细胞体外培养的初步研究

目的对人类生精细胞体外培养分化、成熟进行初步研究.方法将4例患者的睾丸组织制备成生精细胞,观察生精细胞体外培养后生精细胞的分化、成熟情况.结果 4例患者睾丸生精细胞经体外培养后均有不同程度的分化、成熟.初级精母细胞能分化为精子细胞,分化率平均为0.47%～1.50%;Sa期精子细胞能变形、成熟为Sc期精子细胞,成熟率为0.93%～5.72%.结论在该研究条件下,人类睾丸生精细胞体外培养能进一步分化、成熟.

广西地区430对不良孕产史夫妇细胞遗传学分析

染色体异常是导致不良孕产史的重要原因之一,本文对1990年8月～2003年12月到本中心进行遗传咨询和检查的430对不良孕产史夫妇外周血染色体进行分析,现将结果报告如下.

抗抑制活性木聚糖酶研究进展

麦类饲料含非淀粉多糖(NSP)抗营养因子,严重影响麦类饲料的饲喂价值。添加木聚糖酶能减轻饲料中NSP的抗营养作用,但是麦类饲料中的木聚糖酶抑制蛋白会抑制外源添加的微生物来源木聚糖酶的活性,抗抑制性木聚糖酶的使用具有明显优势。文章综述谷物中存在的木聚糖酶抑制蛋白对外源添加木聚糖酶的抑制作用、抗抑制性木聚糖酶的潜在应用价值、研究现状及应用前景,以期麦类饲料能更好地在畜禽日粮中添加应用。

智力低下儿童染色体脆性部位与临床表现初步研究

目的:探讨智力低下儿童染色体脆性部位与临床表现的关系。方法:患儿年龄为4～15岁,智力测定采用学龄前儿童小韦氏(Wppsi)、学龄儿童用大韦氏(WiscR),同时进行社会生存能力测试。MR分级根据美国精神学会和世界卫生组织所颁布的标准(DSM-1、ICD-8)。智商均在正常标准以下的患儿及父母均做染色体G带高分辨与脆性位点检查。结果:280例先天智力低下儿童中染色体数目或结构异常的40例(14.29%);不同脆性位点表达阳性82例(29.29%);患儿与其父或母同一脆性位点表达阳性37例(13.21%);染色体脆性位点FraXq27、FraXq26、FraXq25、FraXq24的13例(4.64%);患儿脆性位点表达阴性,而父母表达阳性的14例(5%);脆性位点表达阴性94例(33.57%)。结论:脆性位点的异常甲基化与智力低下临床表型有着密切的关系;FraXq26、FraXq25、FraXq24可能与MR有关,而且可能是脆性X变异体,是一种新的突变;脆性位点的DNA突变点在配子或合子形成过程中,发生异常甲基化的同时,位置也可能发生“基因漂移”改变;脆性位点越多越复杂,患儿的智力低下的程度越低;同一脆性位点表达率的高低却与智力低下的程度无明显的正比关系。

中草药作为饲料添加剂防治弧菌的研究进展

随着海水养殖集约化的快速发展,致病性弧菌引起的病害已被认为是海水鱼类和贝类养殖产业的"灾祸之源"。中草药含多种天然活性物质,既可以抑菌杀菌也能增强机体的免疫力,开发中草药防治水产养殖弧菌安全高效,当前已取得一定成效。文章就水产养殖弧菌的危害及致病机理、中草药对水产养殖弧菌的抑制作用、中草药防治水产养殖弧菌的机理、中草药在饲料中的添加方式4个方面进行陈述,以期为水产养殖弧菌性疾病的防治提供参考。

开关式输精管节育器的临床应用研究

开关式输精管节育器的临床应用研究邓业光，侯杨华，杨挹芳，周才立，刘素珍为了解除节育受术者术后因子女发生意外的后顾之忧，我们研制了一种阀式可复性的开关式输精管节育器（简称输精管节育器）。自１９９０年８月～１９９２年４月临床应用２２０例，现报告如下。一、...

经阴道彩色多普勒超声在IVF-ET中对子宫内膜容受性的评估价值

目的:探讨经阴道彩色多普勒超声(TVCD)检测子宫动脉血流动力学、内膜厚度及形态变化能否评估移植前子宫内膜容受性。方法:回顾性分析119个体外受精一胚胎移植(IVF-ET)周期,TVCD检测注射绒毛膜促性腺激素(hCG)日和取卵日子宫动脉血流的搏动指数(PI)和阻力指数(RI)、子宫内膜厚度和形态,分析各个参数变化与临床妊娠的关系。结果:119个IVF-ET周期,临床妊娠率为33.61%(40/119)。妊娠组在hCG日PI和RI显著低于非妊娠组,取卵日妊娠组PI显著低于非妊娠组,RI无差异,hCG日妊娠组内膜厚度显著大于非妊娠组,内膜厚度<8mm者无一例妊娠,妊娠组内膜形态以多层为主。结论:hCG日子宫动脉PI和RI越低,血管阻力也越低,子宫血流灌注良好,获得妊娠机会较大,8mm以上多层内膜适宜胚胎着床,即TVCD对评估子宫内膜容受性有重要意义。

基于16S rDNA测序技术的自发性高血压大鼠肠道菌群结构变化及中药干预作用

目的分析自发性高血压大鼠(SHR)肠道菌群结构特征,初步探讨中药黄连解毒汤(HLJDD)干预作用影响。方法12周龄雄性SHR随机分模型组(M组)、HLJDD组(H组),同周龄雄性Wistar大鼠为正常对照组(W组),每组各4只。空白对照组及模型组常规饲养,HLJDD组按0.027 g/(kg·d)灌胃给药,每天给药1次,连续给药6周。干预结束后,取出盲肠内容物(新鲜粪便),采用16S rDNA高通量测序并进行生物信息学分析。结果3组大鼠肠道微生物测序覆盖度在0.997以上,从属水平分析3组大鼠物种丰度聚类分布于4个优势的细菌门:27个属于厚壁菌门类(Firmicutes)、4个属于拟杆菌门类(Bacteroidetes)、3个属于变形菌门类(Proteobacteria)和1个属于疣微菌门类(Verrucomicrobia)门类细菌;Simpson指数表明,模型组大鼠肠道菌群多样性降低,HLJDD组大鼠肠道菌群多样性高于模型组;3组大鼠肠道菌群微生物群落结构在门水平上主要由厚壁菌门(Firmicutes)、拟杆菌门(Bacteroidetes)和变形菌门(Proteobacteria)组成,其中模型组厚壁菌门(Firmicutes)相对丰度增加,HLJDD组大鼠肠道菌群厚壁菌门(Firmicutes)的相对丰度低于模型组;3组大鼠肠道菌群微生物群落结构在属水平上主要由乳酸杆菌属(Lactobacillus)、肠球菌属(Enterococcus)、大肠志贺氏杆菌属(Escherichia Shigella)组成,其中益生菌乳酸杆菌属(Lactobacillus)相对丰度在模型组明显降低,HLJDD组大鼠肠道菌群乳酸杆菌属相对丰度高于模型组。结论SHR肠道菌群结构失于平衡状态,菌群多样性有一定程度下降,HLJDD可能通过增加SHR菌群多样性、降低SHR致病菌厚壁菌门(Firmicutes)的相对丰度、升高SHR益生菌乳酸杆菌属相对丰度达到对抗高血压的作用,尚需扩大样本量进一步进行验证。

昆明小鼠胰腺干细胞分离培养及特异性标志物巢蛋白的鉴定

探讨胰腺干细胞的分离、培养及其特异性标志物巢蛋白鉴定的基本技术方法。选取新生昆明种小鼠25只,分离胰腺组织,V型胶原酶消化,结合自然沉降技术形成不连续密度梯度离心。分别从磷酸盐缓冲液/1.068g/L Percoll液(第一界面)、1.068g/L Percoll液/1.096g/L Percoll液(第二界面)、1.096g/L Percoll液/1.118g/L Percoll液(第三界面)收集细胞。各界面细胞均加入含体积分数为0.1胎牛血清的DMEM低糖培养基,置于经多聚赖氨酸处理的培养瓶中常规培养。24h后将培养基更换为不含胎牛血清的DMEM低糖培养基,并加入10mg/L的角质细胞生长因子和20μg/L的碱性成纤维细胞生长因子,观察体外培养的各界面细胞的形态学特征。胰腺的内分泌部存在β细胞,双硫腙能与β细胞分泌颗粒中的锌螯合而呈现铁红色。将收集的各界面细胞进行双硫腙染色,检测细胞来源。免疫组织化学法检测各界面巢蛋白的表达。结果第一、二界面细胞65%～90%双硫腙染色呈阳性,来源于胰腺的内分泌部;第三界面细胞双硫腙染色呈阴性,来源于胰腺的外分泌部。从胰腺的内分泌部获得的细胞聚集呈胰岛样细胞团贴壁生长,48～72h后可见许多大、圆、单个核的细胞从胰岛样细胞团中向周围长出,以附壁生长的方式在局部形成细胞集落。从胰腺的外分泌部获得的细胞主要呈上皮样生长,并逐渐汇合成片,在上皮样细胞集落的周围可见大、圆、单个核的细胞生长并形成集落。各界面大、圆、单个核的细胞,巢蛋白均呈阳性表达。提示从胰腺内、外分泌部的组织中能成功获取胰腺干细胞特异性标志Nestin表达阳性的干样细胞。

经阴道超声诊断不孕妇女子宫内膜息肉及其相关疾病分析

目的：探讨不孕妇女子宫内膜息肉（EP）声像图特征及与可能伴发高发生率的盆腔疾病的关系。方法：回顾性分析2003年6月～2005年6月腹腔镜术前经阴道超声（TVS）检查疑有EP的116例不孕患者，经官腔镜术及病理检查证实EP的超声声像图，同时分析经腹腔镜证实伴发的高发生率的盆腔疾病。结果：116例患者经宫腔镜和病理证实EP94例，符合率为81．03％（94／116），误诊率为18．97％（22／116）。EP声像图主要表现为子宫腔内高或等回声团块，团块所在部位官腔线弯曲、中断或消失；部份内膜呈不均匀高回声，宫腔线未能清晰显示，误诊的22例病理结果为内膜单纯性增生过长、增殖期及分泌期子宫内膜。经宫腔镜和病理证实的EP患者腹腔镜术中发现伴发有较高的子宫内膜异位症，其发生率为53．19％（50／94）。结论：TVS诊断EP声像图有一定的特征性，但易与内膜增长过长等混淆，须结合宫腔镜和病理检查提高诊断符合率；有子宫内膜息肉的不孕妇女有高发子宫内膜异位症的可能性。

应用荧光原位杂交技术产前诊断Down综合征

目的：应用荧光原位杂交（fluorescent in situ hybridization,FISH）技术对Down综合征进行产前诊断.方法：收集产前筛查中染色体异常的高危孕妇（孕8～10周或孕16～20周） 绒毛或羊水间期细胞或染色体标本各20例,应用21号染色体特异性DNA探针对间期和中期细胞进行FISH检测,同时通过脐血淋巴细胞和外周血淋巴细胞及流产后绒毛细胞染色体的检测分析以证实产前诊断准确性.结果：全部标本杂交成功,信号强,背景低.经FISH检测的总共40例绒毛和羊水细胞中,发现21三体综合征3例,其中羊水细胞2例,绒毛细胞1例,所有产前诊断结果与追踪检查结果一致.结论：FISH技术简便、快速、特异性强、易掌握,适用于染色体异常的快速产前诊断.

地中海贫血产前基因诊断现状和发展趋势

地中海贫血(地贫)是一组常染色体隐性遗传病.它是由于珠蛋白基因突变,使珠蛋白生物合成受阻,产量不足或缺如所致.对于重型地贫,除了输血之外,目前尚缺乏有效的治疗手段,重点在于预防.通过产前基因诊断,可以发现重型地贫胎儿并及时终止妊娠,从而减少重型地贫患儿的出生率及围产期并发症,提高人口的健康素质,减轻家庭及社会的精神及经济负担.现将α-及β-地贫产前基因诊断的现状与发展趋势综述如下.

经阴道超声观察哺乳期妇女子宫复旧、内膜和卵巢变化

目的：通过经阴道超声（TVS），观察卵巢、内膜变化和子宫复旧情况，为产后妇女寻找最佳避孕节育措施时间提供科学依据。方法：对产后不同时期的155例哺乳期妇女，经TVS观察子宫大小、内膜厚度、卵巢和卵泡变化情况。结果：哺乳期妇女在产后42d内（产褥期）子宫体逐渐缩小可恢复至未孕状态；在产后42d、43～90d、91～150d、〉150d不同时间内可以测量到3～15mm子宫内膜厚度分别为12．20％、37．04％、51．16％、64．71％；产后3个月卵巢明显增大，同时有93．02％妇女卵巢内可观察到囊状卵泡。结论：产后哺乳妇女产褥期内子宫复旧，产褥期后可稳定在未孕状态，而子宫内膜出现周期性变化明显晚于子宫体的复旧；卵巢在产后3个月明显增大，同时大多数妇女可观察到囊状卵泡。建议产后哺乳期妇女选择适当的避孕措施以产褥期后为宜，落实长效避孕措施以产后3个月最佳。

BrdU标记在大鼠生精细胞体外培养中的应用

目的探讨应用5-溴-2-脱氧尿苷(5-bromo-2-deoxy-uridine,BrdU)标记检测大鼠生精细胞体外的分化、发育情况。方法采用BrdU体内标记生精细胞的DNA,免疫细胞化学法跟踪观察大鼠生精细胞在体外培养中的分化、发育情况。结果培养前在体内标记BrdU的细胞为初级精母细胞,经培养后在BrdU标记的细胞中出现早期精子细胞。结论大鼠生精细胞体外培养过程中,应用BrdU标记能检测生精细胞的分化、发育情况。

残角子宫16例临床分析

目的提高对残角子宫临床特征、诊断、处理原则及与不孕症的关系等的认识。方法对2002年10月至2005年6月间我中心收治的16例住院行腹腔镜术诊断为残角子宫患者的临床资料进行回顾性分析。结果16例患者中12例为Ⅲ型,有正常妊娠史者58.33%(712);4例为Ⅰ型残角子宫,有正常妊娠史占14。结论残角子宫的诊断和分型非常重要,Ⅰ、Ⅱ型应行残角子宫切除,妊娠者更应及早处理。