禾花鲤细菌性败血症病原菌的分离鉴定及毒力基因检测

以常规方法对广西全州县患病禾花鲤进行病原菌的分离,人工感染试验确定病原菌的致病性,API全自动细菌鉴定仪和16S rRNA基因序列分析对病原菌进行生化鉴定和分子鉴定,K-B纸片扩散法进行病原菌的药敏试验,毒力基因检测为PCR扩增法。结果表明,从患病禾花鲤肝脏组织分离到2株优势菌株HHL130和HHL165,对健康禾花鲤的致死率均为100%,是禾花鲤细菌性败血症的病原菌;API生化鉴定和16S rRNA鉴定结果,HHL130和HHL165均为嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila),与标准菌株Aeromonas hydrophila ATCC 7966的同源相似度为99.6%,亲缘关系最近;2株病原菌对头孢他啶、庆大霉素、强力霉素3种药物敏感,对磺胺新诺明、头孢拉啶、青霉素等9种药物耐药;2株病原菌的基因型分别为HHL130:hly^+Aer^+Alt^-Act^+ahal^+ahp^+;HHL165:hly^+Aer^+Alt^-Act^+ahal^+ahp^-。

罗非鱼源无乳链球菌对氨基糖苷类耐药性及耐药基因检测

【目的】开展罗非鱼源无乳链球菌的氨基糖苷类抗生素耐药性及耐药基因的检测分析,为临床用药指导和该菌的耐药机制的进一步研究提供理论基础。【方法】通过K-B纸片扩散法对32株无乳链球菌菌株进行氨基糖苷类抗生素的敏感性试验,采用PCR法检测4种氨基糖苷类耐药基因的携带情况。【结果】32株无乳链球菌对链霉素、庆大霉素和新霉素的耐药率依次是100. 0%、100. 0%及78. 1%。新霉素在南宁市、玉林市和柳州市的耐药率依次为87. 5%、100. 0%及53. 8%,差异显著(P <0. 05);链霉素和庆大霉素在3个市的耐药率均为100. 0%。4种氨基糖苷类耐药基因aph(3')-Ia、ant(3')-I、aac(3')-Ib和aac(6')-Ib的检出率分别为0. 0%(0/32)、75. 0%(24/32)、0. 0%(0/32)及31. 3%(10/32)。ant(3')-I基因和aac(6')-Ib基因在南宁市、玉林市和柳州市菌株中的检出率差异均不显著(P> 0. 05)。所检无乳链球菌中同时携带ant(3')-I和aac(6')-Ib基因的菌株占28. 1%(9/32),只携带其中1种耐药基因的菌株占50. 0%(16/32),未检出耐药基因的菌株占21. 9%(7/32)。链霉素耐药表型与ant(3')-I基因符合率为75. 0%,新霉素、庆大霉素和链霉素耐药表型与aac(6')-Ib基因的符合率依次为36. 0%、31. 3%及31. 3%,新霉素耐药表型与aph(3')-Ia基因符合率为0. 0%,庆大霉素和新霉素耐药表型与aac(3')-Ib基因的符合率均为0. 0%。【结论】广西罗非鱼源无乳链球菌对庆大霉素、链霉素及新霉素的耐药率均较高。罗非鱼源无乳链球菌的氨基糖苷类耐药基因以ant(3')-I为主,链霉素耐药表型与ant(3')-I基因之间的符合率最高,其次为新霉素、庆大霉素和链霉素耐药表型与aac(6')-Ib基因的符合率,新霉素耐药表型与aph(3')-Ia基因、新霉素和庆大霉素耐药表型与aac(3')-Ib基因的符合率最低。

黄沙鳖致病性蜡样芽孢杆菌的分离鉴定及药敏试验

【目的】对广西武宣县某养殖场患病黄沙鳖(Pelodiscus sinensis)进行病原菌分离鉴定及药敏试验,为防治黄沙鳖蜡样芽孢杆菌病提供参考依据。【方法】采用常规方法对患病黄沙鳖进行细菌分离,通过人工感染试验确定其致病性。采用API 50CH生化鉴定和16S rRNA序列分析进行细菌鉴定,并以K-B纸片扩散法及二倍稀释法进行药敏试验。【结果】从患病黄沙鳖肝脏中分离获得1株具有芽孢的革兰氏阳性杆菌GXWXAA,对健康黄沙鳖致死率达100.0%。经鉴定,菌株GXWXAA属于蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus),与蜡样芽孢杆菌JY5(HQ833024)、JY7(HQ833025)、JY9(HQ833026)和VBE16(MG027671)的亲缘关系最近,相似性均达99.9%。菌株GXWXAA对新霉素、恩诺沙星和多西环素等15种抗生素敏感,对头孢曲松、环丙沙星和依诺沙星中介,对青霉素G、氨苄青霉素、复达欣、复方新诺明和多粘菌素B耐药。新霉素、恩诺沙星和多西环素对菌株GXWXAA的最小抑菌浓度分别为0.488、0.122和0.244μg/mL。【结论】引起广西武宣县某养殖场黄沙鳖发病的病原菌属于蜡样芽孢杆菌,建议选择新霉素、恩诺沙星和多西环素等抗生素对患病黄沙鳖进行治疗。

大黄、黄芩、诃子、黄连对嗜水气单胞菌体外抑菌效果的Meta分析

【目的】采用Meta分析法评价大黄(Rheum officinale)、黄芩(Scutellaria baicalensis)、诃子(Terminalia chebula)、黄连(Coptis chinensis)4种中草药对嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)的体外抑菌效果,为水产养殖动物嗜水气单胞菌病防治的中草药筛选提供参考。【方法】使用计算机检索中国知网(CNKI)数据库,检索时限为建库至2018年1月,检索关于大黄、诃子、黄芩、黄连4种中草药对嗜水气单胞菌体外抑制效果的文献,并追溯相关参考文献。提取数据,利用Reviewer manager 5.3软件对数据进行Meta分析。【结果】共纳入8篇文献进行Meta分析,结果显示大黄对嗜水气单胞菌的抑菌效果显著高于黄芩[MD=0.85,95%CI(0.02,1.68),P=0.04];黄连的抑菌效果显著低于大黄[MD=-3.41,95%CI(-5.61,-1.21),P=0.002];黄连的抑菌效果显著低于黄芩[MD=-4.60,95%CI(-6.03,-3.17),P<0.0001];黄芩与诃子的抑菌效果无显著差异[MD=-0.33,95%CI(-1.54,0.88),P=0.59]。敏感性分析结果表明Meta分析结果均稳定。异质性分析结果表明,药敏结果的异质性主要因菌株的来源不同造成。【结论】根据Meta分析,大黄、黄芩、诃子和黄连4种中草药对嗜水气单胞菌的抑菌效果为大黄>黄芩和诃子>黄连,分析结果稳定,使用此4种中草药治疗嗜水气单胞菌病时建议首选大黄。

南方大口鲶致病性温和气单胞菌的分离鉴定及药敏试验

为了查明大口鲶体表溃烂的病因及指导养殖户用药,以常规方法从患体表溃烂病的南方大口鲶的肝脏和心脏中分离到4株优势菌株DKN01、DKN02、DKN03和DKN04,人工感染试验表明,4株分离菌株均为引起南方大口鲶体表溃烂病的病原菌。API 20NE生化鉴定结果,均为温和气单胞菌(Aeromonas sobria),4株病原菌对多粘菌素B、特治星、磺胺二甲嘧啶和盐酸沙拉沙星4种药物均敏感,对青霉素、氨苄青霉素、复方新诺明、新生霉素、氟苯尼考、磺胺-6-甲氧嘧啶(钠)和磺胺对甲氧嘧啶7种药物耐药。药敏结果可作为该养殖户治疗该病的用药参考。