广西地区食蟹猴配种后主要生殖激素的变化

[目的]探讨广西地区笼养雌性食蟹猴配种后生殖激素的变化水平。[方法]采用放射免疫分析法（RIA）测定食蟹猴配种后血清雌二醇（E1）、孕酮（P）和催乳素（PRL）的水平变化。[结果]结果表明，在配种后1～60d孕酮的含量缓慢降低，第60天降到最低水平（0．22±0．06）ng／ml，其后缓慢上升。第105天出现一个大的峰值，为（1．15±0．12）ng／ml，峰值过后浓度呈下降趋势，整个测定时期的平均值为（0．66±0．08）ng／ml。雌二醇的含量除了在第75天有一个较大的峰值[（86．92±18．54）pg/ml]外一直处于一个稳定的水平，在第120天后呈逐渐上升的趋势，整个测定时期的平均值为（35．16±5．12）pg／ml。催乳素的含量在配种后1～90d稳步上升，第90天出现一个小的峰值，为（99．62±44．56）IU／ml。第105天后含量上升较快，催乳素在整个测定时期的平均值为（103．64±37．36）IU／ml。[结论]该研究为采用食蟹猴作为动物模型探讨不孕不育的病因和发病机理提供参考依据。

广西笼养食蟹猴血液常规值及血液生化值的测定

[目的]测定广西笼养食蟹猴血液学特性和生化值。[方法]选用健康3～5岁的数量各50只的雌雄食蟹猴,采用常规方法测定15项血液常规值和14项血液生化值。[结果]雄性食蟹猴的红细胞、红细胞压积、碱性磷酸酶明显高于雌性食蟹猴﹙P<0.01);血红蛋白、血小板压值、淋巴细胞、白蛋白这4项测定指标中,雄性食蟹猴的测定值均高于雌性食蟹猴的测定值(P<0.05)。而雌性食蟹猴的谷丙转氨酶测定值则明显高于雄性食蟹猴的测定值(P<0.01)。其余21项血液指标测定值雌雄间相差不显著(P>0.05)。[结论]该研究为灵长类动物试验提供参考依据。

普洱茶提取物及普洱茶多糖对人成纤维细胞抗衰老作用机制研究

本文通过比较普洱茶提取物、普洱茶多糖、葡萄籽提取物、绿茶提取物、绿茶多酚及维生素C6种天然抗氧化物对体外培养人衰老成纤维细胞（HDF）的作用机制,研究普洱茶等天然抗氧化物对抗复制性衰老的作用功效.试验建立了HDF衰老细胞模型,用含低质量浓度（3.125,6.250 μg/mL）,中质量浓度（12.500,25.000 μg/mL）和高质量浓度（50.000,100.000 μg/mL）的6种组分的培养基培养1～7d,采用MTT法及荧光定量PCR比较细胞的增殖能力、相对存活率以及细胞SOD1,SOD2,CAT,GPx及线粒体D310和D-loop基因的表达量.结果显示：低质量浓度组的6种天然抗氧化物和中、高质量浓度组的普洱茶多糖和维生素C能显著提高衰老HDF细胞的增殖能力（P＜0.05）;绿茶多酚和绿茶提取物可提高衰老HDF细胞SOD1,SOD2,D310和D-loop基因的表达量;普洱茶多糖可显著提高SOD1,GPx和D-loop基因的表达量;维生素C能显著提高SOD1和GPx基因的表达量.可见,6种天然组分均有延缓HDF细胞复制性衰老的功效,且不同天然抗氧化组分之间对细胞的抗衰老功效具有不同的细胞、分子作用机制.

不同甘油浓度与平衡时间对食蟹猴精液冷冻效果的影响

探讨了不同甘油浓度（3%、5%、7%、11%）和不同平衡时间（30、60、90、120min）对食蟹猴（Macaca fascicularis）精液冷冻效果的影响,以建立和优化食蟹猴精液冷冻的程序。参照TTE稀释液成分组成改良型TTE,冷冻前和解冻后均检测精子的活力、畸形率、质膜完整性、顶体完整率。结果显示,平衡时间为30min时精子的冷冻解冻后活力、复苏率均高于平衡时间90min和120min组,差异显著（P〈0.05）,比60min组稍好;甘油浓度为3%、5%组的精子冷冻解冻后活力及复苏率均高于甘油浓度11%组,差异显著（P〈0.05）,比7%组好;不同甘油浓度各组间以及不同平衡时间各组间畸形率、质膜完整性、顶体完整率差异不显著（P〈0.05）。由此得出如下结论,在食蟹猴精液冷冻中,在改良TTE中加入3%-5%的甘油且平衡30min可以获得较好效果,精子冻后活率和复苏率达到45%和62%。

奶牛产后部分血液指标的动态监测及相关分析

【目的】了解天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、白蛋白（ALB）、尿酸（UA）等血液生化指标在奶牛产后的变化特征及彼此间的相关性，为奶牛产后健康养殖及疾病检测提供参考依据。【方法】随机选取广西南宁某奶牛场荷斯坦奶牛35头，分别于分娩当天及产后第14、28、42、56d清晨空腹颈静脉采血，离心获得血浆后测定AST活性及ALB、uA水平，并进行Pearson相关分析。【结果】奶牛血浆AST活性在产后急剧上升，于产后第14d达峰值（84．27±15．10U／L）；而ALB含量在产后快速降低，于产后第14d降至最低值（36．51±2．27g/L）；UA浓度于产后第14-28d急剧上升，第28d上升至峰值（80．70±8．06μmol／L）。相关性分析结果表明，AST活性与uA浓度分别在分娩当天及产后第28、56d呈显著正相关（P〈0．05），AST与ALB在产后第14d呈极显著负相关（P〈0．01），uA与ALB在奶牛产后期间无显著相关性。【结论】对奶牛产后实施血浆AST、ALB、UA血液生化指标的动态检测，可有效了解牛群肝脏、肾脏和心脏的功能状况。

SD大鼠睾丸支持细胞的分离、培养、纯化及鉴定

为进一步简化、优化SD大鼠睾丸支持细胞的体外培养条件及鉴定方法,采用三酶两步消化法和差异贴壁法分离、培养、纯化SD大鼠支持细胞,并用HE染色、油红染色、Feulgen染色及透射电镜扫描其超微结构予以鉴定。结果表明:平均0.10g睾丸组织可获得2.5×106个支持细胞,细胞存活率90%以上,体外培养5h后开始贴壁,96h后细胞生长速率下降,其对数生长期为3～7d,整个体外生长周期约为10～15d。对获得的纯化细胞进行鉴定,发现其形态结构及超微结构与支持细胞的形态特征一致。可见,采用三酶两步消化法和差异贴壁法,可达到分离、培养、纯化SD大鼠支持细胞的目的。

食蟹猴耳部成纤维细胞体外培养体系的初步建立

建立食蟹猴耳部成纤维细胞的体外培养体系,为食蟹猴体细胞核移植、转基因技术及治疗性克隆做准备。通过组织块培养法进行原代培养,成功分离了食蟹猴耳部成纤维细胞;原代培养后用0.25%胰蛋白酶+0.02%EDTA消化液消化细胞,用含10%FBS的DMEM对细胞进行培养,细胞在体外传至第25代;用含10%FBS和10%DMSO的DMEM为冷冻液对细胞进行冷冻保存,解冻传代后,细胞形态和生长速度没有明显变化;用细胞技术法绘制细胞的生长曲线显示,符合体外细胞生长规律;用吉姆萨染色法对不同代数细胞的染色体倍性进行分析,二倍体细胞所占比例为80%以上。

食蟹猴芯片标记实效评价

植入式无源微芯片广泛应用于动物个体的标记,在管理CITES附录物种活体标本方面具有较大潜力。采用无源芯片对食蟹猴进行皮下植入式标记,扫描、监测芯片在食蟹猴体内的状态和效果,观察和研究芯片植入对食蟹猴的影响,发现芯片游走率为6%;当植入时间长于6个月时,代码可识读的个体1 057只,占90.11%;扫描不出代码但可触摸到芯片(芯片断裂或损坏)的个体60只,占5.12%;扫描不出代码也触摸不到芯片的个体56只,占4.77%。评价食蟹猴芯片标记的实际效果和适用性,总结现存的主要问题,研究并提小有关食蟹猴芯片标记技术规范的建议。

超声测量正常成年食蟹猴腹部实质脏器生理径线

目的获取正常成年食蟹猴肝、胆、胰、脾、肾的超声生理径线测值。方法选取24只3～5岁食蟹猴，雌雄各半，分别运用超声对肝、胆、胰、脾、肾进行观察和测量，并进行统计学分析。结果超声均清楚显示正常成年食蟹猴肝、胆、胰、脾、肾；正常成年雌性食蟹猴肝脏左叶前后径及右叶斜径、肾脏小于雄性（P〈0．05），同性别食蟹猴两侧肾脏无明显差别（P〉0．05）；正常成年雌性食蟹猴胆囊壁厚度小于雄性（P〈0．05）；正常成年雌性和雄性食蟹猴胰腺和脾脏大小无明显差别（P〉0．05）。结论食蟹猴的肝、胆、胰、脾、肾正常二维声像表现与人类二维声像表现类似，提示超声检测技术可在食蟹猴动物实验中普及应用。

食蟹猴自发性高血压及患病危险性的相关性研究

目的建立各年龄段食蟹猴血压参考值。方法采用美国Beckman-CX4全自动生化分析仪和北京松下电工有限公司的腕式电子血压计,检测521只食蟹猴血压及血脂指标,对测定结果进行统计检验。结果经统计分析,不同年龄段的食蟹猴血压值差异显著,老年组食蟹猴血压值高于其它年龄组;老年组食蟹猴高血压的发病率高于其他年龄组,高血压组食蟹猴身体质量指数(body mass index,BMI)高于同年龄组血压正常的食蟹猴;老年组高脂血症食蟹猴高血压发病率高于其他年龄组。Logistic回归分析显示,年龄、BMI及高脂血症在预测高血压组的患病危险性的预测能力分别为血压正常组的1.435、1.218、2.337倍。结论初步建立不同年龄段食蟹猴的血压参考值。年龄、BMI、高脂血症为食蟹猴自发性高血压的危险因素,基础血压值测量为食蟹猴自发性高血压模型筛选及其相关研究提供了依据。

氯胺酮联合丙泊酚在食蟹猴动物实验中的麻醉效果观察

目的观察氯胺酮联合丙泊酚在食蟹猴动物实验中的麻醉效果。方法选取24只4~7岁雄性食蟹猴,按随机数字表法分为小牛血清组、四氯化碳组、酒精组及对照组,每组6只,造模18周后采用氯胺酮基础麻醉+丙泊酚静脉麻醉对食蟹猴行枪式肝穿活检进行麻醉,术中监测生命体征和观察麻醉效果,并对其进行统计学分析。结果造模18周后,3个造模组食蟹猴均出现肝纤维化,但以四氯化碳组肝纤维化明显;24例食蟹猴氯胺酮肌注起效时间为(4.20±1.55)min,各组氯胺酮肌注起效时间比较差异无统计学意义(P>0.05);24例食蟹猴刺激睁眼时间为(6.50±2.84)min,各组刺激睁眼时间比较差异无统计学意义(P>0.05);在氯胺酮联合丙泊酚麻醉实验中,四组心率、呼吸均平稳,肝穿前后呼吸末CO2分压、心率在组内比较及3个造模组与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05);四组肝穿前后血糖均变化明显,组内肝穿前后比较差异有统计学意义(P<0.05),但3个造模组与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。四组食蟹猴麻醉过程中均无无躁动、嚎叫表现,且苏醒迅速,术后无呕吐、抽搐等不良反应。结论四氯化碳可有效地进行食蟹猴肝纤维化模型造模,氯胺酮基础麻醉+丙泊酚静脉麻醉在食蟹猴动物实验中应用麻醉效果良好,具有推广意义。

食蟹猴支持细胞的分离、纯化以及不同血清浓度对其增殖的影响研究

[目的]纯化培养食蟹猴支持细胞,并测定不同血清浓度对细胞增殖的影响。[方法]分离并纯化食蟹猴支持细胞后,分别以5%、10%、15%、20%4种不同血清浓度的培养基对食蟹猴支持细胞进行培养。利用MTT比色法判断支持细胞的增殖情况,从而确定最佳的血清培养浓度。[结果]5%血清浓度的培养基对细胞增殖能力的影响与10%血清浓度的培养基差异不显著,15%与20%的血清浓度的培养基对细胞增殖能力的影响差异不显著,5%、10%与15%、20%的血清浓度的培养基对细胞增殖能力的影响差异极显著。[结论]15%的血清浓度是支持细胞增殖的最佳比例。

四种麻醉药物对食蟹猴麻醉效果分析和选择应用

目的分析比对速眠新、氯胺酮、异氟烷和利多卡因4种不同麻醉药对食蟹猴的麻醉效果。方法总结实际工作中分别使用四种不同麻醉药物对食蟹猴作用的麻醉特点。结果速眠新、氯胺酮、异氟烷均能获得较好的麻醉效果,能满足不同手术、采样需要;局麻药利多卡因对食蟹猴麻醉的实际应用不理想。结论食蟹猴的手术及其他侵犯性操作等都应该考虑生物安全和动物福利要求,实行麻醉,但应根据食蟹猴实验内容要求和不同麻醉药特点选择合适的麻醉方法,确保人员和动物安全,实验结果不受影响。

食蟹猴肌肉萎缩模型的建立

目的采用限制下肢活动方法,建立食蟹猴肌肉萎缩动物模型,建立模型评价的方法。方法采用高分子纤维绷带固定食蟹猴右侧下肢(踝关节至膝关节)15周,期间每两周测量体重、双侧小腿腿围、下肢容积,造模11、13、15周行双侧小腿腓肠肌MRI检查,15周行肌肉组织活检。结果造模15周后,动物体重无明显变化,右小腿腿围、右大腿腿围、右下肢体积比造模前均明显下降(P<0.05);造模15周后血清肌酐、血糖、碱性磷酸酶均出现显著下降(P<0.05),血清胆固醇水平明显升高(P<0.05);MRI显示右侧腓肠肌萎缩,右侧腓肠肌容积较造模前减小;肌肉组织活检显示右侧腓肠肌萎缩,肌纤维变细;腓肠肌纤维横截面积缩小。结论通过外固定限制食蟹猴下肢活动的方法制作肌肉萎缩模型,造模周期适当,操作性强。综合采用腿围、下肢排水体积、生化指标、MRI成像及肌肉活检相结合的评价方法,能够简单、客观评价食蟹猴肌肉萎缩模型。

非人灵长类实验动物福利与AAALAC认证

近年来生物科学研究领域中实验动物的使用数量迅猛增加,非人灵长类作为与人类亲缘关系上最近的实验动物,其福利状况引起社会公众的极大关注.本文就非人灵长类实验动物在日常饲养管理和动物实验中的福利要求及AAALAC认证过程做一论述.

肥胖及糖尿病食蟹猴全天血糖、胰岛素值及相关生理指标观测

目的探讨肥胖及糖尿病食蟹猴全天24h血糖、胰岛素变化情况及相关生理指标。方法选择36只成年雄性食蟹猴，其中正常、肥胖和糖尿病食蟹猴各12只。测量每只食蟹猴体质量、腹围、皮脂，计算体质量指数（BMI）；并检测各食蟹猴心率、血压、呼吸及体温；在24h内，每1．5h进行一次采血，检测血糖、胰岛素、糖化血红蛋白及血脂四项。结果正常、肥胖和糖尿病食蟹猴的血糖值分别为3．94±0．65mmol／L、4．33±0．84mmol／L和12．09±4．58mmol／L；糖尿病食蟹猴在21：00～22：30时间段血糖值最高为13．68±0．55mmol／L，18：00-19：30血糖值最低为10．94±0．49mmol／L。正常、肥胖和糖尿病食蟹猴24h胰岛素值为（29．50±12．36）mU／L-（62．50±21．98）mU／L、（31．21±0．98）mU／L-（123．42±3．38）mU／L和（12．60±3．16）mU／L-（30．62±3．16）mU／L；糖尿病食蟹猴9：00～10：30胰岛素值最大，为30．62±11．71mU／L，03：00-04：30胰岛素值最低，为12．60±3．16mu／L。结论食蟹猴基础血糖值和胰岛素值的调查为糖尿病动物模型的建立及其相关研究提供基础数据参考。

免疫性食蟹猴肝纤维化模型的实验研究

目的:在食蟹猴上,通过皮下注射异种血清的方法建立免疫性肝纤维化模型,阐明该模型的特点。方法:选择雄性食蟹猴12例,随机分为模型组和对照组。模型组皮下注射小牛血清,剂量为0.4 ml/kg;对照组注射相同剂量的生理盐水。每周均注射两次。结果:造模第8周开始,模型组血清HA、PCⅢ、ⅣC、TGF-β1和α-SMA均较造模前显著升高(P<0.05,P<0.01),模型组HA和PCⅢ比对照组显著升高(P<0.05)。造模第12周后,模型组血清ⅣC、TGF-β1和α-SMA均比对照组显著升高(P<0.05),模型组血清LN和TCH水平较造模前显著升高(P<0.05);模型组血清AST和ALT水平比对照组以及造模前均显著升高(P<0.05),模型组ALB比造模前显著下降(P<0.05)。造模16周,模型组血清LN、TCH和TG水平比对照组显著升高(P<0.05);模型组ALB水平明显低于对照组(P<0.05);B超显示模型组肝脏光点较对照组粗糙,显示强光回声团;HE染色下显示,模型组肝细胞坏死和单核细胞浸润;Van-Gieson胶原染色下显示,模型组肝脏汇管区胶原纤维增生。结论:给予皮下注射小牛血清16周,成功建立食蟹猴肝纤维化模型。

不同年龄段食蟹猴骨矿含量与骨密度测定分析

目的研究食蟹猴在不同生长阶段的骨骼生长发育特点,为使用食蟹猴作为骨骼模型动物的研究提供参考。方法选择1~19岁283只食蟹猴,分为雄性和雌性不同年龄段:1岁≤年龄<3岁组、3岁≤年龄<5岁组、5岁≤年龄<7岁组、7岁≤年龄<9岁组、9岁≤年龄<11岁组、11岁≤年龄<13岁组、13岁≤年龄<15岁组、年龄≥15岁组。用双能X线骨密度仪(dual energyX-ray bone density instrument,DEXA)测量不同年龄段的雄性和雌性食蟹猴骨密度(bone mineraldensity,BMD)和骨矿含量(bone mineral content,BMC)。结果雄性食蟹猴1~12岁BMC从67 g增加到399 g,BMD从0.32 g/m2增加到0.57 g/m2;12~15岁雄性食蟹猴的BMC和BMD相对稳定,≥15岁BMC维持在(367.51±7.17)g,BMD维持在(0.56±0.06)g/m2。雌性食蟹猴1~10岁BMC从58 g增加到233 g,BMC最高值仅相当于雄性食蟹猴的58%;BMD从0.31 g/m2增加到0.47 g/m2,最高值相当于雄性食蟹猴的80%。雌性食蟹猴从10岁开始BMC显著下降,≥15岁的BMC维持在(166.63±6.21)g,BMD维持在(0.46±0.04)g/m2,分别相当于雄性食蟹猴的45%和80%。结论雄性食蟹猴12岁之前BMC和BMD逐年增长,是骨骼发育期;12~15岁的BMC和BMD相对稳定。雌性食蟹猴10岁之前BMC和BMD逐年增长,是骨骼发育期;从10岁开始BMC显著下降,10~15岁BMD相对稳定。雌性食蟹猴骨量峰值和BMD比雄性食蟹猴低。

双酚A和4-壬基酚对未成年雌性食蟹猴的生殖内分泌毒性作用

目的 研究4-壬基酚（4-NP）和双酚A（BPA）对未成年雌性食蟹猴的拟雌激素作用和内分泌干扰作用.方法 10只16月龄左右的雌性食蟹猴随机分为染毒组和对照组,每组5只.染毒组给予4-壬基酚（4-NP）50 ml/kg＋双酚A（BPA）200 mg/kg联合作用,对照组给予溶剂玉米油,给药剂量为5 ml/kg.每日早晨空腹灌胃,连续4周.每周称重一次,染毒结束时,检测血清雌激素水平、阴道脱落细胞成熟指数,取出子宫,测定其子宫湿重、子宫内膜及环形平滑肌厚度、子宫内膜上皮及腺上皮高度.结果 染毒组与对照组比较血清雌激素水平明显升高,阴道脱落细胞成熟指数显著增加（p＜0.05）,子宫湿重、子宫内膜及环形平滑肌厚度、子宫内膜上皮细胞及腺上皮高度显著增加,差异极显著（P＜0.01）.结论 双酚A和4-壬基酚对未成年雌性食蟹猴具有一定的生殖内分泌毒性作用.