棘孢曲霉利用蚕沙发酵产果胶酶的条件优化研究

果胶酶是能够分解果胶物质的多种酶类的统称。本研究以前期选育所得高产果胶酶菌株棘孢曲霉(Aspergillus aculeatus)DW75作为实验菌株,通过蚕沙固体发酵,对产果胶酶的发酵条件进行了优化。通过单因素试验和正交试验得出了该菌株的最佳产酶条件为:发酵培养基初始p H值5.0,最佳氮源硫酸铵添加量0.1%,培养基料水比(W/V)1.8∶2,发酵温度25℃,发酵时间144h。在此优化发酵条件下菌株的产酶能力可达到19.146U/m L,是优化前酶活10.166U/m L的1.88倍。

麒麟尾化学成分预实验

目的采用系统预试法对麒麟尾进行化学成分预实验,初步探索其可能的化学成分。方法采用试管反应法,通过多种指示剂和显色剂的沉淀反应或颜色反应,对麒麟尾的石油醚、水、95%乙醇提取物可能含有的化学成分进行初步研究。结果麒麟尾中可能含有糖、多糖、苷类、黄酮、酚类、鞣质、内酯、香豆素类、强心苷、甾体、三萜类、生物碱、油脂等化学成分。结论初步确定麒麟尾中具有多种活性成分,为麒麟尾的进一步开发利用提供了实验基础。

朱唇化学成分预实验及止血活性研究

目的:初步探讨朱唇可能的化学成分及研究其止血活性。方法:采用系统预实验法对朱唇的提取物可能含有的化学成分进行初步研究。并通过体外促凝血实验,研究朱唇的止血活性。结果:朱唇中可能含有多糖、苷类、黄酮等丰富化学成分。另外,朱唇提取物具有显著的止血作用。结论:初步鉴定朱唇含有丰富的活性成分,为深度研究和开发朱唇的植物资源提供实验基础。朱唇提取物具有较好止血活性,为寻找新止血药物提供基础。

甘蔗真菌病病害及生物防治的研究进展

文章论述了甘蔗常见真菌病害的种类及研究现状。通过对现有科研成果的研究,总结出目前阶段国内对于甘蔗真菌病害防治的不足和生物防治手段的缺失。通过对植物真菌病现有生防研究方法在植物真菌病害防治的讨论,提出针对甘蔗真菌病害的生物防治可借鉴的思考点和切入点,为甘蔗真菌病的生防工程提供思路。

黑曲霉发酵蚕沙产果胶酶工艺条件优化

蚕沙是蚕桑产业的主要废弃物,含有丰富的营养物质,是微生物发酵的良好原料。果胶酶是世界四大酶制剂之一,在工业生产中发挥着重要的作用。为了减少蚕沙随意丢弃带来的环境污染,充分挖掘蚕沙的利用价值,该研究以蚕沙为原料,利用黑曲霉发酵生产果胶酶。通过蚕沙固态发酵,首先采用单因素实验找出对果胶酶生产影响较大的因素,然后在单因素实验基础上利用正交实验对黑曲霉产果胶酶的条件进行优化。经单因素实验和正交实验得出黑曲霉固态发酵蚕沙的最佳产酶条件为:发酵初始pH 6,接种量0.5 mL,料液比(W/V)1∶1.7,基料(麸皮∶蚕沙)4∶6,发酵时间3 d,发酵温度30℃。在此发酵条件下,果胶酶活力达15.08 U/mL,是未优化前的1.87倍。研究结果可为桑蚕产业废弃资源的综合利用提供理论研究基础及新的思路。

火麻籽游离氨基酸提取工艺研究

以巴马火麻籽为材料,采用超声辅助乙醇提取火麻籽游离氨基酸。以游离氨基酸提取量为指标,在单因素试验的基础上通过响应面法优化提取工艺。结果表明:最优提取工艺为超声时间35min、超声温度46℃、超声功率175W、乙醇体积分数25%,在此条件下获得的火麻籽游离氨基酸提取量为(13.07±1.77)mg/g。

产果胶酶棘孢曲霉的筛选鉴定及微波诱变育种

本试验以果胶为唯一碳源设计筛选培养基,从蚕沙堆放地筛选出一株能利用蚕沙发酵产果胶酶的菌株D80,表型分析及ITS r DNA序列分子鉴定结果表明该菌株为棘孢曲霉(Aspergillus aculeatus)。利用微波照射对D80进行诱变育种,获得一株酶活力有大幅度提高的正突变株DW75,在初始发酵条件下测得诱变菌株酶活为10.166 U/m L,是未诱变菌株D80酶活的2.47倍,对菌株DW75进行5次传代培养发酵,测得酶活均较稳定,表明DW75是一株遗传性状稳定的正突变株。

华山矾多糖提取工艺优化及其抗氧化活性研究

【目的】优化华山矾多糖提取工艺,并研究其抗氧化活性,为华山矾植物资源的开发与利用提供理论依据。【方法】通过单因素试验和正交试验考察粉碎粒度、料液比、提取时间、提取温度4个因素对华山矾多糖提取效果的影响,并测定华山矾多糖对羟基自由基(·OH)和DPPH自由基(DPPH·)的清除能力。【结果】影响热水提取华山矾多糖的因素次序为:料液比>粉碎粒度=提取温度>提取时间,其最佳提取工艺条件为:粉碎粒度100目、料液比1∶60、提取温度100℃、提取时间60 min,在此条件下华山矾多糖提取率为1.23%;华山矾多糖对·OH和DPPH·具有较强的清除能力,半数清除率(IC50)分别为12.86和28.24μg/m L。【结论】采用正交试验优化得到的华山矾多糖热水提取工艺操作简便可行,且华山矾多糖具有较强的抗氧化活性,可作为天然抗氧化资源予以开发利用。

罗非鱼细菌性败血症病原菌嗜水气单胞菌拮抗菌株的筛选和鉴定

嗜水气单胞菌是动物和人类的致病菌,会引起水产动物败血症和人类腹泻病等,对我国已造成了巨大的经济损失。采用细菌的分离、纯化和筛选等步骤,获得对嗜水气单胞菌引起罗非鱼败血症有抑制作用的菌株LFJK-11,并对其形态特征和生理生化特性进行分析。结果显示,该菌株属于链霉菌属。通过对其16S DNA比对及其系统进化树构建,该菌株与链霉菌属相似性达到100%,该结果与其形态特征和生理生化鉴定结果一致。

高效液相色谱法同时测定遍山红中8种化学成分含量

【目的】建立高效液相色谱法（HPLC）测定遍山红中没食子酸、二氢杨梅素、原儿茶酸、芦丁、杨梅苷、齐墩果酸、槲皮素、山柰酚化学成分含量的方法，以期更好地控制遍山红的药材质量，为其药用开发提供科学依据。【方法】采用ZORBAX SB-C18色谱柱、乙腈-0.2%磷酸为流动相、流速0.6 mL/min、柱温28℃的HPLC测定广西都安县4个采集点（弄苍队、卜凡队、弄外队、百外队）遍山红中8种化学成分的含量。【结果】260 nm是测定混合对照品溶液和遍山红供试液中8种化学成分的最大波长。4个采集点遍山红中8种化学成分的含量范围：没食子酸1.53-1.75 mg/g、原儿茶酸1.11-1.28 mg/g、二氢杨梅素0.99-1.44 mg/g、芦丁0.34-0.42 mg/g、杨梅苷1.58-1.83 mg/g、齐墩果酸0.63-0.77 mg/g、槲皮素1.03-1.11 mg/g、山柰酚0.65-0.69 mg/g。8种化学成分质量浓度与峰面积线性关系及色谱峰分离效果均良好（r〉0.9990）；没食子酸、原儿茶酸、二氢杨梅素、芦丁、杨梅苷、齐墩果酸、槲皮素和山柰酚的进样量范围分别为7.20-43.20、3.36-20.16、5.92-35.52、1.60-9.60、6.40-38.40、3.68-22.08、3.20-19.20和3.52-21.12μg/mL，对应的平均加样回收率为101.72%、96.49%、97.04%、99.79%、99.80%、99.44%、101.52%和96.63%。【结论】建立的HPLC具有操作简便、准确可靠、灵敏度高、重现性好等优点，可用于遍山红的质量控制。

离瓣桑寄生石油醚部位化学成分研究

研究离瓣桑寄生(Helixanthera guangxiensis H.S.Kiu.)石油醚部位化学成分。采用硅胶柱色谱法进行分离纯化,通过理化性质和波谱分析鉴定化合物的结构。结果从离瓣桑寄生石油醚部位中分离得到12个单体化合物,分别鉴定为十六烷(1)、十八烷(2)、正二十烷(3)、维生素E(4)、β-香树脂素(5)、β-香树脂醇乙酸酯(6)、菜油甾醇(7)、豆甾醇(8)、β-谷甾醇(9)、木栓酮(10)、蒲公英甾醇(11)、羽扇豆醇(12)。12个化合物均为首次从该植物中分离得到,可为离瓣桑寄生药材化学成分研究提供参考。

朱唇的抑菌作用研究

目的:研究朱唇的体外抑菌作用。方法:用牛津杯法和二倍稀释法考察朱唇对供试菌的抑菌作用。结果:朱唇提取物对金黄色葡萄球菌、伤寒沙门菌、白色念珠菌、绿脓杆菌、表皮葡萄球菌和化脓性链球菌有不同程度的抑制作用。其中,对伤寒沙门菌的抑菌作用最强;乙酸乙酯部位抑菌作用最好。结论:朱唇提取物中存在丰富的抑菌活性物质,为寻找新抑菌药物提供物质基础。

麒麟尾总黄酮提取及其抗氧化作用研究

利用单因素试验及正交试验法考察麒麟尾(Epipremnum pinnatum)总黄酮提取的最佳工艺,并通过测定总黄酮对羟基自由基(·OH)和2,2-二(4-叔辛基)-1-苦肼基自由基(DPPH·)的清除作用研究其抗氧化性。结果表明,麒麟尾总黄酮提取的最佳工艺条件为超声时间35 min、超声温度90℃、料液比1∶15(g∶m L)、乙醇体积分数85%,在此条件下总黄酮得率为3.04%;抗氧化试验结果表明,麒麟尾总黄酮具有较强的抗氧化活性,对·OH和DPPH·自由基的IC50分别为2.355和0.143 mg/m L。

缫丝废水发酵产果胶酶菌种选育

果胶酶是分解果胶质酶类的总称,在食品、饲料工业上有很好的发展前景。本试验通过平板透明圈法筛选到一株能利用缫丝废水发酵产果胶酶的菌株G7,表型分析及rDNA ITS序列分子鉴定该菌株为沙福芽孢杆菌(Bacillus safensis)。利用紫外照射对G7进行诱变育种获得一株酶活力有大幅度提高的正突变株G7-7,在初始发酵条件下测得其酶活为12.39 U/mL,是G7酶活(5.25 U/mL)的2.36倍,对G7-7进行5次传代培养,测得酶活都较稳定,表明G7-7是一株遗传性状稳定的产酶优良的正突变株。

缫丝废水发酵生产菌体蛋白研究

菌体蛋白是一种微生物蛋白,是食品工业和饲料工业的重要蛋白来源。研究以产朊假丝酵母发酵菌种,利用缫丝废水为发酵原料,设计正交试验对菌体蛋白的发酵生产进行初步研究,试验结果表明:在发酵液初始pH值6.0、装液量75 mL/250 mL、接种量12%、发酵温度31℃、发酵时间84 h的最优发酵条件下,菌体蛋白产量可达2.26 g/L。

HPLC法同时测定华山矾中8种成分的含量

目的:建立HPLC法测定华山矾中没食子酸、原儿茶酸、绿原酸、芦丁、槲皮苷、槲皮素、山柰酚、大黄酚8种成分的含量。方法:采用ZORBAX SB-C_(18)色谱柱(100 mm×2.1 mm,3.5μm);流动相:乙腈-0.2%磷酸溶液,梯度洗脱;流速:0.6 mL/min;检测波长:258 nm;柱温:28℃;进样量:5μL。结果:没食子酸、原儿茶酸、绿原酸、芦丁、槲皮苷、槲皮素、山柰酚、大黄酚8种成分进样量分别在0.094~0.564μg、0.064~0.384μg、0.024~0.144μg、0.048~0.288μg、0.036~0.216μg、0.030~0.180μg、0.054~0.324μg、0.022~0.132μg范围内线性关系良好,r均大于0.999。结论:所建立的华山矾HPLC含量测定方法,简便可行,准确可靠,可用于华山矾的质量控制。

臭茉莉正丁醇提取物抑菌活性研究

目的:研究臭茉莉正丁醇提取物(ECP)的抑菌效果及机理。方法:采用纸片扩散法、微量肉汤稀释法测定表皮葡萄球菌、金黄色葡萄球、伤寒杆菌及绿脓杆菌对ECP的敏感性。并通过考察金黄色葡萄球菌(S.aureus)细胞膜、细胞壁及形态结构等的变化,研究ECP的抑菌活性及机理。结果:ECP对4种供试细菌均具有抑菌活性,其中对S.aureus的抑菌活性最强,其最低抑菌浓度(MIC)及最低杀菌浓度(MBC)均为0.5 mg/mL。ECP处理后S.aureus细胞内容物外泄、氧化损伤和细胞凋亡均明显增加,脱氢酶活性及蛋白含量均明显下降,扫描电镜(SEM)观察到菌体形态结构受损严重。结论:ECP对S.aureus的抑菌靶点可能为细胞膜、细胞壁、三羧酸(TCA)循环关键酶、蛋白质和遗传物质等,臭茉莉具有成为天然食品添加剂的潜力。

HPLC同时测定葵树子中5种化学成分的含量

本试验旨在建立HPLC测定葵树子中原儿茶酸、绿原酸、异槲皮苷、山柰酚、芹菜素5种化学成分含量的方法。采用ZORBAX Eclipse Plus C18色谱柱,以乙腈-0.2%磷酸为流动相梯度洗脱,263 nm波长检测。结果表明:5种成分进样量与峰面积线性关系及色谱峰分离效果均良好,平均加样回收率(RSD)(n=6)分别为101.60%(1.93%),98.65%(0.86%),96.36%(1.43%),98.62%(1.12%),100.62%(1.98%)。所建立的葵树子HPLC含量测定方法简便可行、准确可靠,可用于葵树子的质量控制。