多色荧光原位杂交及其在遗传毒理学中的应用

多色荧光原位杂交 (MFISH)在检测核酸序列、染色体和基因方面有着强大功能。由于染色体结构和数目畸变被认为是遗传毒性研究重要的生物学终点 ,而该方法可准确直观地评价暴露于职业、医疗和环境毒物后的染色体异常 ,因此以其为基础的各类方法在人类遗传学、生殖医学、尤其是遗传毒理学中将会得到广泛的应用。

农药杀虫剂的雄性生殖毒理学研究进展

本文就几类常用的杀虫剂对雄性生殖毒性的研究进展作一综述,并提出目前评价人类生殖功能危害仍存在的问题。

生物酶技术与酶免技术在农残快速分析方面的应用与研究进展

许多农药具有致癌、致畸、致突变作用.大量使用农药造成环境污染与食口农药残留所引发的毒性问题已引起许多国家的高度重视.

昆虫中枢DUM神经元受体和离子通道电生理学研究进展

背侧不成对中间神经元(DUM)是一类位于多种昆虫腹神经索神经节背侧的神经元,能自发产生内源性超射动作电位。在DUM神经元细胞膜表达多种受体和离子通道,且电生理特性有别于哺乳动物中枢神经元膜上同种类型的受体和离子通道。目前已证实其细胞膜上表达K+通道、电压依赖的Na+通道、Ca2+敏感的Cl-通道、Ca2+通道、氯离子通道、乙酰胆碱受体、谷氨酸受体等多种离子通道和受体。近年来因膜片钳(patch-clamp)技术进展和对受体和离子通道研究的深入,该类神经细胞已用于杀虫剂选择性神经毒性研究和杀虫剂离体筛选。

鬼臼毒素类物质生物活性的研究

目的:研究脱氧鬼臼毒素、β-阿朴苦鬼臼、鬼臼毒素和4′-去甲鬼臼毒素共四种鬼臼毒素类似物对3龄初淡色库蚊幼虫和5龄初菜青虫的毒杀和抑制生长发育活性。方法:采用WHO生物测试法和小叶碟添加法分别测定四种类似物对淡色库蚊和菜青虫的毒杀和拒食活性。结果:①脱氧鬼臼毒素和β-阿朴苦鬼臼对淡色库蚊的毒杀作用较明显,致死中浓度(LC50)分别是0.001 48和0.001 68 g/L。②四种化合物对淡色库蚊的生长发育有明显的抑制作用,与对照组相比,加药组的化蛹率相对较低。③脱氧鬼臼毒素、β-阿朴苦鬼臼和鬼臼毒素对菜青虫有毒杀作用,96 h的LC50分别是0.045 4、0.078 2和0.159 7 g/L。4′-去甲鬼臼毒素对菜青虫的毒杀活性很弱。④四种化合物对菜青虫都有拒食活性,但前三种拒食活性较强,其拒食中浓度(AFC50)分别是0.016 1、0.018 7、0.039 4和0.273 9 g/L。⑤四种化合物对菜青虫都有不同程度的抑制其生长发育现象,但作用的程度和方式不同,脱氧鬼臼毒素组的试虫全部死于5龄期,β-阿朴苦鬼臼毒素和鬼臼毒素的高浓度组不能化蛹,死于幼虫期,而4′-去甲鬼臼毒素组的试虫则表现出畸蛹等现象。结论:四种鬼臼毒素类似物对淡色库蚊和菜青虫毒杀和抑制生长发育活性之间的差异可能与结构上的差异有关。

新生大鼠海马神经元原代培养及钾离子通道特性研究

目的建立大鼠海马神经元原代培养方法,记录钾电流并观察其特性。方法无血清培养法进行海马神经元原代培养,从形态学和电生理学方面鉴定细胞活性;全细胞膜片钳技术记录钾电流,从药理学和动力学观察钾通道特性。结果经5～7d培养,获得胞膜完整、胞质均匀的海马神经元,并记录到典型的全细胞电压依赖性钾电流(IK)、延迟整流钾电流(IKDR),IK和IKDR均为外向电流,激活电压分别为-50mV和-40mV,随着去极化程度增加而增加,能被已知的钾通道的阻断剂4-AP和TEA-Cl阻断,IK和IKDR的半数最大激活膜电位(V1/2)分别为(22.1676±2.1778)mV(n=6)和(17.8457±1.7767)mV(n=6),斜率因子(κ)分别为(-6.1541±3.0541)mV(n=6)和(-6.5193±2.1894)mV(n=6)。结论在该实验条件下培养的海马神经元形态和生理特性良好,较好的表达了电压依赖性钾离子通道特性,适合电生理研究。

辛硫磷和氰戊菊酯联合杀虫作用及其神经毒理特征

测定了辛硫磷和氰戊菊酯联合应用对棉铃虫的生物活性及对蜚蠊中枢神经动作电位发放的影响。生物测定结果表明两者具有较强的增效杀虫作用 ,共毒系数为 2 3 7;辛硫磷和氰戊菊酯联合应用加药后 10 min,蜚蠊中枢神经动作电位呈间歇性发放 ,而且振幅和频率明显加强 ,平均发放振幅为 1.3 mv,最高发放振幅达 1.7mv。

三种鬼臼毒素类似物对甜菜夜蛾生物活性研究

室内测定了脱氧鬼臼毒素、β -阿朴苦鬼臼、鬼臼毒素 3种鬼臼毒素类似物对甜菜夜蛾 (Spodopteraex iguaH櫣ｂｎｅｒ) 3龄幼虫的生长发育抑制和毒杀活性。结果表明 ,(1)在 0 .0 1mg/ml、0 .0 0 1mg/ml浓度下 ,脱氧鬼臼毒素、β-阿朴苦鬼臼、鬼臼毒素对甜菜夜蛾幼虫生长发育均有抑制作用 ,3种鬼臼毒素两种浓度第 7d生长发育抑制率分别为 35 .33%和 2 9.33% ,32 .7%和 9.8% ,2 6 .4 3%和 4 .6 % ,且生长发育抑制率之间存在显著差异。 (2 ) 3种鬼臼毒素两种浓度对甜菜夜蛾幼虫均有毒杀作用 ,并随时间延长 ,死亡率增高 ,第 17d死亡率分别为 98.33%和6 3.33% ,76 .6 7%和 5 6 .6 7,16 .6 7%和 2 6 .6 7% ,与对照相比较 ,均有显著性差异。

男性FASL-844基因多态性与特发性无精子症及严重少精子症发病风险的研究

目的：研究FASL-844位点基因多态性在中国南方汉族男性人群中的分布，探讨其与特发性无精子症及严重少精子症发病风险的关系。方法：采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）方法，分析184例特发性无精子症及严重少精子症患者与236例正常生育男性FASL-844位点的基因型及等位基因频率，分析该基因多态性与特发性无精子症及严重少精子症之间的关系。结果：不育组与正常生育组FASL-844CT和TT基因型分布差异有显著性（P=0．024；P=0．008）。携带FASL-844TT基因型个体罹患特发性无精子症或严重少精子症的风险是CC基因型个体的2．76倍（95％CI：1．20～6．35）；将携带CC和CT基因型的个体合并，携带TT基因型的个体罹患特发性无精子症或严重少精子症的风险是（CC＋CT）基因型个体的2．90倍（95％CI：1．28～6．58）。结论：FASL-844基因多态性可能是中国南方汉族男性特发性无精子症及严重少精子症的遗传易感因素之一。

4种鬼臼毒素类似物对分月扇舟蛾的生物活性研究

室内测定了脱氧鬼臼毒素 、β-阿朴苦鬼臼、鬼臼毒素、4-去甲鬼臼毒素4种鬼臼毒素类似物对3龄分月扇舟蛾(Clostera anastomosis L.)幼虫的拒食、毒杀、生长发育抑制活性。结果表明:(1)4种化合物对杨树分月扇舟蛾均有拒食活性,24h的拒食中浓度分别为0.217、0.508、1.109、0.895mg/ml。(2)4种化合物对分月扇舟蛾幼虫均有毒杀作用,LC50分别为0.0176、0.0028、0.3335、0.1335mg/ml。(3)4种化合物对分月扇舟蛾幼虫生长发育有抑制作用,生长发育抑制率分别为46.13%、38.23%、33.23%、21.60%,使幼虫历期延长,且生长发育抑制活性之间存在显著差异。根据毒杀、拒食、生长发育抑制的试验结果分析认为:4种鬼臼毒素类似物对分月扇舟蛾的拒食、毒杀、生长发育抑制活性之间的差异可能与结构上的差异有关。

盐酸丁咯地尔对SD大鼠周围神经损害保护作用的初步实验研究

目的:探讨盐酸丁咯地尔对大鼠坐骨神经损害后恢复的影响。方法:以SD大鼠坐骨神经损伤建立周围神经损害动物模型,以坐骨神经传导速度和足趾间距为观察指标,考察盐酸丁咯地尔对坐骨神经损害后恢复的影响。结果:盐酸丁咯地尔高、低剂量组均能显著改善大鼠坐骨神经损害。结论:盐酸丁咯地尔对大鼠坐骨神经损害的恢复有积极的促进作用。

液相色谱串联质谱法同时检测饮用水中8种氨基甲酸酯类农药的方法学研究

目的：建立自来水中8种氨基甲酸酯农药（仲丁威，异丙威，速灭威，甲萘威，灭多威，残杀威，苯氧威，猛杀威）的液相色谱-串联质谱分析方法。方法：水样在离心或液液萃取后通过C18色谱柱，以含0．2％的甲酸的甲醇和0．2％的甲酸溶液进行梯度洗脱，采用电离喷雾电离方式（ESI＋），通过多反应监测（MRM）定量。结果：在20min完成分析，离心处理后8种农药在0．05～5μg/ml浓度范围内线性相关系数〉0．9973。加标回收率为96．67％～111．52％（添加水平分别为0．1，1和5μg/ml），相对标准偏差5．4％～14．2％，最低检出限介于0．02～0．03μg／ml。对0．1μg／L的加标样在液液萃取后回收率在75．5％～128．3％，相对标准差4．7％～31．5％。结论：本法灵敏度高，选择性强，分析时间短，适合于对水中该8种氨基甲酸酯类的分析。

重要环境污染物EEDs对人类健康影响的研究进展

二十一世纪是生命科学的世纪,医学科学和环境科学面临严峻挑战.全球工业化、都市化和现代化进程的加快,使人类征服自然的若干行为和成果正反向地惩罚人类本身.环境污染导致环境质量的日益恶化,已构成对全民健康的严重威胁,并将成为下个世纪社会经济可持续发展的重要制约因素.开展环境与人类健康关系的基础研究,是全球环境与医学科学工作者共同面临的一项重大课题.

胚胎干细胞的研究进展

胚胎干细胞包括来自囊胚内细胞群的ES细胞和来自胚胎原始生殖嵴的EG细胞 ,其中ES细胞维持不分化传代培养已达 80代。由于这些细胞具有高度复制能力及多向性分化潜能 ,近年来的研究使人们对胚胎干细胞的培养条件、表面分子标记和鉴定方法、诱导分化及其应用前景 ,以及当前研究方面存在的主要问题有了进一步的认识。

拟除虫菊酯对大鼠中枢谷氨酸和γ-氨基丁酸递质影响的免疫组织化学研究

目的 探讨拟除虫菊酯类农药对大鼠中枢神经系统谷氨酸（Ｇｌｕ）和γ－氨基丁酸（ＧＡＢＡ）免疫阳性神经细胞的影响及机制。方法 雄性ＳＤ大鼠经氯氰菊酯（７ ｍ ｇ／ｋｇ）或氯菊酯（７０ｍ ｇ／ｋｇ）连续腹腔注射染毒后，通过免疫组织化学和显微图像分析技术检测Ｇｌｕ 及ＧＡＢＡ阳性神经细胞分布和阳性细胞中递质含量。结果 氯氰菊酯或氯菊酯染毒组大鼠大脑皮层、海马Ｇｌｕ 免疫反应阳性细胞数目和阳性细胞面积比减少，阳性细胞积分吸光度降低，阳性细胞突起减少；而ＧＡＢＡ免疫阳性神经细胞数目和面积比增加，阳性细胞积分吸光度升高；在相同条件下，氯氰菊酯作用明显强于氯菊酯。结论 拟除虫菊酯引起中枢神经系统Ｇｌｕ 及ＧＡＢＡ平衡失调可能是其导致兴奋性神经毒性作用机制之一。

丙烯酰胺的毒性研究

丙烯酰胺作为一种常见的化工原料,在工业中广泛应用,是职业环境中的一种污染物。近年来,科学家提出丙烯酰胺存在于高温加热的淀粉类食品中,成为非职业人群暴露的一个重要途径,引起了有关各方的关注。本文就丙烯酰胺可能引起的神经、生殖、胚胎发育毒性以及与肿瘤的关系做一综合报道。

细胞周期素与膀胱癌关系的研究进展

细胞周期素是细胞周期调节的重要因子,和膀胱肿瘤的发生发展密切相关。细胞周期素的表达对判断肿瘤的生物学特征、预后有重要的意义,针对细胞周期素的特异抑制剂有望为膀胱癌的防治提供新的策略。