粘虫PuA7S细胞的悬浮培养、病毒增殖及其细胞克隆

粘虫PuA7S细胞能在TNMFH 培养基和Ex-Cell405,Ex-Cell400 两种无血清培养基中实现高密度悬浮培养.在100 r/m in 搅拌条件下,PuA7S细胞在上述培养基中的最大生长密度分别为1.65×106 细胞/m L, 3.50×106 细胞/m L和2.02×106 细胞/m L, 群体倍增时间分别为48 h,45 h和42 h.AcMNPV 能够在PuA7S细胞悬浮系统高水平增殖,在3 种培养基培养细胞中多角体产量分别为1.05×108 PIBs/m L,1.22×108 PIBs/m L和1.44×108 PIBs/m L,每个细胞中多角体数分别为105,122 和144.应用culture plate lnsert,获得了30 余株粘虫细胞克隆.