复方中药免疫增强剂的初步筛选及其毒性作用研究

[目的]通过小鼠体内试验,初步筛选出2个中药组方的免疫增强剂,并对筛选出的组方进行毒性试验。[方法]采用碳廓清法、耳片差重法分别观察复方中药对小鼠单核巨噬细胞(MΦ)吞噬活性及二硝基氯苯DNCB所致小鼠迟发型变态反应(DTH)的影响,对筛选出的组方Ⅱ进行急性毒性和最大耐受量测定。[结果]复方中药Ⅱ组在对小鼠单核巨噬细胞(MΦ)吞噬活性的影响和DNCB所致小鼠迟发型变态反应方面均优于复方中药Ⅰ组,且组方Ⅱ按照10 000 mg/kg体重灌胃给药,无法测出LD50值。最大耐受量为60 000 mg/kg体重。[结论]中药组方Ⅱ具有免疫增强作用,而且毒性级别为实际无毒级。

复方中药制剂对D型魏氏梭菌的抑制筛选试验

羊肠毒血症是由D型魏氏梭菌在羊肠道中大量繁殖并产生毒素所引起绵羊的一种急性毒血症。当前无特效治疗药物，一般采取强心、镇静、解毒等进行对症治疗。据报道【1】，复方黄连散对羊肠毒血症有一定的疗效，但临床应用效果不是很理想，故本试验对复方黄连散进行加减，通过药敏试验筛选出对D型魏氏梭菌具有较好抑制作用的方剂，为临床用药提供理论依据。

归参汤对小鼠的免疫作用试验

最近几年,免疫抑制性疾病、病毒感染性疾病的发病率逐年上升。然而目前常用的免疫增强剂大多是化学合成类,作用单一,毒副作用明显,易残留,且对于免疫抑制性疾病、病毒感染性疾病及多因子多层次的慢性病没有特异疗法。中药免疫增强剂提高动物免疫力，从而提高疫苗对动物的保护率，延长机体体液中高滴度抗体效价水平的持续时间可迅速控制疫情流行和蔓延，本试验以归参汤为研究对象，观察其对小鼠的免疫作用。

金归煎剂的抗炎作用研究

为了研究金归煎剂的抗炎作用,采用急性和慢性炎症模型来观察金归煎剂对二甲苯致小鼠耳廓肿胀、小鼠棉球肉芽肿及蛋清致大鼠足跖肿胀的影响。结果显示,金归煎剂能显著抑制二甲苯所致的小鼠耳肿胀、蛋清所致的大鼠足跖肿胀和小鼠肉芽组织的增生,表明金归煎剂具有明显的抗炎作用。

荆防煎剂的解热镇痛作用研究

为了研究荆防煎剂的解热、镇痛作用,试验采用酵母致热法、扭体法和热板法分别观察荆防煎剂的解热及镇痛作用。结果表明:荆防煎剂中剂量组和高剂量组能够显著降低酵母致热大鼠的体温和醋酸所致小鼠的扭体反应,提高热板所致小鼠的痛阈。说明荆防煎剂有显著的解热、镇痛作用。

归参汤对免疫抑制小鼠血清中IL-2、TNF-α和脾细胞Th1/Th2细胞因子的影响

为了探讨归参汤(GST)对免疫抑制小鼠血清中IL-2、TNF-α和脾细胞Th1/Th2细胞因子的影响。本试验采用环磷酰胺制造免疫抑制模型,利用双抗夹心ELISA法,观察归参汤对小鼠血清中IL-2、TNF-α的影响;RT-PCR法观察归参汤对小鼠脾细胞中INF-γ、IL-4、T-bet和GATA-3的mRNA表达的影响。结果显示:归参汤高剂量组可以显著增加免疫抑制小鼠血清中IL-2、TNF-α的含量(P<0.01),提高INF-γ的表达(P<0.05),降低IL-4的含量(P<0.05),升高T-bet(P<0.05),降低GATA-3的表达(P<0.05)。归参汤的免疫增强作用与升高血清中IL-2、TNF-α有关,且升高INF-γ/IL-4纠正免疫抑制小鼠Thl/Th2细胞因子的比例紊乱,其机制可能部分归因于对T-bet和GATA-3的mRNA表达的影响。

归参汤对免疫抑制小鼠的免疫增强作用试验

免疫抑制性疾病、病毒感染性疾病的发病率逐年上升，且没有特异疗法。中药因具有安全、有效、无害、残留低等优点，成为当前医药领域研究的热点，根据中医“正气存内，邪不可干”、“邪之所凑，其气必虚”的观点，从维护巩固体内正气、改善和增强机体抵抗力着手，笔者自拟复方中药制剂归参汤，应用小鼠为试验动物，对归参汤进行免疫增强作用的试验研究，为该药的临床应用提供了依据。

黄芩苷对NCI-H292细胞凋亡和LPS所致小鼠急性肺损伤的影响

为探讨黄芩苷对肺上皮细胞(NCI-H292细胞)凋亡和脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)所致小鼠急性肺损伤的影响。本试验采用Hoechst染色法和流式细胞法检测黄芩苷(60和120μg/L)对H2O2诱导NCI-H292细胞凋亡率的影响;腹腔注射LPS建立小鼠急性肺损伤模型,观察黄芩苷对LPS诱导的小鼠急性肺损伤的影响。将ICR小鼠随机分为4组,分别为空白对照组、LPS组、黄芩苷150mg/(kg·d)组和300mg/(kg·d)组,予以蒸馏水或黄芩苷灌胃,1次/d,连续3d,于试验第3d灌胃后1h,除空白对照组其他各组腹腔注射LPS(20mg/(kg·d)),造模12h后观察肺组织病理学变化,测定肺组织匀浆中髓过氧化物酶(MPO)的活力,用Western blotting检测肺组织胞浆型磷脂酶A2(cPLA2)及磷酸化cPLA2的含量。结果显示,Hoechst染色可见黄芩苷60和120μg/L预处理对H2O2诱导NCI-H292细胞凋亡均有保护作用;流式细胞法测定显示,与无黄芩苷刺激的H2O2组相比,黄芩苷作用后呈剂量依赖抑制NCI-H292细胞凋亡。小鼠腹腔注射LPS后12h,肺组织明显充血、水肿,并有大量炎性细胞浸润,肺组织MPO、cPLA2水平显著升高。与LPS组相比,黄芩苷的两个剂量均能显著降低MPO和cPLA2的水平,明显减轻内毒素所致的肺损伤。结果表明,黄芩苷对H2O2诱导的肺上皮细胞NCI-H292凋亡具有保护作用,能通过降低肺组织中MPO含量和cPLA2活性,减轻小鼠内毒素性肺损伤。