哺乳动物获能精子蛋白酪氨酸磷酸化研究进展

哺乳动物成熟精子是一种高度分化的生殖细胞,"获能"后具有受精能力,其中酪氨酸磷酸化过程是获能过程中非常重要的环节,参与调控获能相关的顶体反应和超激活运动。精子获能分子机理研究有助于解决临床男性不育以及男性避孕问题,同时为牲畜体外人工授精技术应用提供理论支持。目前哺乳动物获能精子蛋白酪氨酸磷酸化的分子机制研究主要集中在信号通路、蛋白质种类鉴定、影响因素等方面。

热应激对中国荷斯坦牛乳腺组织基因表达及信号通路的影响

夏季奶牛热应激问题给奶业生产造成了巨大的经济损失。为揭示奶牛发生热应激后乳腺组织应答反应的分子机制,通过研究热应激奶牛乳腺组织差异表达基因,探究差异基因对乳腺组织转录调控的影响。以8头中国荷斯坦牛为研究对象,分别采集热应激期(8月,温湿指数THI=83.8)和非热应激期(3月,THI=65.8)各4头奶牛乳腺组织,利用HiSeq2000进行转录组测序,并进行生物信息学分析,共发现96个差异表达基因(差异倍数>2),其中上调表达46个,下调表达50个。GO分类结果表明,注释到细胞组分、分子功能和生物学过程的差异基因数量分别为41、38和36个(P<0.05)。KEGG通路分析结果表明,差异基因共富集到18条信号通路(P<0.05),其中6条与疾病有关,9条与代谢有关,此外,与免疫应答相关的细胞因子-细胞因子受体相互作用和NOD样受体信号通路明显富集。通过比较热应激和非热应激奶牛乳腺组织转录组,分析差异基因相关信号通路,为进一步了解奶牛发生热应激反应的分子机制奠定基础。

香辣公干鱼罐头的加工工艺研究

研究香辣公干鱼罐头的加工工艺,探讨不同的加工条件(卤制时间、酱油与水的体积比、油炸温度、油炸时间)及调味料(白砂糖、味精、花椒粉、辣椒粉)质量分数对罐头感官品质的影响,并对产品进行理化指标测定。结果表明:公干鱼罐头的最佳加工条件为卤制时间为6 min,酱油∶水体积比为1∶5,油炸温度为180℃,油炸时间为40 s,白砂糖4%、味精0.5%、花椒粉0.2%、辣椒粉9%。通过此方法生产的公干鱼罐头色泽金黄,富有嚼劲,口感麻辣鲜香。

17℃保存对猪精子亚组分蛋白酪氨酸磷酸化的影响及中药保护作用

实验旨在分析17℃保存对获能精子蛋白酪氨酸磷酸化的影响,通过精子蛋白亚组分分离及酪氨酸磷酸化鉴定,研究精浆以及中药水提液对保存精子获能相关蛋白酪氨酸磷酸化的影响。选择获能指标-酪氨酸磷酸化分析新鲜猪精子和17℃保存猪精子,提取精子全蛋白、膜蛋白、核蛋白以及骨架蛋白,利用WB分离及鉴定酪氨酸磷酸化差异。结果显示:17℃保存条件下,获能精子在40~45、46~50 ku分子量膜蛋白酪氨酸磷酸化程度减弱;未获能精子在30~35 ku分子量胞浆蛋白磷酸化程度增强,出现似"获能"现象;精浆在保存中起到提供营养的作用但易导致细菌滋生;中药水提液对精子保存过程中的保护效果体现在精子获能培养后,鞭毛中段、主段酪氨酸磷酸化和新鲜精子无明显差异。

红线虫抗菌肽提取条件的工艺优化

以红线虫(Limnodrilus hoffmeisteri)为材料,采用0.01 mol/L EDTA-2Na的0.9%NaCl溶液为浸提液提取有抑菌活性的多肽,以料液比、时间、pH值对红线虫抗菌肽提取条件进行3因素3水平正交试验优化提取工艺,并对处理结果进行多重比较。试验结果表明,红线虫抗菌肽对大肠杆菌没有抑菌效果,对金黄色葡萄球菌有一定抑制效果;影响浸提效果的主要因素为料液比,次要因素为浸提时间和pH值,提取的最优处理组合:料液比1 g∶15 mL,浸提时间8 h,浸提液pH值为7.2。

双酚A暴露对哺乳动物精子蛋白酪氨酸磷酸化的影响

双酚A(BPA)是一种人工合成的雌激素性化合物,广泛存在于环境中,对哺乳动物内分泌有干扰作用,影响雄性生殖系统功能。本研究以新鲜猪精子、17℃保存猪精子以及小鼠精子为对象,采用体外培养方法,利用蛋白免疫印迹(WB)和免疫荧光技术,分析不同浓度BPA(0、0.1、1、10、100μmol·L^(-1))暴露对哺乳动物精子蛋白酪氨酸磷酸化的影响及分子机制。结果表明:低中浓度(0.1、1μmol·L^(-1))BPA暴露对新鲜猪获能精子蛋白酪氨酸磷酸化具有显著促进作用,但在高浓度(10、100μmol·L^(-1))BPA暴露下,猪获能精子蛋白酪氨酸磷酸化呈现降低趋势。BPA暴露下,小鼠获能精子蛋白酪氨酸磷酸化随BPA浓度的增加而增强,并且BPA影响猪和小鼠精子获能相关酪氨酸磷酸化修饰的蛋白种类不同。表明BPA暴露对哺乳动物精子的影响具有物种特异性。免疫荧光结果显示BPA对精子蛋白酪氨酸磷酸化的影响主要发生在鞭毛的中段和主段。

纳米氧化锌对17℃保存猪精子质量的影响

为了评价纳米氧化锌颗粒(ZnO NPs)对17℃猪精子保存质量的影响,本试验在17℃保存猪精子稀释液中添加20,50,100,200 mg/L ZnO NPs,对保存精子质量和功能进行分析。结果显示,与对照组比较,添加50 mg/L ZnO NPs可以显著提高保存精子的总抗氧化能力(P<0.05),降低保存精子丙二醛含量(P<0.05)。50,100,200 mg/L ZnO NPs处理组精子膜完整性显著高于对照组(P<0.05),骨架蛋白和膜蛋白磷酸化水平显著上调(P<0.05),100,200 mg/L处理组精子全蛋白磷酸化水平显著上升,且定位于精子鞭毛中段和主段。ZnO NPs添加不影响cAMP/PKA信号通路。推测ZnO NPs可能通过提高抗氧化能力来有效提高猪精子活力,消除过量丙二醛,提高猪精子蛋白磷酸化水平,从而提升膜完整性。