树突状细胞免疫功能与慢性丙型肝炎病毒感染相关分析

目的:探讨树突状细胞(DC)与慢性丙型肝炎患者体内病毒持续感染的关系。方法:密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(PBMC),贴壁培养2 h,吸去悬浮细胞,联合应用GM-CSF、IL-4刺激正常人及HC患者外周血DCD的增殖及成熟。观察DC外部形态;流式细胞仪检测各组的DC数量(CMRF-44标记法)及DC表面CD86、CD80、HLA-DR的表达水平;ELISA法检测培养7 d的DC上清中IL-12和IFN-的水平。结果:实验组DC细胞数为(7.5±3.3)×106/L,明显低于对照组的(14.9±5.1)×106/L(P<0.01)。实验组DC表面CD86、CD80和HLA-DR表达的阳性率分别为(52.16±13.12)%(、37.26±11.31)%、(29.76±13.34)%,对照组分别为(83.21±15.22)%(、47.93±12.19)%(、38.26±10.58)%,两者相差明显(P<0.05)。培养上清中IL-12平均值为(398±105)ng/L,干扰素γ平均值为(7912±832)ng/L,分别低于对照组(813±216)ng/L和(13407±1532)ng/L(P<0.05)。结论:DC的免疫功能低下与慢性丙型肝炎患者HCV感染的持续化有关。

小柴胡汤对刀豆蛋白A所致肝损伤的保护作用

目的:探讨加味小柴胡汤对小鼠肝损伤的保护作用及其作用机制。方法:采用赖氏法检测血清ATL、ATS值,采用双抗体夹心ABC-ELISA法测定血清TNF-α和IFN-γ含量。结果:加味小柴胡汤大剂量组ALT、AST及小柴胡汤组水平比模型组明显降低,差异有显著性(P<0.05);加味小柴胡汤小剂量组ALT、AST水平与模型组比较,无统计学意义(P>0.05);加味小柴胡汤大剂量组及小柴胡汤组与联苯双酯组比较,无统计学意义。加味小柴胡汤大剂量组及小柴胡汤组TNF-α和IFN-γ水平比模型组明显降低,差异有显著性(P<0.05),小柴胡汤组TNF-α和IFN-γ水平比加味小柴胡汤大剂量组明显增高(P<0.05),加味小柴胡汤大剂量组及小柴胡汤组与联苯双酯组比较,差异无统计学意义。结论:加味小柴胡汤对ConA所致肝损伤有明显的保护作用,其机制可能与抑制凋亡及免疫调节有关。

氧化苦参碱联合维生素C抑制胃癌细胞增殖的研究进展

胃癌是我国消化道常见的恶性肿瘤,在我国恶性肿瘤的发病中占第3位,严重影响了人们的生体健康。氧化苦参碱是从中草药苦豆子及苦参根中提取的,是一类苦参次碱-15-酮化合物,其对肿瘤细胞具有显著的抑制作用。维生素C是一种具有多种生物学功能的水溶性己糖衍生物,是天然的抗氧化剂,对肿瘤的发生有预防作用。本文对氧化苦参碱联合维生素C抑制胃癌细胞增殖进行综述。

胡黄连浸渍法提取最佳工艺条件的筛选

目的探讨浸渍法提取胡黄连的最佳工艺条件。方法采用浸渍法提取胡黄连,用不同浓度乙醇进行试验,确定提取溶剂;以提取的粒度、料液比、时间、温度为主要影响因素,胡黄连浸膏量为评价指标,采用单因素实验及正交实验对提取工艺进行优化设计,确定浸渍法提取胡黄连的最佳工艺条件。结果浸渍法提取胡黄连浸膏的最佳乙醇浓度为80%;对胡黄连浸膏量的影响程度依次为粒度>料液比>温度>时间,其中粒度、料液比、温度对浸膏量的影响具有统计学意义(P<0.05);提取条件为粒度20目、料液比1∶25、时间75 min、温度80℃时,浸膏量最高。结论浸渍法提取胡黄连,方法简单合理,其最佳工艺条件为粒度20目、料液比1∶25、时间75 min、温度80℃。

棘仁柏仁栀子油配方的安神与益智作用研究

目的:探讨棘仁、柏仁和栀子配伍组方的安神与益智作用。方法:将棘仁、柏仁和栀子的活性部位棘仁油、柏仁油和栀子油按3∶2∶l配成复方制剂,灌胃给药,观察其对小鼠自主活动和学习记忆的影响。结果:棘仁柏仁栀子油可使小鼠自主活动减少且无耐受现象,并可缩短小鼠水迷宫登台潜伏期。结论:棘仁柏仁栀子油配方有镇静安神和增强学习记忆的作用。

氧化苦参碱诱导人胃癌细胞凋亡及其机制

目的探讨氧化苦参碱(OM)诱导人胃癌细胞SGC-7901的细胞凋亡及其机制。方法应用四甲基偶氮唑盐(MTT)法、荧光显微镜及流式细胞仪(FCM)检测不同浓度的OM在不同的时间对SGC-7901细胞的抑制,免疫组织化学法检测胃癌细胞中Bcl-2蛋白表达。结果 MTT法显示,随着OM浓度的梯增及时间的延长,细胞的抑制率亦逐渐增强,呈时间、剂量依赖性。荧光显微镜下可见到细胞调亡形态。流失细胞仪分析,OM可阻滞SGC-7901细胞在G0/G1期。免疫组化结果显示,不同药物浓度可明显阻滞Bcl-2蛋白的表达,Bcl-2蛋白的表达下调。结论氧化苦参碱(OM)对人胃癌细胞SGC-7901有显著的抑制作用,其机制可能与Bcl-2蛋白表达下调有关。

胡黄连有效成分的提取及药理作用的研究进展

胡黄连为玄参科属植物,具有抗疟、利胆、苦味健脾、治疗肝炎及尿路感染等作用,在临床用于湿热泻痢、小儿疳疾、吐血、黄疸、目赤肿痛、痈肿疮疡、痔疮肿毒及衄血等多种病症。胡黄连主要产于国内的西藏、云南及四川等高原地区,其有效成分复杂,主要为环烯醚萜类、葫芦素糖苷类、酚苷类等。本文就胡黄连的化学成分、提取分离、药理作用等几个方面展开综述,阐述了胡黄连近年来的研究现状。

特异性环氧合酶-2抑制剂SC236诱导胃癌细胞株凋亡的实验研究

目的:探讨环氧合酶-2(COX-2)特异性抑制剂SC236诱导胃癌细胞株SGC7901凋亡的机制。方法:SC236对人胃癌来源的SGC7901细胞进行凋亡诱导。以吖啶橙染色后荧光显微镜下观察凋亡细胞形态并计算凋亡指数。Western blot法检测凋亡调节蛋白Bcl-2、Bak、Bax与CED-9的表达情况。流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果:SGC7901细胞经SC236作用后,细胞中凋亡促进因子Bak的表达水平明显增高、凋亡抑制因子Bcl-2的表达水平显著下降、而凋亡促进因子Bax和凋亡抑制因子CED-9表达水平无明显变化。细胞凋亡指数或凋亡率则随SC236浓度的增加和作用的时间延长而升高。结论:COX-2特异抑制剂SC236可通过上调凋亡促进因子Bak表达和下调凋亡抑制因子Bcl-2表达而诱导胃癌细胞株SGC7901的凋亡。

病毒感染性疾病中血小板减少机制的研究进展

血小板的生物学功能是参与凝血和维持血管系统完整性。血小板减少症见于多种血液系统疾病、放化疗损伤及药物相关性血小板减少,也可作为多种疾病的伴发症状,如肿瘤和感染等。病毒感染性疾病可导致血小板减少,其可能的机制主要有血小板生成减少和消耗增加,且不同病毒导致血小板减少的机制也不尽相同。本文对新型冠状病毒(SARS-CoV-2)、汉滩病毒、登革热病毒及人类免疫缺陷病毒(HIV)等病毒感染性疾病中血小板减少机制研究进展进行综述,特别是新近发现的注射新冠疫苗后发生血栓性血小板减少可能的机制,可为病毒感染性疾病中血小板减少的预防与治疗提供新的思路。

CD248抗体IgG78抑制HFL-1人胚肺成纤维细胞的增殖、迁移

目的研究CD248的全人源单克隆抗体IgG78对HFL-1人胚肺成纤维细胞生物学功能的影响。方法表达和纯化CD248人源性抗体IgG78,用IgG78处理HFL-1细胞后,利用CCK-8实验检测细胞增殖,Transwell^(TM)实验检测细胞迁移,流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期,Western blot法检测CD248及Ⅰ型胶原蛋白α1(COL1A1)和α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达变化。结果IgG78可有效抑制HFL-1细胞的增殖和迁移,诱导细胞凋亡,并引起细胞周期的G1期阻滞。IgG78还可抑制HFL-1细胞中CD248及纤维化相关蛋白COL1A1和α-SMA的表达。结论CD248抗体IgG78可抑制成纤维细胞的生物学活性及纤维化相关蛋白的表达,该抗体对CD248特异性增高的肿瘤或纤维化疾病的治疗有潜在应用价值。

重组人血管内皮抑制素联合XELOX方案治疗晚期胃癌的临床疗效

目的：观察重组人血管内皮抑制素联合XELOX方案（奥沙利铂＋卡培他滨）治疗晚期胃癌的近期疗效和安全性。方法：将确诊的51例胃癌患者随机分为两组：对照组23例，采用XELOX方案：奥沙利铂130mg／m2，dl，卡培他滨1000mg／m2，dl～14，4周为1周期；治疗组28例，化疗方案、剂量、周期均同对照组，并于第1～14d每日给予重组人血管内皮抑制素7．5rng错静滴。治疗3个周期后进行疗效评价及副毒反应。结果：治疗组有效率为60．7％，对照组为30．4％，两组差异有统计学意义（X^2=4．6471，P〈0．05）。疾病进展时间（TTP）及中位生存期（MST）治疗组分别为7．1月、11．8月；对照组为5．6月、9．6月，差异无统计学意义（P〉0．05）；治疗组副毒反应发生率与对照组相比无显著增加（P〉0．05）。结论：重组人血管内皮抑制素联合XELOX方案治疗晚期胃癌能提高临床疗效。

AG490对甲状腺髓样癌TT细胞放射敏感性的影响

为了研究AG490对甲状腺髓样癌TT细胞放射敏感性,本研究选择甲状腺髓样癌TT细胞作为研究对象,并采用不同浓度AG490 (0, 25μmol/L, 50μmol/L, 100μmol/L)处理细胞,利用MTT法、流式细胞术和克隆形成实验分别对细胞增殖、凋亡及放射敏感性进行检测,并采用Western blotting法检测各组JAK2、p-STAT3、Bcl-2、Bax蛋白表达。结果表明,与A组相比,B、C、D组的抑制增殖作用增强,呈浓度和时间依赖性;随着AG490药物浓度的增加凋亡率逐渐增加;与A组相比,C组细胞存活分数显著降低;JAK2、p-STAT3和Bcl-2的蛋白表达量随着药物浓度的升高而逐渐降低,Bax蛋白表达量随着药物浓度的升高而逐渐增加。AG490对甲状腺髓样癌TT细胞增殖有抑制作用,可促进细胞凋亡,提高放射敏感性。

柴胡皂苷D通过Akt/mTOR通路调控胰腺癌Panc-1细胞凋亡及自噬

该研究旨在探讨柴胡皂苷D(saikosaponin D)对胰腺癌Panc-1细胞增殖、凋亡和自噬的影响及其作用机制。采用细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒(CCK-8)测定7、10、13、16、19、22、25、28μmol·L^(-1)柴胡皂苷D对Panc-1细胞增殖活性的影响;分别设置对照组(0μmol·L^(-1))、柴胡皂苷D低浓度组(10μmol·L^(-1))和柴胡皂苷D高浓度组(16μmol·L^(-1)),采用平板克隆形成实验检测柴胡皂苷D对Panc-1细胞克隆形成率的影响;采用苏木素-伊红(HE)染色观察柴胡皂苷D作用后细胞形态的变化;采用Hoechst 33258荧光染色检测柴胡皂苷D对细胞凋亡的影响;采用细胞自噬染色检测试剂盒(MDC法)检测柴胡皂苷D对细胞自噬的影响;采用蛋白免疫印迹(Western blot)法和免疫细胞化学法检测柴胡皂苷D对B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)、剪切的caspase-3(cleaved caspase-3)、自噬相关蛋白Beclin1、微管相关蛋白轻链3(LC3)、蛋白激酶B(Akt)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)表达水平及分布的影响。结果显示,与对照组相比,柴胡皂苷D显著抑制Panc-1细胞增殖,且呈时间和浓度依赖性;柴胡皂苷D作用后细胞克隆形成率显著降低。与对照组相比,柴胡皂苷D处理组细胞萎缩变小,并伴有凋亡小体形成;细胞凋亡率显著升高,自噬小泡堆积显著增多;Bax、cleaved caspase-3、Beclin1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ的表达显著升高,Bcl-2、caspase-3、p-Akt/Akt、p-mTOR/mTOR的表达显著降低,均主要分布在细胞质中。因此,柴胡皂苷D可通过抑制Akt/mTOR通路抑制胰腺癌Panc-1细胞增殖并诱导其凋亡及自噬。

抗原特异性HLA-E限制性CD8^(+)T细胞在感染性疾病中的作用

HLA-E是非经典的HLAⅠ类分子中的重要成员之一。在免疫系统中,HLA-E不仅可以作为NK细胞和CD8^(+)T细胞表面CD94和NKG2A/C的配体介导细胞生物学功能,而且可以提呈抗原表位给CD8^(+)T细胞的TCR识别,介导CD8^(+)T细胞应答。HLA-E可结合来自病原体、肿瘤以及自身抗原等的多种抗原表位,并将其提呈给CD8^(+)T细胞,通过与CD8^(+)T细胞上的不同受体相互作用介导不同的免疫效应。在感染性疾病中,HLA-E可提呈病原体来源的抗原表位给CD8^(+)T细胞的TCR特异性识别,激活CD8^(+)T细胞,增强适应性免疫应答。因此,HLA-E限制性CD8^(+)T细胞是免疫应答过程中的一个重要参与者。该文对HLA-E限制性CD8^(+)T细胞在感染性疾病中的作用及机制进行综述。

纳米孔测序技术检测正常人群咽拭子微生物本底的初步分析

目的分析咽拭子中存在多种少量的机会致病性微生物(即病原体本底),为测序数据提供初步分析结果。方法利用牛津纳米孔测序技术(oxford nanopore technologies)对12个健康人的咽拭子样本进行测序并分析微生物序列。结果咽拭子样本中主要是常见的宿主共生菌群,具体为拟杆菌门(29.000%~55.000%)、变形菌门(12.000%~24.000%)、厚壁菌门(4.000%~7.000%)、梭杆菌门(2.000%~3.000%)和放线菌门(0.300%-1.000%)等。在拟杆菌门中,普雷沃菌(82.000%~93.000%)、黄杆菌(2.000%~9.000%);变形菌门中,γ-变形菌(61.000%~79.000%)、β-变形菌(5.000%~28.000%);厚壁菌门中,链球菌(35.000%~61.000%)、葡萄球菌(2.000%~7.000%)、韦荣球菌(17.000%~33.000%)、梭菌(2.000%~5.000%)、微单胞菌(0.6000%~1.000%);梭杆菌门中,梭杆菌(54.000%~84.000%)、纤毛菌(9.000%~25.000%);放线菌门中,放线菌(19.000%~47.000%)。最后,还在样本中检测出了少量的病毒,鉴定结果显示这些病毒主要是寄生在口腔中的细菌噬菌体。结论研究为临床宏基因组测序技术在呼吸道样本中病原体分析奠定了基础。