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链霉菌FJS31-2 abx R2基因克隆表达及蛋白纯化
1
作者
李泽鑫
王兰林
+5 位作者
栗午娟
杨逸
张悦萌
高佩舒
田红英
岳昌武
《化学与生物工程》
CAS
2023年第12期34-38,共5页
利用原核表达系统获得链霉菌FJS31-2 AbxR2重组蛋白,并进行纯化。通过PCR扩增abx R2基因,将扩增产物克隆至pET32a质粒上构建重组质粒pET32a-abx R2;将重组质粒转化至大肠埃希菌Rosetta(DE3)感受态细胞中进行IPTG诱导表达,并通过尿素洗...
利用原核表达系统获得链霉菌FJS31-2 AbxR2重组蛋白,并进行纯化。通过PCR扩增abx R2基因,将扩增产物克隆至pET32a质粒上构建重组质粒pET32a-abx R2;将重组质粒转化至大肠埃希菌Rosetta(DE3)感受态细胞中进行IPTG诱导表达,并通过尿素洗涤方式对AbxR2重组蛋白进行纯化。酶切和测序结果均证实重组质粒pET32a-abx R2构建成功;在菌液OD 600值为0.6、28℃、110 r·min^(-1)、1.0 mmol·L^(-1) IPTG诱导4 h时,AbxR2重组蛋白的表达效果较好;采用尿素洗涤方式纯化AbxR2重组蛋白,可得到单一特异蛋白条带,效果较好。为研究AbxR2蛋白的结构和功能及提高Zunyimycins产量奠定了基础。
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关键词
链霉菌
AbxR2
基因簇
原核表达
蛋白纯化
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职称材料
题名
链霉菌FJS31-2 abx R2基因克隆表达及蛋白纯化
1
作者
李泽鑫
王兰林
栗午娟
杨逸
张悦萌
高佩舒
田红英
岳昌武
机构
延安大学基础医学院、延安市微生物药物创新及转化重点实验室
出处
《化学与生物工程》
CAS
2023年第12期34-38,共5页
基金
陕西省自然科学基础研究计划项目(2021JM-416),大学生创新创业训练计划项目(S202110719117)。
文摘
利用原核表达系统获得链霉菌FJS31-2 AbxR2重组蛋白,并进行纯化。通过PCR扩增abx R2基因,将扩增产物克隆至pET32a质粒上构建重组质粒pET32a-abx R2;将重组质粒转化至大肠埃希菌Rosetta(DE3)感受态细胞中进行IPTG诱导表达,并通过尿素洗涤方式对AbxR2重组蛋白进行纯化。酶切和测序结果均证实重组质粒pET32a-abx R2构建成功;在菌液OD 600值为0.6、28℃、110 r·min^(-1)、1.0 mmol·L^(-1) IPTG诱导4 h时,AbxR2重组蛋白的表达效果较好;采用尿素洗涤方式纯化AbxR2重组蛋白,可得到单一特异蛋白条带,效果较好。为研究AbxR2蛋白的结构和功能及提高Zunyimycins产量奠定了基础。
关键词
链霉菌
AbxR2
基因簇
原核表达
蛋白纯化
Keywords
Streptomyces sp.
AbxR2
gene cluster
prokaryotic expression
protein purification
分类号
Q78 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
链霉菌FJS31-2 abx R2基因克隆表达及蛋白纯化
李泽鑫
王兰林
栗午娟
杨逸
张悦萌
高佩舒
田红英
岳昌武
《化学与生物工程》
CAS
2023
0
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参考文献
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