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利用体细胞核移植技术生产表达红色荧光蛋白的猪转基因克隆胚胎研究
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作者 康锦丹 尹熙俊 +4 位作者 赵明辉 梁爽 刘希 李文学 崔成哲 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2011年第12期7279-7282,共4页
[目的]为生产转基因克隆猪奠定基础。[方法]以反转录病毒转染的带有红色荧光蛋白(RFP)基因的猪胎儿成纤维细胞作为核移植的核供体,利用体细胞克隆技术研究红色荧光蛋白克隆胚胎体外发育情况。[结果]RFP转基因细胞的融合率为83.87%,与未... [目的]为生产转基因克隆猪奠定基础。[方法]以反转录病毒转染的带有红色荧光蛋白(RFP)基因的猪胎儿成纤维细胞作为核移植的核供体,利用体细胞克隆技术研究红色荧光蛋白克隆胚胎体外发育情况。[结果]RFP转基因细胞的融合率为83.87%,与未转基因细胞(80.56%)相比无显著差异(P>0.05);RFP转基因体细胞重构胚体外囊胚率为8.67%,与未转基因细胞组(6.56%)相比无显差异著(P>0.05);RFP转基因体细胞重构胚移植于15头受体后,尚无受孕个体。[结论]利用转红色荧光蛋白基因的细胞为供体细胞,能够成功克隆出转基因胚胎,并获得转基因囊胚。 展开更多
关键词 转基因 红色荧光蛋白 核移植
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转Fat-1基因体细胞克隆草原红牛研究 被引量:3
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作者 康锦丹 高威威 +1 位作者 高青山 张立春 《延边大学农学学报》 2012年第1期6-10,20,共6页
Fat-1基因的转基因动物克隆,为研究ω-3多不饱和脂肪酸的功能提供了高效、准确的医学、营养学动物模型。试验成功建立了草原红牛耳部成纤维细胞系,将Fat-1基因转染到草原红牛成纤维细胞,获得转基因阳性细胞克隆。以转基因细胞为核供体,... Fat-1基因的转基因动物克隆,为研究ω-3多不饱和脂肪酸的功能提供了高效、准确的医学、营养学动物模型。试验成功建立了草原红牛耳部成纤维细胞系,将Fat-1基因转染到草原红牛成纤维细胞,获得转基因阳性细胞克隆。以转基因细胞为核供体,体外成熟牛卵母细胞为核受体构建转基因克隆囊胚,比较未转基因与转基因克隆胚胎的体外发育情况。结果表明,体细胞重构胚体外囊胚率分别为26.04%和26.04%,两者之间无显差异著(P>0.05)。转Fat-1基因的草原红牛重构桑葚胚或早期胚胎移植到延边黄牛子宫内,有7头妊娠,但没能够获得妊娠足月个体。 展开更多
关键词 Fat-1基因 体细胞克隆 草原红牛
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VE对犬卵母细胞体外成熟的影响 被引量:2
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作者 刘希 康锦丹 +2 位作者 李所 金花子 尹熙俊 《延边大学农学学报》 2012年第1期16-20,共5页
在基础培养液中分别添加浓度为0,50,100,200μmol/L的VE,研究不同浓度VE对成熟情况的影响。结果表明,体外培养48h后VE浓度为50μmol/L组GV期的比率显著高于100和200μmol/L组(P<0.05);100μmol/L组GVBD期的比率显著低于其它组(P<0... 在基础培养液中分别添加浓度为0,50,100,200μmol/L的VE,研究不同浓度VE对成熟情况的影响。结果表明,体外培养48h后VE浓度为50μmol/L组GV期的比率显著高于100和200μmol/L组(P<0.05);100μmol/L组GVBD期的比率显著低于其它组(P<0.05);达到MI-MII期的比率各组之间差异不显著(P>0.05),但100μmol/L组MI-MII期的比率相对较高。体外培养72h后,VE浓度为200μmol/L组的GV期的比率显著高于对照组和100μmol/L组(P<0.05),与50μmol/L组之间差异不显著(P>0.05);达到GVBD和MI-MII期的比率各组之间均差异不显著(P>0.05)。因此,VE对犬卵母细胞的核成熟没有明显促进作用。 展开更多
关键词 卵母细胞 体外成熟 VE
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Production of Transgenic Pig Clone Embryo Expressed the Red Fluorescent Protein by Using the Somatic Cell Nucleus Transplantation Technology
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作者 康锦丹 尹熙俊 +4 位作者 赵明辉 梁爽 刘希 李文学 崔成哲 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2011年第2期287-290,307,共5页
[Objective] The research aimed to lay the foundation for producing the transgenic clone pig.[Method] The pig fetus fibroblast with the red fluorescent protein(RFP)gene that was transfected by the retrovirus was as t... [Objective] The research aimed to lay the foundation for producing the transgenic clone pig.[Method] The pig fetus fibroblast with the red fluorescent protein(RFP)gene that was transfected by the retrovirus was as the donor of nucleus transplantation.By using the somatic cell cloning technology,the development situation in vitro of clone embryo with RFP was studied.[Result] The fusion rate of RFP transgenic cell was 83.87% which had no significant difference with 80.56% of non-transgenic cell(P0.05).The blastula rate in vitro of RFP transgenic somatic cell reconstructed embryo was 8.67% which had no significant difference with 6.56% of non-transgenic cell(P0.05).After the reconstructed embryo of RFP transgenic somatic cell was transplanted into fifteen receptors,there was no conception individual.[Conclusion] The transgenic cell with the red fluorescent protein as the donor could successfully clone the transgenic embryo and obtain the transgenic blastula. 展开更多
关键词 TRANSGENE Red fluorescent protein Nucleus transplantation Pig
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