抑制UCHL1对猪卵母细胞体外成熟、透明带泛素化及多精入卵的影响

试验旨在研究抑制泛素羧基末端水解酶-1(UCHL1)对猪卵母细胞体外成熟、透明带泛素化及多精入卵的影响。利用DAPI染色、Hoechst染色及SDS-PAGE等方法检测猪卵母细胞体外成熟率、透明带泛素化水平及多精入卵等情况。结果表明,添加不同浓度UCHL1抑制剂(10、20、25、30μmol/L,二甲基亚砜(DMSO)及对照组)体外培养猪卵母细胞46h后,对照组成熟率为86.22%,而30μmol/L UCHL1抑制剂组的成熟率为15.30%,且各处理组间成熟率差异显著(P<0.05);经Western blotting检测,各处理组的透明带在约61、80、106ku处均发生不同程度的泛素标记,通过灰度值分析差异显著(P<0.05);进行体外受精试验后,发现对照组透明带精子黏附数最多,精子入卵数较少,添加30μmol/L UCHL1抑制剂组的透明带精子黏附数最少,几乎没有精子入卵。结果显示,UCHL1抑制剂对猪卵母细胞的体外成熟有一定影响,随着UCHL1抑制剂浓度的增加,透明带发生泛素化的程度逐渐降低,且UCHL1可调节透明带精子黏附及多精入卵。

猪卵母细胞体外成熟中添加PPi改变透明带泛素化水平及精卵结合能力

本研究主要目的是评价猪卵母细胞成熟培养中添加无机磷酸盐焦磷酸（PPi）对卵母细胞成熟、透明带泛素化水平及精卵结合能力的影响。试验设置对照组及0.1、1、5μg/m L 3个添加PPi处理组,检测卵母细胞成熟率、透明带泛素化水平及精卵结合情况。结果显示：1μg/m L PPi处理组卵母细胞成熟率为75.06%,显著高于对照组（P〈0.05）;1μg/m L PPi处理组透明带泛素化水平显著高于其他各组（P〈0.05）;1μg/m L PPi处理组透明带酶解时间为278.93 s,显著低于对照组（P〈0.05）;1μg/m L PPi处理组精子黏附率为83.24,显著低于对照组（P〈0.05）。结论：PPi显著提高卵母细胞体外成熟率和透明带泛素化水平,降低透明带溶解时间和精子黏附率。