虫草素通过激活AMPK和MAPK信号通路抑制脂代谢抑制人胃癌细胞的增殖和迁移

目的探讨虫草素对胃癌细胞增殖和迁移的抑制作用及其分子机制。方法用(0、25、50、100)μmol/L虫草素处理MGC-803细胞、(0、5、25、50)μmol/L虫草素处理HGC-27细胞48 h。采用噻唑蓝(MTT)法和5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(EdU)法检测细胞增殖,集落形成实验检测细胞集落形成能力,划痕实验和Transwell小室实验检测细胞迁移能力;Hoechst33342染色观察染色质凝集情况,异硫氰酸荧光素标记的膜联素V/碘化丙啶(annexinⅤ-FITC/PI)双标记结合流式细胞术检测胃癌细胞凋亡;Western blot法检测脂代谢相关蛋白固醇调节元件结合转录因子1(SREBF1)、脂肪酸合成酶(FASN)、乙酰辅酶A羧化酶1(ACC1)、上皮间质转化(EMT)相关标志物上皮钙黏素(E-cadherin)、波形蛋白(vimentin)、锌指转录因子Snail、Slug,基质金属蛋白酶2(MMP2)、MMP9,腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、磷酸化的AMPK(p-AMPK)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路相关蛋白c-Jun氨基末端激酶(JNK)、磷酸化的JNK(p-JNK)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)、磷酸化的p38 MAPK(p-p38 MAPK),凋亡相关蛋白裂解型胱天蛋白酶9(c-caspase-9)、裂解型胱天蛋白酶3(c-caspase-3)和裂解型多腺苷二磷酸核糖聚合酶(c-PARP)蛋白表达。结果虫草素显著抑制胃癌细胞的增殖、集落形成及横向和纵向迁移能力;虫草素处理后癌细胞核凝集、破裂增加、凋亡率增加、c-caspase-3、c-caspase-9、c-PARP表达增加,E-cadherin蛋白表达增加,vimentin、Snail、Slug、SREBF1、FASN、ACC1、MMP2、MMP9蛋白表达明显减少;p-AMPK、p-JNK、p-p38 MAPK水平明显升高。结论虫草素通过活化AMPK、MAPK信号通路抑制脂代谢、EMT过程抑制人胃癌细胞的增殖和迁移。