NERP-1对大鼠下丘脑室旁核MNCs活动的影响机制

目的分析神经内分泌调节肽(NERP)-1对大鼠下丘脑室旁核(PVN)神经分泌大细胞(MNCs)活动的影响及其对PVN MNCs活动调节的突触机制。方法实验动物选用出生2~3周龄的雄性Wistar系大鼠,异氟烷麻醉后立即断头取出脑,随后用振动切片机制备厚度为250μm的含PVN的下丘脑切片。在室温(24~25℃)条件下,将切片置于持续充有混合气体(95%O_(2)和5%CO_(2))的人工脑脊液中孵育1 h以上。电极的阻抗为5~7 MΩ。使用膜片钳放大器(Axopatch-200B)及Clampex数据采集软件记录PVN神经分泌细胞的电活动,NERP-1、河豚毒素(TTX)和犬尿喹啉酸(KYC)经蠕动泵灌流给药。在电生理记录结束后,用4%多聚甲醛溶液将脑片行固定24 h后,进行二氨基联苯胺(DAB)染色、显微照相,观察所记录神经分泌细胞的组织形态学特点,确认所记录细胞为PVN NMCs。使用Clampfit10.4和MiniAnalysis(6.0)软件进行电生理实验数据分析。结果在电流钳记录模式下,PVN MNCs对去极化电流刺激表现出明显的外向整流电流。给予NERP-1(100 nmol/L)可导致PVN神经分泌大细胞的放电频率显著降低并伴随膜电位超极化,冲洗后恢复到给药前水平。给予非选择性离子型谷氨酸受体拮抗剂犬KYC可阻断NERP-1引起的PVN MNCs放电频率降低和膜超极化作用。NERP-1对PVN MNCs的自发性放电活动的抑制作用不受GABAA受体阻断剂的影响。在电压依存性钠通道阻断剂TTX的存在下,NERP-1显著降低NMCs的微小兴奋性突触后电流(mEPSCs)的发生频率,但对mEPSCs的振幅没有显著影响。结论NERP-1下调下丘脑PVN MNCs兴奋性谷氨酸能传入效能,降低PVN MNCs的兴奋性,提示NERP-1通过间接方式调节PVN缩宫素和血管紧张素神经元的分泌活动。

300例HBsAg阳性产妇对新生儿乙肝血清学模式和HBV DNA的影响及临床意义

目的针对母婴垂直传播,分析300例HBsAg阳性乙肝产妇所产新生儿的乙肝血清学标志物的表现模式及HBV DNA拷贝数,探讨其对宫内胎儿的影响及临床意义;同时,根据婴儿出生7个月后的随访结果,进一步探讨抗病毒药物对乙肝产妇母婴阻断的效果。方法回顾300例HBsAg阳性孕妇及其所生婴儿的血清乙肝标志物和HBV DNA拷贝数,对结果进行统计学分析。同时,对出生7个月后新生儿进行随访,收集其乙肝五项和HBV DNA检测结果,对结果进行汇总和统计学分析。结果300例HBsAg阳性乙肝产妇所产新生儿的乙肝五项模式共有13种。其中,179例HBsAg(+)HBeAg(-)产妇所产新生儿的乙肝五项模式有9种,121例HBsAg(+)HBeAg(+)产妇所产新生儿的乙肝五项模式有11种。新生儿血清中的HBeAg水平与其母亲的HBV DNA高拷贝数和强传染性有关。在HBsAg阳性母亲中,血清HBV DNA阳性的母亲所生婴儿被感染的危险度高于血清HBV DNA阴性的母亲所生婴儿,两组比较差异有统计学意义。HBV DNA阳性的产妇自28周起开始服用药物(替比夫定/富马酸替诺福韦二吡呋酯)组(69例)和未服药组(127例)其所产新生儿HBV DNA比较,差异具有统计学意义。结论HBsAg阳性孕妇所生婴儿的乙肝血清学标志物模式具有多样性。孕妇HBeAg和HBV DNA阳性是宫内胎儿HBV感染的高危因素。乙肝孕妇怀孕28周服用抗病毒药物可显著降低新生儿感染HBV的风险。

成分血献血者献血前筛查不合格主要原因分析

目的分析成分血献血者献血前筛查项目不合格主要原因,以制定策略降低献血者献血前筛查不合格率。方法回顾性分析2018年11月26日至2019年8月26日4679例成分血献血者的献血前筛查结果。结果2018年11月26日至2019年8月26日期间成分血献血者献血前筛查总不合格率为21.29%,其中因WBC计数、PLT计数、ALT、Hb/HCT、乳糜、其他原因(健康征询、查体、病毒快速检定等)导致不合格的人数构成比分别为19.28%、6.93%、6.02%、56.62%、6.83%、4.32%,其中以Hb/HCT不合格者占比最多。将献血前筛查项目中因WBC计数、PLT计数、ALT、乳糜、其他原因不合格的献血者排除,对Hb/HCT合格与不合格献血者进行分组并分析两组人群的MCV、MCH、MCHC、RDW-CV,发现Hb/HCT不合格献血者群体的红细胞参数符合缺铁性贫血的血液学特征。结论成分血献血者中因Hb/HCT不合格导致献血前筛查被淘汰的比例较大,对于献血前筛查贫血的这部分成分血献血者,采供血机构应当积极关注其铁代谢指标,必要时给予其铁营养支持或补铁指导,在维护献血者健康的同时提升献血前筛查合格率。

去甲肾上腺素通过α2肾上腺素能受体调制小鼠小脑皮层浦肯野细胞自发性放电活动

小脑皮层浦肯野细胞(Purkinje cell,PC)具有简单峰电位(simple spike,SS)和复杂峰电位(complex spike,CS)两种放电形式。我们前期研究发现去甲肾上腺素(noradrenaline,NA)能够抑制PC的CS,双向调节SS,但是NA对SS的增强作用被其兴奋分子层中间神经元产生的强烈抑制所掩盖,目前为止NA对SS放电频率的增强作用机制尚不明确。因此本研究在活体小鼠小脑和急性小脑切片上,应用细胞贴附式及全细胞膜片钳记录与药理学方法,研究了NA增强小脑皮层PC的SS的机制。本研究全程采用100μmol/L picrotoxin阻断GABA受体。在体实验结果显示NA明显减少自发性CS的小穗(spikelets)数目,增强SS放电频率,而不影响CS的放电频率;离体实验显示NA减少了电刺激诱发的CS小穗数目和后超极化电位(after hyperpolarization potential,AHP),增加了SS放电频率,同时NA也减小了平行纤维(parallel fiber,PF)-PC的兴奋性突触后电流(excitatory postsynaptic current,EPSC)的振幅,明显提高了配对脉冲比值(paired-pulse ratio,PPR)。给予α2-肾上腺素能受体(adrenergic receptor,AR)阻断剂育亨宾(yohimbine)能够完全消除NA对SS的增强作用,而α2-AR激动剂UK14304提高了SS放电频率。β-AR阻断剂普萘洛尔(propranolol)不影响NA对PC的作用。上述结果表明阻断GABA能抑制性网络后,NA能够通过活化α2-AR(而不是β-AR)减弱爬行纤维(climbing fiber,CF)-PC突触传递,抑制CS,减小AHP,从而提高了PC的SS放电频率。该研究结果提示蓝斑核的NA能神经元能够通过调节CF-PC突触传递对PC信号输出进行精细微调节。

长期酒精摄入对小鼠小脑苔藓纤维-颗粒细胞突触可塑性及运动协调功能的影响

目的探究长期酒精摄入对小鼠小脑皮层苔藓纤维-颗粒细胞突触可塑性及运动功能的影响。方法 30只清洁级6~8周龄健康ICR小鼠(性别不限)按照随机数字表法分为生理盐水组(对照组)和酒精摄入组(酒精组),每组15只,酒精组小鼠每日腹腔注射浓度为15%乙醇(1.6 g/kg),对照组小鼠则注射同等剂量的生理盐水,1次/d,连续注射28 d。使用行走障碍实验和转棒疲劳实验观察小鼠的运动协调能力和学习能力;电生理膜片钳技术检测吹风刺激诱发的长时程突触可塑性的场电位变化。采用SPSS 22.0软件进行统计分析,独立样本t检验、配对t检验和重复测量方差分析进行两组间及干预前后的比较。结果电生理结果显示,吹风刺激后,对照组小鼠场电位N1波的振幅百分比[(130.4±3.3)%]高于刺激前[(100.6±2.7)%](t=27.07,P<0.01);刺激后N1波的波形下面积百分比[(128.8±4.5)%]较刺激前[(100.2±3.5)%]高(t=19.43,P<0.01)。吹风刺激后,酒精组小鼠N1波的振幅百分比[(97.8±4.3)%],与刺激前[(99.5±5.6)%]相比差异无统计学意义(t=0.93,P>0.05);刺激后N1波的波形下面积百分比[(96.8±3.6)%]与刺激前[(100.2±4.2)%]相比差异无统计学意义(t=2.38,P>0.05)。行走障碍实验结果显示,酒精组小鼠错误总数[(3.14±0.19)次]较对照组[(1.52±0.29)次]高(t=17.87,P<0.01),总错误时间[(63.85±9.34) ms]较对照组[(28.93±7.21) ms]长(t=11.45,P<0.01)。两组小鼠转棒疲劳实验数据使用重复测验方差分析,结果显示两组小鼠的跌落速度和跌落潜伏期均存在时间和组别的交互作用(F=4.5,455.1,均P<0.05)。酒精组小鼠第1~7天跌落速度明显低于对照组,均差异有统计学意义(均P<0.05);酒精组小鼠第1~7天跌落潜伏期均短于对照组,均差异有统计学意义(均P<0.05)。结论长期酒精摄入损害小鼠颗粒层突触可塑性并导致小鼠运动协调功能及运动学习能力明显下降。