高产的大鼠胰岛提取法

目的探寻经济、高产的大鼠胰岛分离纯化方法。方法Wistar大鼠分别以质量浓度为0.1%、0.05%及0.03%的!型胶原酶胆管灌注,灌注量6～8mL,经过静态及震荡2步消化法后,用Dextran不连续密度梯度法纯化胰岛。通过DTZ和AO/PI染色及葡萄糖刺激试验对分离纯化胰岛进行体外检测;通过体内肾被膜下移植检测其体内活性。结果3种胶原酶浓度平均胰岛收获量分别为(835±183)、(1243±339)及(711±103)个/只,通过体内外检测表明以0.1%、0.05%胶原酶分离纯化胰岛功能良好,0.05%收获量最大,0.05%和0.1%与0.03%之间比较P<0.05。结论以0.05%的胶元酶V6～8mL胆管灌注消化的方法是一种收获量较大,同时所提取胰岛数量多、活性良好,酶耗量较低的胰岛提取方法。