基于TGF-β/Smad3分析沉默TLR2基因对慢性尿路感染大鼠的影响

目的 探究沉默TLR2基因对慢性尿路感染模型大鼠作用机制。方法 将40只Sprague Dawley(SD)大鼠分为对照组、模型组、阴性对照(negative control, NC)组和试验组,试验组和NC组大鼠建立慢性尿路感染模型,建模后分别尾静脉注射sh-TLR2和sh-NC3试剂,每周1次。对照组和模型组注射等量生理盐水,连续3周比较大鼠体温。检测大鼠膀胱组织Toll样受体2(toll like receptor 2,TLR2)表达水平,同时检测大鼠膀胱和肾脏的菌落数和大鼠的尿白细胞和淋巴细胞计数,另外检测外周血炎症因子。检测各组大鼠膀胱组织的转化生长因子(transforming growth factor, TGF)-β、SMAD家庭成员3(Smad3)mRNA表达水平以及p-Smad3蛋白表达水平。结果 与对照组相比,模型组、NC组和试验组大鼠的体温显著上升,试验组大鼠的体温显著低于模型组和NC组。与对照组相比,模型组和NC组大鼠的膀胱和肾脏组织菌落数均显著升高,试验组大鼠的上述指标与模型组和NC组相比显著降低(模型组:t=-3.616、-22.972,P=0.002、<0.001;NC组:t=-3.950、23.974,P=0.001、<0.001);与对照组相比,模型组、NC组大鼠的尿白细胞和淋巴细胞计数显著上升,试验组低于模型组和NC组(模型组:t=-1.437、-1.082,P=0.168、0.293;NC组:t=-1.376、-0.712,P=0.186、0.485)。与对照组相比,模型组和NC组大鼠外周血的炎症因子显著上升;与NC组和模型组相比,试验组大鼠外周血的炎症因子显著降低。与对照组相比,模型组和NC组大鼠的TGF-β和Smad3 mRNA表达水平上升,与模型组和NC组相比,试验组大鼠的TGF-β和Smad3 mRNA表达水平显著降低(TGF-β:t=-6.371、-7.500,P<0.001;Smad3:t=-8.132、-7.406,P<0.001;p-Smad3:t=-20.586、-16.956,P<0.001)。与对照组相比,模型组和NC组大鼠的TGF-β、Smad3和p-Smad3的表达水平上升;与模型组和NC组相比,试验组大鼠的TGF-β、Smad3和p-Smad3表达水平显著降低(TGF-β:t=-13.483、-23.813,P<0.001;Smad3:t=-24.575、-12.622,P<0.001;p-Smad3:t=-31.328、-16.005,P<0.001)。结论 沉默TLR2可抑制慢性尿路感染大鼠的炎症因子表达,降低肾脏和膀胱组织的菌落数,其机制可能与膀胱的TGF-β/SMADS信号通路的调控相关。