人CD23基因的扩增及其在HEK 293T细胞的高效表达

目的建立一个有效表达CD23的系统。方法采用RT-PCR方法,从外周血淋巴细胞中扩增人的CD23cDNA基因,并将其克隆到真核表达载体pcDNA3·1B上,构建成pcDNA3·1/CD23质粒表达载体;将pcDNA3·1/CD23质粒转染HEK293T细胞,通过流式细胞仪和Westernblot检测CD23在细胞中的表达情况。结果扩增的CD23cDNA序列与文献报道的一致;通过构建表达载体和转染细胞实现了CD23cDNA在293T细胞膜上的表达。转染效率达80%以上,并获得了较高水平的表达。结论扩增CD23cDNA基因,经过转染HEK293T细胞,实现了CD23在HEK293T细胞的高效表达。

MT启动子控制的GFP基因在CHO细胞中的诱导表达

用羊金属硫蛋白(MT)启动子构建含绿色荧光蛋白(GFP)报告基因的真核表达载体,经脂质体介导在培养的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中进行诱导性表达。结果:构建的GFP基因表达载体能在CHO细胞中进行表达,用硫酸锌诱导可提高GFP的表达量。

不同方法处理724树脂对蛋清溶菌酶吸附作用的影响

以不同方法对724树脂进行再生处理,在同样的提取工艺条件下,分析了不同方法再生的树脂对蛋清溶菌酶提取活力及产量的影响。结果表明,724树脂经用45℃温水处理2h,3％HCI浸泡4h,3％NaOH浸泡6h,0.1mol/L pH6.5的磷酸缓冲液浸泡12h以上,再生出的724树脂提取蛋清溶菌酶的活力及产量最高,平均活力和产量分别为(3000±109.5)u/mg与2.24g/kg蛋清。在树脂与蛋清比例为1:6.25的情况下,每克湿树脂可吸附约43680个活性单位的溶菌酶。